हाईफ़ ट्रांस™ लिपोसोमल ट्रांसफेक्शन अभिकर्मक सामान्य प्रश्न

(1) प्रश्न: क्या न्यूक्लिक एसिड ट्रांसफेक्शन अभिकर्मक कॉम्प्लेक्स तैयार करते समय सीरम मौजूद हो सकता है?

उत्तर: सीरम की उपस्थिति लिपोसोम के निर्माण को प्रभावित करेगी। न्यूक्लिक एसिड ट्रांसफ़ेक्शन अभिकर्मक परिसरों की तैयारी करते समय सीरम-मुक्त माध्यम (आमतौर पर एमईएम माध्यम) का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है।

(2) प्रश्न: क्या अभिकर्मक अभिकर्मक को जमाया जा सकता है?

उत्तर: नहीं। इस अभिकर्मक को 2-8 ℃ पर संग्रहित किया जाना चाहिए, और लंबे समय तक बार-बार टोपी खोलने से बचने के लिए देखभाल की जानी चाहिए, क्योंकि टोपी के लंबे समय तक खुले रहने से लिपोसोम ऑक्सीकरण हो जाएगा और अभिकर्मक दक्षता प्रभावित होगी।

(3) प्रश्न: Hieff Trans™ Liposome Nucleic Acid Transfection Reagent का उपयोग करते समय मुझे क्या ध्यान देना चाहिए?

ए: 1) अभिकर्मक ऑपरेशन के दौरान, यह बेहतर है कि सेल संगम 80% -95% तक पहुंच जाए, और विशिष्ट चढ़ाना घनत्व कोशिकाओं की स्थिति के अनुसार निर्धारित किया जाता है;

2) उच्च शुद्धता वाले डीएनए का उपयोग उच्च ट्रांसफ़ेक्शन दक्षता प्राप्त करने में मदद करता है;

3) ट्रांसफेक्शन कॉम्प्लेक्स तैयार करते समय डीएनए और ट्रांसफेक्शन अभिकर्मकों को सीरम-मुक्त माध्यम से पतला करना आवश्यक है;

4) ट्रांसफ़ेक्शन के दौरान एंटीबायोटिक्स को माध्यम में नहीं मिलाया जा सकता;

5) अधिकतम ट्रांसफ़ेक्शन दक्षता प्राप्त करने के लिए पहले उपयोग के लिए डीएनए सांद्रता और कैशनिक लिपोसोम अभिकर्मक की मात्रा को अनुकूलित किया जाना चाहिए। ट्रांसफ़ेक्शन अभिकर्मक के लिए डीएनए का अनुपात है सामान्यतः 1:2-1:3 की अनुशंसा की जाती है।

(4) प्रश्न: क्या ट्रांसफ़ेक्शन के बाद इसे समाप्त करने की आवश्यकता है?

उत्तर: कोई ज़रूरत नहीं है। लिपोसोम कॉम्प्लेक्स 6 घंटे तक स्थिर रहते हैं। यदि ट्रांसफ़ेक्शन से पहले सेल माध्यम को नहीं बदला जाता है, तो सामान्य सेल वृद्धि के लिए आवश्यक पोषक तत्वों को सुनिश्चित करने के लिए, 4 से 6 घंटे के बाद एक नए माध्यम में बदलना आवश्यक है। हालाँकि, यदि ट्रांसफ़ेक्शन से पहले माध्यम को बदल दिया गया है, तो लिपोसोम ट्रांसफ़ेक्शन के बाद माध्यम को बदलना आवश्यक नहीं है।

(5) प्रश्न: यदि मैं अभिकर्मक दक्षता में सुधार करना चाहता हूं तो मुझे क्या ध्यान देना चाहिए?

उत्तर: अभिकर्मन के समय कोशिकाओं का घनत्व 90%-95% होता है।

b: अभिकर्मक के दौरान, न्यूक्लिक एसिड और लाइपोसोम कमजोरीकरण के लिए एमईएम सीरम मुक्त माध्यम का उपयोग करें।

c: अभिकर्मन के 4-6 घंटे बाद माध्यम को बदला जा सकता है।

(6) प्रश्न: क्या डीएनए और siRNA का सह-संक्रमण किया जा सकता है? इसका प्रभाव कैसा है?

उत्तर: सह-संक्रमण किया जा सकता है, लेकिन अलग-अलग संक्रमण करने की सिफारिश की जाती है, और डीएनए संक्रमण siRNA के 6 घंटे बाद किया जाना चाहिए। यदि एक साथ संचालित किया जाता है, तो siRNA संक्रमण दक्षता खराब होगी।

(7) प्रश्न: क्या ट्रांसफ़ेक्शन अभिकर्मक का उपयोग लेंटिवायरल पैकेजिंग ट्रांसफ़ेक्शन के लिए किया जा सकता है?

उत्तर: लेंटिवायरल पैकेजिंग संभव है, लेकिन लेंटिवायरल पैकेजिंग की दक्षता आवश्यक रूप से ट्रांसफेक्शन की दक्षता से संबंधित नहीं है, बल्कि पैकेजिंग प्लास्मिड के चयन और प्लास्मिड के बीच के अनुपात से भी संबंधित है।

(8) प्रश्न: क्या Hieff Trans™ लिपोसोम न्यूक्लिक एसिड ट्रांसफेक्शन अभिकर्मक का उपयोग निलंबन कोशिकाओं के ट्रांसफेक्शन के लिए किया जा सकता है?

उत्तर: Hieff Trans™ लिपोसोम न्यूक्लिक एसिड ट्रांसफ़ेक्शन अभिकर्मक का उपयोग सस्पेंशन सेल ट्रांसफ़ेक्शन के लिए किया जा सकता है, विवरण के लिए प्रोटोकॉल देखें। इसके अलावा, हमने विशेष रूप से सस्पेंशन सेल के लिए एक ट्रांसफ़ेक्शन अभिकर्मक भी लॉन्च किया है (कैट नंबर 40805, सस्पेंशन सेल के लिए लिपोसोम न्यूक्लिक एसिड ट्रांसफ़ेक्शन अभिकर्मक)।

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