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डी-लूसिफ़ेरिन लूसिफ़ेरेज़ के लिए एक सामान्य सब्सट्रेट है और इसका व्यापक रूप से जैव प्रौद्योगिकी में उपयोग किया जाता है, विशेष रूप से इन विवो इमेजिंग तकनीक में। क्रिया का तंत्र यह है कि लूसिफ़ेरिन (सब्सट्रेट) को एटीपी और लूसिफ़ेरेज़ की उपस्थिति में प्रकाश उत्सर्जित करने के लिए ऑक्सीकृत किया जा सकता है। जब फ्लोरेसिन अधिक मात्रा में होता है, तो उत्पादित प्रकाश की क्वांटम संख्या लूसिफ़ेरेज़ सांद्रता के बराबर होती है जो सकारात्मक रूप से सहसंबंधित होती है (नीचे चित्र देखें)। लूसिफ़ेरेज़ एन्कोडिंग जीन (ल्यूक) ले जाने वाले प्लास्मिड को कोशिकाओं में स्थानांतरित किया गया और चूहों और चूहों जैसे अध्ययन जानवरों में पेश किया गया।
डी-लूसिफ़ेरिन का उपयोग आमतौर पर इन विट्रो अध्ययनों में भी किया जाता है, जिसमें ल्यूसिफ़रेज़ और एटीपी स्तर विश्लेषण; रिपोर्टर जीन विश्लेषण; उच्च-थ्रूपुट अनुक्रमण और विभिन्न संदूषण परीक्षण शामिल हैं। तीन उत्पाद रूप हैं: डी-लूसिफ़ेरिन (मुक्त एसिड), डी-लूसिफ़ेरिन नमक (सोडियम नमक और पोटेशियम नमक)। मुख्य अंतर घुलनशीलता में है: पूर्व की पानी में घुलनशीलता और बफर सिस्टम की घुलनशीलता। वे कम सांद्रता वाले NaOH और KOH घोल जैसे कमजोर आधारों को छोड़कर कम घुलनशील होते हैं। मेथनॉल और DMSO में घुलनशील; बाद वाले को पानी या बफर में आसानी से घोला जा सकता है, उपयोग में आसान है।
विशेषताएँ
- कोई विकिरण नहीं, जीवित जीवों के लिए लगभग हानिरहित।
- बायोलुमिनेसेंस, कोई उत्तेजना प्रकाश स्रोत नहीं।
- यह इतना संवेदनशील है कि आप इसे कुछ सौ कोशिकाओं में ही पहचान सकते हैं।
- अच्छी पैठ, 3-4 सेमी ऊतक गहराई अभी भी पता लगाया जा सकता है।
- उच्च संकेत-से-शोर अनुपात, मजबूत प्रतिदीप्ति संकेत और अच्छा हस्तक्षेप-विरोधी।
अनुप्रयोग
- नग्न चूहों में ट्यूमरजनन प्रयोग में, ट्यूमर की वृद्धि को बिना किसी आक्रमण के, वास्तविक समय में, ट्यूमर स्ट्रिपिंग माप के बिना देखा गया।
- ट्यूमर के विकास या मेटास्टेसिस पर प्रशासन के प्रभाव का परीक्षण करने के लिए, फ्लोरेसिन सब्सट्रेट को दवा प्रयोग में हस्तक्षेप किए बिना, 3 घंटे के भीतर पूरी तरह से समाप्त किया जा सकता है।
- पशुओं में विदेशी कोशिकाओं के स्थानीयकरण और वितरण का पता लगाया गया।
- दवा उपचार या रोग की प्रगति के दौरान जीन अभिव्यक्ति में परिवर्तन का पता लगाने के लिए लक्ष्य जीन या लक्ष्य जीन के प्रमोटर को ल्यूसिफ़रेज़ जीन के साथ जोड़ा जाता है।
- स्टेम कोशिका प्रत्यारोपण, उत्तरजीविता और प्रसार की निगरानी करना; जीव में स्टेम कोशिकाओं के वितरण और प्रवास का पता लगाना।
विशेष विवरण
| अंग्रेजी पर्यायवाची | (एस)-4,5-डायहाइड्रो-2-(6-हाइड्रॉक्सी-2-बेंजोथियाज़ोलिल)-4-थियाज़ोलकार्बोक्सिलिक एसिड पोटेशियम नमक; डी-लूसिफ़ेरिन फ़ायरफ़्लाई, पोटेशियम नमक |
| CAS संख्या। | 115144-35-9 |
| FORMULA | C11H7N2O3S2K |
| आणविक वजन | 318.42 ग्राम/मोल |
| उपस्थिति | हल्का पीला पाउडर |
| घुलनशीलता | पानी में घुलनशील(60 मिलीग्राम/एमएल) |
अवयव
| घटक सं. | नाम | 40902ES01 | 40902ES02 | 40902ES03 | 40902ES08 |
| 40902 | डी-लूसिफ़ेरिन, पोटेशियम नमक | 100मिग्रा | 500 मिलीग्राम | 1 ग्राम | 5जी |
आंकड़ों
"फॉस्फोग्लाइसेरेट म्यूटेस 1 का एक नया एलोस्टेरिक अवरोधक गैर-लघु-कोशिका फेफड़ों के कैंसर के विकास और मेटास्टेसिस को दबाता है, सेल मेटाब" से उद्धृत।2019;30(6):1107-1119
शिपिंग और भंडारण
उत्पाद सूखी बर्फ के साथ भेजा जाता है और इसे -15 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया जा सकता है ~ -25℃ 1 के लिए वर्ष।
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Storage
FAQ
1) Solubility: The salt form is easily soluble in water. The solubility of potassium salt is 60mg/ml, and that of sodium salt is 100mg/ml. Free acid is not easily soluble in water. It can be dissolved by a weak alkaline solution of sodium bicarbonate, and its solubility in methanol is 10mg/ml, and in DMSO is 50mg/ml.
2) Toxicity: The salt form is more convenient to use during the process, especially in in vivo imaging experiments, as it can dissolve in water and the reaction toxicity will be smaller (Fluorescein is a low-molecular-weight organic compound composed of phenylthiazole and thiazole carboxyl group, with low toxicity).
3) Usage effect: There is no significant difference. In in vivo experimental studies, the usage rate of potassium salt is higher.
2. Native coelenterazine is an action substrate for various luciferases such as sea kidney luciferase (Rluc) and Gaussia luciferase (Gluc).
1. Instruments with a biochemiluminescence detection module. The light produced by luciferin can be detected by a photometer or a scintillation counter. Common in vivo imaging instruments: such as the IVIS® Lumina small animal in vivo imaging system, the In-Vivo Xtreme multi-mode small animal in vivo imaging instrument from Bruker, Germany.
2. Multi-functional microplate readers: It is necessary to confirm with the instrument manufacturer whether it is a specific biochemiluminescence detection module (note: cannot use a fluorescence microscope).
2. The cells themselves also contain a certain amount of ATP and magnesium, which can promote the reaction. In most cases, the ATP and magnesium contained in the cells are sufficient for the reaction of D-fluorescein salt, but the content varies depending on the type of cells. You can first try using a culture medium without additional ATP and magnesium, and conduct the experiment normally to see the results.
1) Injection method: It can be done through intraperitoneal injection or tail vein injection.
2) Injection volume: The scientific approach is to evaluate the injection dose based on the kinetic curve. The initial attempted injection dose is: 150mg substrate/kg of mouse body weight. Therefore, the purchase quantity can be calculated according to the above method: If there are 10 mice, 22 - 25g, then 33 - 37.5mg of substrate is required.
Citations
Documents
| Brochure |
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| In_vivo_imaging_Leaving_Tumor_Cells_Nowhere_to_Hide.pdf |
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यह उत्पाद केवल शोध उद्देश्यों के लिए है और मनुष्यों या जानवरों में चिकित्सीय या नैदानिक उपयोग के लिए अभिप्रेत नहीं है। उत्पाद और सामग्री येसेन बायोटेक्नोलॉजी के स्वामित्व वाले पेटेंट, ट्रेडमार्क और कॉपीराइट द्वारा संरक्षित हैं। ट्रेडमार्क प्रतीक मूल देश को इंगित करते हैं, जरूरी नहीं कि सभी क्षेत्रों में पंजीकरण हो।
कुछ अनुप्रयोगों के लिए अतिरिक्त तृतीय-पक्ष बौद्धिक संपदा अधिकारों की आवश्यकता हो सकती है।
येसेन नैतिक विज्ञान के प्रति समर्पित हैं, उनका मानना है कि हमारे शोध में सुरक्षा और नैतिक मानकों को सुनिश्चित करते हुए महत्वपूर्ण प्रश्नों का समाधान किया जाना चाहिए।