आरएनएसे एचआईआई एक राइबोन्यूक्लिऐस आंतरिक एंजाइम है जो पाइरोकोकस एबिस्सी और पुनः संयोजक रूप से व्यक्त किया गया ई कोलाईयह डीएनए-आरएन-डीएनए/डीएनए डबल स्ट्रैंड को पहचानता है, उस जगह पर काटता है जहां राइबोन्यूक्लियोटाइड्स को डीएनए में शामिल किया जाता है। हालांकि, सिंगल-स्ट्रैंडेड आरएनए पर इसकी गतिविधि बहुत कम है, और यह डीएसडीएनए या एसएसडीएनए पर कोई काटने की गतिविधि नहीं दिखाता है। आरएनएसे एचआईआई 5' छोर से एकल राइबोन्यूक्लियोटाइड अवशेष के स्थान पर काटता है, जिससे काटने के बाद 5' फॉस्फेट समूह और 3' हाइड्रॉक्सिल छोर बनता है। इस आरएनएसे एचआईआई एंजाइम की अधिकतम सक्रियता 70~75°C पर होती है, यह 50°C और 75°C के बीच सक्रिय होता है, लेकिन कमरे के तापमान पर इसकी सक्रियता बहुत कम होती है। यह उत्पाद अत्यधिक थर्मोस्टेबल है, 45 मिनट के लिए 95°C पर ऊष्मायन के बाद गतिविधि में लगभग कोई कमी नहीं होती है, और यह विभिन्न पीसीआर प्रतिक्रिया प्रणालियों के साथ संगत है।
विशेष विवरण
| कैट.नं. | 14539ES80/14539ES92 |
| आकार | 50 यू / 250 यू |
| प्रजातियाँ | पाइरोकोकस एबिस्सी, पेनसिल्वेनिया |
अवयव
| नाम | 14539ES50 (50यू) | 14539ES72 (250यू) |
| आरएनसे HII（2 U/μL） | 25 μएल | 125 μएल |
भंडारण
इस उत्पाद को -25~-15℃ पर संग्रहित किया जाना चाहिए दो वर्षों के लिए।
उत्पाद व्यवहार्यता
- उच्च संवेदनशीलता जांच के साथ LAMP द्वारा पता लगाना।
- आरएनएसे एचआईआई-आश्रित पीसीआर (आरएचपीसीआर)।
- पॉलीमरेज़ श्रृंखला अभिक्रिया के दौरान निर्मित बेमेल राइबोन्यूक्लियोटाइड्स को हटाना।
- ओकाजाकी टुकड़ों के आरएनए भाग का क्षरण।
नोट्स
- यह प्रॉडक्ट केवल शोध के उपयोग के लिए है।
- कृपया अपनी सुरक्षा के लिए लैब कोट और डिस्पोजेबल दस्ताने पहनकर काम करें।
आंकड़ों
1. ई. कोली जीनोमिक डीएनए अवशेष < 0.5 प्रतियां/100 यू
का पता लगाना ई कोलाई RNase HII के विभिन्न बैचों में जीनोमिक डीएनए अवशेषों के अध्ययन से पता चला कि YEASEN के RNase HII के मेजबान जीनोमिक डीएनए अवशेष 0.5 प्रतियां/100 यू से बहुत कम हैं।
चित्र 4. का पता लगाना ई कोलाई जीनोमिक डीएनए अवशेष
2. 95°C ताप प्रतिरोध परीक्षण
RNase HII को 0 से 45 मिनट तक 95°C पर गर्म करने के बाद, RNase HII की एंजाइम गतिविधि का परीक्षण किया गया। परिणामों से पता चला कि 45 मिनट तक गर्म करने के बाद भी YEASEN के RNase HII में एंजाइम गतिविधि में लगभग कोई कमी नहीं आई।
चित्र 5. 95°C ताप प्रतिरोध परीक्षण
3. कोई एक्सोन्यूक्लिऐस, निकिंग एंजाइम या आरएनज़ अवशेष नहीं (1 यू खुराक)
आरएनसे एचआईआई के विभिन्न बैचों के 1 यू को उनके संबंधित सब्सट्रेट डीएनए/आरएनए के साथ 37 डिग्री सेल्सियस पर 4 घंटे तक इनक्यूबेट करने पर, एगरोज जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस के परिणामों ने संकेत दिया कि आरएनसे एचआईआई में कोई एक्सोन्यूक्लिऐस, निकिंग एंजाइम या आरएनसे अवशेष नहीं था।
चित्र 6. एक्सोन्यूक्लिऐस, निकिंग एंजाइम और आरएनेज अवशेष का पता लगाना
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