हाईफेयरटीएम लियो-रेडी मैं मल्टीप्लेक्स वन स्टेप RT-qPCR किट（यूडीजी प्लस) टेम्पलेट के रूप में आरएनए पर आधारित एक मल्टीप्लेक्स क्वांटिटेटिव पीसीआर किट है। प्रयोग की प्रक्रिया में, रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन और क्वांटिटेटिव पीसीआर को एक ही ट्यूब में किया गया, जिससे प्रायोगिक संचालन सरल हो गया और संदूषण का खतरा कम हो गया। अद्वितीय बफर और एंजाइम डिजाइन यह सुनिश्चित करता है कि इसका उपयोग एक-चरण आरटी-क्यूपीसीआर लाइओफिलाइज्ड प्रतिक्रिया प्रणालियों की तैयारी और उत्पाद डिजाइन में किया जा सकता है.
इस किट में, पहले स्ट्रैंड cDNA को गर्मी प्रतिरोधी हाईफेयर द्वारा कुशलतापूर्वक संश्लेषित किया गया थाटीएम रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस और यूनिकॉन द्वारा मात्रात्मक रूप से प्रवर्धितटीएम हॉटस्टार्ट टैक डीएनए पॉलीमरेज़। किट में मुख्य रूप से अनुकूलित शामिल हैं एलयोफिलिज़ेबल बफर, एंजाइम मिश्रण, आदि। इसके अलावा, ऐसे कारक जो गैर-विशिष्ट पीसीआर प्रवर्धन को प्रभावी ढंग से रोक सकते हैं और कई qPCR प्रतिक्रियाओं की प्रवर्धन दक्षता में सुधार कर सकते हैं, जो प्रवर्धन दक्षता सुनिश्चित कर सकते हैं और कई प्रवर्धन प्रतिक्रिया तक ले जा सकते हैं।
यह किट सुसज्जित है एलयोप्रोटेक्टेंट जिसका उपयोग लाइओफिलाइज़ेशन के लिए किया जा सकता है.
विशेष विवरण
| घटक सं. | 16645तों60 / 16645तों80 / 16645ES92 |
| आकार | 100 टी / 1000 टी / 10000 टी |
अवयव
| नाम | 16645ईएस60 (100टी) | 16645ईएस80 (1,000टी) | 16645ईएस92 (10,000टी) | |
| 16645-ए | 4×हाईफेयरटीएम लियो-बफर | 600 μएल | 6 एमएल | 60 एमएल |
| 16645-बी | हाईफेयरटीएम लियो-एंजाइम मिश्रण | 100 μएल | 1 एमएल | 10 एमएल |
| 16645-सी | लियोप्रोटेक्टेंट | 800 μएल | 8 एमएल | 80 एमएल |
भंडारण
उत्पाद इसे 1 वर्ष के लिए -25℃ ~ -15℃ तापमान पर संग्रहित किया जाना चाहिए। इसे बार-बार जमने और पिघलने से बचाना चाहिए।
निर्देश
1. प्रतिक्रिया संरचना:
| अवयव | आयतन (μएल) | अंतिम एकाग्रता |
| 4×हाईफेयरटीएम लियो-बफर | 6 | 1× |
| हाईफेयरटीएम लियो-एंजाइम मिश्रण | 1 | - |
| लियोप्रोटेक्टेंट | 8 | - |
| प्राइमर मिश्रण (10 μM) | 1 | |
| जांच मिश्रण (10 μM) | 0.5 | 0.05-0.5μएम |
| टेम्पलेट आरएनए | 5 | - |
| डीईपीसी एच2हे | से 25 | - |
टिप्पणी:उपयोग से पहले अच्छी तरह मिश्रण तैयार कर लें, तथा तीव्र कंपन के कारण उत्पन्न अत्यधिक बुलबुले से बचें।
2. अनुकूलित साइक्लिंग प्रोटोकॉल
(1) मानक प्रवर्धन प्रक्रिया
| प्रतिक्रिया चरण | तापमान | समय | चक्र | |
| 1 | रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन | 50 डिग्री सेल्सियसए | 1 | |
| 2 | प्रारंभिक विकृतीकरण | 95° सेल्सियस | 5 मिन | 1 |
| 3 | प्रवर्धन प्रतिक्रिया | 95° सेल्सियस |
| 45 चक्र |
| 60 डिग्री सेल्सियसबी | 30 सेकंडसी |
(2) तीव्र प्रवर्धन कार्यक्रम
|
| प्रतिक्रिया चरण | तापमान | समय | चक्र |
| 1 | रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन | 50 डिग्री सेल्सियसए | 2 मिन | 1 |
| 2 | प्रारंभिक विकृतीकरण | 95° सेल्सियस | 2 सेकंड | 1 |
| 3 | प्रवर्धन प्रतिक्रिया | 95° सेल्सियस |
| 45 चक्र |
| 60 डिग्री सेल्सियसबी | 13 सेकंडसी |
टिप्पणी:
a) रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन: तापमान 42°C या 50°C का चयन किया जा सकता है 10-15 मिनट के लिए.
बी) प्रवर्धन प्रतिक्रिया: तापमान को डिज़ाइन किए गए प्राइमरों के Tm मान के अनुसार समायोजित किया जाता है।
ग) प्रतिदीप्ति संकेत अधिग्रहण: कृपया उपकरण मैनुअल की आवश्यकताओं के अनुसार प्रयोगात्मक प्रक्रिया निर्धारित करें।
3. आवेदन उपकरण
रॉक्स के साथ उपकरण:एबीआई 5700, 7000, 7300, 7700, 7900एचटी फास्ट, स्टेपवन™, स्टेपवन प्लस™
कम रॉक्स वाले उपकरण:एबीआई 7500, 7500 फास्ट, ViiA™7, क्वांटस्टूडियो™ 3 और 5, क्वांटस्टूडियो™ 6,7,12k फ्लेक्स
स्ट्रैटेजेन MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™
रॉक्स के बिना उपकरण:
बायो-राडी सीएफएक्स96™, सीएफएक्स384™, आईसाइक्लर आईक्यू™, आईक्यू™5, माईआईक्यू™, मिनीऑप्टिकॉन™, ऑप्टिकॉन®, ऑप्टिकॉन® 2, क्रोमो4™
एप्पेनडॉर्फ़ मास्टरसाइक्लर® ईपी रियलप्लेक्स, रियलप्लेक्स 2 एस; Qiagen कॉर्बेट रोटर-जीन® क्यू, रोटर-जीन® 3000, रोटर-जीन® 6000
रोश एप्लाइड साइंस लाइटसाइक्लर® 480, लाइटसाइक्लर® 2.0, लाइटसाइक्लर® 96
थर्मामीटरों वैज्ञानिक पिकोरियल साइक्लर; सेफीड स्मार्टसाइक्लर®; Illumina इको क्यूपीसीआर
नोट्स
कृपया अपने स्वास्थ्य और सुरक्षा को सुनिश्चित करने के लिए आवश्यक पीपीई, जैसे लैब कोट और दस्ताने पहनें!
कृपया RNasefree उपभोग्य सामग्रियों का उपयोग करें के लिए प्रयोग.
यह उत्पाद निम्न के लिए है अनुसंधान केवल उपयोग!
लाइओफिलाइज़ेशन प्रक्रिया
इस किट का उपयोग सीधे तौर पर लाइओफिलाइज़ेशन के लिए किया जा सकता है, या आप इस आधार पर विभिन्न प्राइमरों के लिए एक्सीपिएंट्स की खोज कर सकते हैं।इस अभिकर्मक की मानक लाइओफिलाइज़ेशन प्रक्रिया इस प्रकार है:
| प्रक्रिया | तापमान | निर्धारित समय | अवधि | वैक्यूम एमबार |
| प्रीलायोफिलाइज़ेशन | -45℃ | 10 मिनट | 60 मिनट | —— |
| प्रारंभिक फ्रीज-ड्राइंग चरण | -45 ℃ | 10मिनट | 60मिनट | 0.01एमबार |
| -40 ℃ | 10मिनट | 900मिनट | 0.01एमबार | |
| -35 ℃ | 10मिनट | 60मिनट | 0.01एमबार | |
| -30 ℃ | 20मिनट | 60मिनट | 0.01एमबार | |
| -20 ℃ | 20मिनट | 60मिनट | 0.01एमबार | |
| 0 ℃ | 20मिनट | 60मिनट | 0.01एमबार | |
| दबाव निर्मित परीक्षण | ||||
| विश्लेषणात्मक सुखाने का चरण | 5 ℃ | 10मिनट | 20मिनट | 0.01एमबार |
| 10 ℃ | 10मिनट | 20मिनट | 0.01एमबार | |
| 15 ℃ | 10मिनट | 20मिनट | 0.01एमबार | |
| 20 ℃ | 10मिनट | 20मिनट | 0.01एमबार | |
| 25 ℃ | 10मिनट | 240मिनट | 0.01एमबार | |
| दबाव निर्मित परीक्षण | ||||
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कुछ अनुप्रयोगों के लिए अतिरिक्त तृतीय-पक्ष बौद्धिक संपदा अधिकारों की आवश्यकता हो सकती है।
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