2 × Hieff Canace ™ Advancefast High -Fidelity PCR Master Mix (dengan pewarna) -10164es

YeasenSKU: 10166ES01

Ukuran: 250 μl
Harga:
Harga penjualan$20.00
Saham:
Dalam stok


2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (Dengan Pewarna) adalah larutan siap pakai 2× yang sudah dicampur yang mengandung Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase, dNTP, dan sistem buffer yang dioptimalkan, yang berisi indikator elektroforesis yang telah ditambahkan sebelumnya. Campuran awal berisi indikator elektroforesis yang telah ditambahkan sebelumnya, produk PCR dapat dielektroforesis secara langsung, produk amplifikasi berupa ujung datar. 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye) memiliki keunggulan cepat dan mudah, sensitivitas tinggi, spesifisitas tinggi, stabilitas baik, dll., sistem reaksi dapat ditambahkan hanya dengan primer dan template. Selain itu, produk ini juga mengandung agen pelindung khusus, sehingga premix tetap dapat mempertahankan aktivitas stabil setelah pembekuan dan pencairan berulang kali.

Kesetiaan sangat tinggi: Tingkat ketidakcocokan rendah pada kelompok rentan mutasi gen GC tinggi;
Kecepatan cepat: Kecepatannya secepat 5 detik/kb;
Penerapan yang luas: Dapat digunakan untuk mengamplifikasi gen dengan kandungan GC 20-80%, dan mentoleransi lisat darah dan tikus 20%;
Stabilitas yang baik: Disimpan pada suhu 37°C selama 7 hari tanpa mempengaruhi kinerja;
Mudah digunakan: Hanya menambahkan primer dan templat untuk amplifikasi, dengan pewarna pemuatan biru untuk elektroforesis langsung.

Spesifikasi

Nomor Kucing. nomor 10164ES01 nomor 10164ES03 nomor 10164ES08
Ukuran 250 mikroliter 1 ml air 5×1ml

Angka

Gambar: Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase memiliki fidelitas tinggi dibandingkan dengan produk merek lain (A). Pengujian dilakukan dengan memeriksa frekuensi mutasi produk PCR dari 6 segmen kaya GC (sekitar 80%) yang diamplifikasi dari genom spesies yang berbeda. Produk PCR yang diamplifikasi oleh Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase dikloning ke dalam vektor, dan 100 klon tunggal yang dipilih untuk setiap sekuens dikenai sekuensing Sanger.

Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase memiliki kecepatan amplifikasi tinggi (B), kompatibilitas amplifikasi GC tinggi (C), dan toleransi darah (D). Hasil PCR dan pengurutan pelanggan menunjukkan bahwa Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase memiliki kinerja yang baik dalam hasil PCR dan spesifisitas (EH).

Penyimpanan

Produk ini harus disimpan pada suhu -25~-15℃ selama 1 tahun.

Instruksi

  1. Sistem reaksi PCR yang direkomendasikan.

Komponen

Volume (μL)

Terakhir konsentrasi

2x Campuran Master PCR Hieff Canace™ AdvanceFast (Dengan Pewarna)*

25

Ukuran 1×

Templat**

X

-

Maju Primer (10 μmol/L)***

2

0,4 mikromol/liter

Balik Primer (10 μmol/L)

2

0.4 mikromol/L

ddH2HAI

Hingga 50

-

Tabel 1 Sistem reaksi PCR

*Dalam premix 1× yang mengandung 2 mM Mg2+ dan 200 μM dNTP.

**Kisaran yang disarankan 10-200 ng, kisaran volume unggahan sampel cDNA tidak lebih dari 1/10 sistem reaksi, disarankan 1-2,5 μL.

***Konsentrasi primer akhir dalam sistem reaksi PCR berkisar antara 0,2-1 μM, dan yang direkomendasikan adalah 0,4 μM.

  1. Program reaksi.

Siklus melangkah

Suhu.

Waktu

Siklus

Denaturasi awal

98℃

30 detik

1

Denaturasi

98℃

10 detik

30-35

Anil*

60℃

5 detik

Perpanjangan**

72℃

5-10 detik/kb

Terakhir perpanjangan

72℃

2 menit

1

Tabel 2 Program reaksi PCR

*Suhu yang disarankan: 60°C, gradien suhu dapat diatur untuk menemukan suhu optimal untuk pemanasan primer. Waktu pemanasan yang disarankan diatur ke 5 detik dan dapat disesuaikan dari 5-30 detik. Waktu pemanasan yang terlalu lama dapat mengakibatkan produk amplifikasi yang menyebar pada gel.

**Waktu perpanjangan: Direkomendasikan 5 detik/kb, dapat juga diperpanjang hingga 10 detik/kb sesuai kebutuhan.

Catatan

  1. Produk ini hanya untuk keperluan penelitian.
  2. Harap bekerja dengan jas lab dan sarung tangan sekali pakai, demi keselamatan Anda.

Dokumen:

Buku Panduan

Kutipan & Referensi:

[1] Dong W, Zhu Y, Chang H, dkk. Modul SHR-SCR menentukan nasib sel korteks legum untuk memungkinkan nodulasi. Nature. 2021;589(7843):586-590. doi:10.1038/s41586-020-3016-z(JIKA:42.779)

[2] Sun L, Yan Y, Lv H, dkk. Rapamycin menargetkan STAT3 dan memengaruhi c-Myc untuk menekan pertumbuhan tumor. Cell Chem Biol. 2022;29(3):373-385.e6. doi:10.1016/j.chembiol.2021.10.006(JIKA:8.116)

[3] Ye M, Xiong L, Dong Y, dkk. Peran Potensial Gen Metionin Aminopeptidase PxMetAP1 pada Hama Kosmopolitan untuk Toleransi Toksin Bacillus thuringiensis. Int J Mol Sci. 2022;23(21):13005. Diterbitkan 27 Oktober 2022. doi:10.3390/ijms232113005(JIKA:6.208)

[4] He Y, Zhou J, Fu R, dkk. Aplikasi probe AuNP fungsional DNA-HRP dalam deteksi kolorimetri gen Alternaria yang terkait dengan jeruk. Talanta. 2022;237:122917. doi:10.1016/j.talanta.2021.122917(JIKA:6.057)

[5] Guo L, Yang W, Huang Q, dkk. Spektrometri Massa Spesifik Selenocysteine ​​Mengungkap Selenoproteom dan Kandidat Selenoprotein yang Berbeda pada Jaringan. Cell Chem Biol. 2018;25(11):1380-1388.e4. doi:10.1016/j.chembiol.2018.08.006(JIKA:5.592)

[6] Dou W, Zhu Q, Zhang M, Jia Z, Guan W. Penapisan dan evaluasi promotor endogen yang kuat di Pichia pastoris. Fakta Sel Mikroba. 2021;20(1):156. Diterbitkan 2021 Agustus 9. doi:10.1186/s12934-021-01648-6(JIKA:5.328)

[7] Xiong Y, Yi Y, Wang Y, Yang N, Rudd CE, Liu H. Ubc9 Berinteraksi dengan dan SUMOylate Adaptor TCR SLP-76 untuk Transkripsi NFAT dalam Sel T. J Immunol. 2019;203(11):3023-3036. doi:10.4049/jimmunol.1900556(JIKA:4.718)

[8] Huang L, Xiang M, Ye P, Zhou W, Chen M. Beta-catenin meningkatkan respons inflamasi akut yang dimediasi makrofag setelah infark miokard. Immunol Cell Biol. 2018;96(1):100-113. doi:10.1111/imcb.1019(JIKA:4.557)

[9] Wang X, Du A, Yu G, Deng Z, He X. Guanidine N-methylation oleh BlsL bergantung pada asilasi Beta-amine Arginine dalam biosintesis Blasticidin S. Front Microbiol. 2017;8:1565. Diterbitkan 22 Agustus 2017. doi:10.3389/fmicb.2017.01565(JIKA:4.076)

[10] Yu P, Zhou L, Yang WT, dkk. Analisis mitogenom komparatif mengungkap fitur mitogenom dan implikasi filogenetik dari subfamili Cobitinae. BMC Genomics. 2021;22(1):50. Diterbitkan 14 Januari 2021. doi:10.1186/s12864-020-07360-w(JIKA:3.969)

[11] Liu G, Liu Y, Niu B, dkk. Mutasi genetik TRPV2 menyebabkan kecemasan dengan menurunkan ekspresi GABA-B R2 di hipokampus. Biochem Biophys Res Commun. 2022;620:135-142. doi:10.1016/j.bbrc.2022.06.079(JIKA:3.575)

[12] Tan KS, Zhang Y, Liu L, dkk. Kloning molekuler dan karakterisasi protein mirip butirilkolinesterase atipikal pada ikan zebra. Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol. 2021;255:110590. doi:10.1016/j.cbpb.2021.110590(JIKA:2.231)

Storage

This product should be stored at -25~-15℃ for 1 years.

FAQ

When dealing with fragments larger than 10 kb, it is advisable to combine 68℃ with 10 sec/kb to enhance the amplification success rate. For fragments smaller than 10 kb, an amplification speed of 5 sec/kb can be used.
(1) This 10166ES product can accommodate cDNA amplification ranging from 1 kb to 14 kb. If you need to perform long fragment amplification, it is recommended to use the validated 11149ES reverse transcription kit from Yeasen Biotechnology to reverse transcribe the target RNA. The resulting cDNA template can then be used in conjunction with 10166ES for long fragment amplification.
(2) If the RNA sample is small or if you need to obtain a very long target fragment, it is recommended not to perform digestion during reverse transcription. The longer the target fragment, the more RNA needs to be input, and accordingly, more cDNA will be required.
10166ES is a high-fidelity PCR product. High fidelity means a lower error rate and more accurate sequences. However, different experimental methods may result in variations. Product mutations are low-probability events. It is recommended to perform multiple repeated sets of new amplifications to obtain unmutated amplification products.
Yes, after testing, the 10166ES can cover fragments with GC content ranging from 20% to 80%. When expanding fragments with a high GC content, it is recommended to adjust the temperature to 68℃, which will significantly increase the success rate.
The 10166ES can tolerate a certain amount of bacterial solution. After testing, it has been found that this product can tolerate bacterial solution at a proportion of 12.5% in the reaction system, and it has good specificity. If you need to directly expand the bacterial solution, please keep the proportion below 12.5%.
The 10166ES product can tolerate a certain amount of cDNA stock solution, which contains residual RNA and degraded RNA. Therefore, cDNA containing uracil can be used as the template. However, there is a certain range. After product performance testing, 10166ES can meet the requirement of a cDNA input volume accounting for 15% of the reaction system.
(1) For plant genomes, after product performance testing, it can detect as low as 100pg of plant genome.
(2) For animal genomes, after product performance testing, the minimum detectable amount is 100pg of animal genome.
(3) For plasmids, since they are relatively pure, after product performance testing, the minimum detectable amount is 1pg of plasmid.
Possible causes and solutions:
(1)The thawing requirements for 10166ES stipulate that it should be thawed slowly on ice, and it cannot be thawed at room temperature or through heating.
(2) When performing the amplification process, it is recommended to set the temperature at 68℃ and the amplification speed at 10 seconds per kilobase.
(3) The longer the target fragment to be amplified is, the more template should be used.
(4) In the PCR system, the concentration of primers is too low or the number of cycles is insufficient: appropriately increase the amount of primers, or increase the number of amplification cycles;

Citations

Applications

Anda mungkin juga menyukai

Pertanyaan

FAQ

Produk ini hanya untuk keperluan penelitian dan tidak ditujukan untuk penggunaan terapeutik atau diagnostik pada manusia atau hewan. Produk dan konten dilindungi oleh paten, merek dagang, dan hak cipta milik Yeasen Bioteknologi. Simbol merek dagang menunjukkan negara asal, belum tentu pendaftaran di semua wilayah.

Aplikasi tertentu mungkin memerlukan hak kekayaan intelektual pihak ketiga tambahan.

Yeasen didedikasikan untuk ilmu etika, meyakini penelitian kami harus menjawab pertanyaan kritis sambil memastikan standar keselamatan dan etika.