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एक्सोन्यूक्लिअस I, आनुवंशिक रूप से इंजीनियर से प्राप्त ई कोलाई एक्सो I जीन को व्यक्त करने वाला स्ट्रेन, एक्सोन्यूक्लिअस गतिविधि प्रदर्शित करता है जो 3' से 5' छोर तक एकल-रज्जुक वाले डीएनए को पचाता है। यह क्रमिक रूप से डीऑक्सीराइबोन्यूक्लियोटाइड 5'-मोनोफॉस्फेट जारी करता है, जिससे 5'-टर्मिनल डाइन्यूक्लियोटाइड की अखंडता को संरक्षित किया जाता है। इस एंजाइम का उपयोग मुख्य रूप से पीसीआर प्रवर्धन के बाद प्राइमरों के टूटने और हटाने के लिए किया जाता है। यह डबल-रज्जुक वाले डीएनए और 3' हाइड्रॉक्सिल सिरों वाले डीएनए स्ट्रैंड के प्रति निष्क्रिय रहता है जो फॉस्फोराइलेशन या एसिटिलेशन द्वारा अवरुद्ध होते हैं।
विशेषताएँ
कोई अवशिष्ट एक्सोन्यूक्लिऐस (डबल-स्ट्रैंडेड), एंडोन्यूक्लिऐस या आरएनेज़ नहीं
इसे 15 मिनट तक 80°C पर उपचारित करने मात्र से निष्क्रिय किया जा सकता है
अनुप्रयोग
सेंगर डीएनए अनुक्रमण या एसएनपी विश्लेषण से पहले पीसीआर प्रतिक्रिया प्रणाली से एकल-रज्जुक प्राइमरों को हटा दें
नेस्टेड पीसीआर प्रतिक्रिया प्रणाली से सिंगल-स्ट्रैंडेड प्राइमर्स को हटाएँ
नमूने से रैखिक एकल-रज्जुक डीएनए को हटा दें, तथा पीछे दोहरे-रज्जुक डीएनए को छोड़ दें
विशेष विवरण
| एसस्रोत देखें | ई कोलाई |
| आणविक वजन | 55 केडीए |
| एकाग्रता | 20 यू/μएल |
| इकाई डीपरिभाषा | एक इकाई को 50 μ में 0.17 मिलीग्राम / एमएल की एकाग्रता पर एकल-रज्जुक [3H]-डीएनए से एसिड-घुलनशील न्यूक्लियोटाइड के 10 एनएमओएल की रिहाई को उत्प्रेरित करने के लिए आवश्यक एंजाइम की मात्रा के रूप में परिभाषित किया गया है।एल 30 मिनट के भीतर 37°C पर 1X एक्सोन्यूक्लिअस I प्रतिक्रिया बफर युक्त प्रतिक्रिया प्रणाली |
अवयव
| अवयव नहीं। | नाम | 14535तों80 | 14535तों90 |
| 14535-ए | एक्सोन्यूक्लिऐस मैं (20 यू/μएल) | 250 μएल | |
| 14535-बी | 10×एक्सोन्यूक्लिऐस I प्रतिक्रिया बफर | 1 एमएल | 1 एमएल |
शिपिंग और भंडारण
इस उत्पाद को -25 ~ -15 पर संग्रहित किया जाना चाहिए℃ दो वर्षों के लिए।
आंकड़ों
चित्र 1. एकल-रज्जुक डीएनए पर एक्सोन्यूक्लिऐस I की पाचन क्षमता
नोट: 20 μL प्रतिक्रिया प्रणाली में, 15 pmol/μL एकल-रज्जुक डीएनए सब्सट्रेट की अंतिम सांद्रता जोड़ी गई। येसेन और आपूर्तिकर्ता A के एक्सोन्यूक्लिएज I की अलग-अलग मात्रा (0.63, 1.25, 2.5, 5, 10, 20 U) का उपयोग किया गया और 15 मिनट के लिए 37°C पर ऊष्मायन किया गया, उसके बाद 15 मिनट के लिए 80°C पर ऊष्मा निष्क्रियता की गई। एकल-रज्जुक डीएनए के क्षरण का पता लगाने के लिए पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन का उपयोग किया गया। परिणामों ने प्रदर्शित किया कि येसेन के एक्सोन्यूक्लिएज I में आपूर्तिकर्ता A के समान एकल-रज्जुक डीएनए को पचाने की क्षमता है।
दस्तावेज़:
सुरक्षा डेटा पत्रक
14535_एमएसडीएस_संस्करण.EN20241210.पीडीएफ
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कुछ अनुप्रयोगों के लिए अतिरिक्त तृतीय-पक्ष बौद्धिक संपदा अधिकारों की आवश्यकता हो सकती है।
येसेन नैतिक विज्ञान के प्रति समर्पित हैं, उनका मानना है कि हमारे शोध में सुरक्षा और नैतिक मानकों को सुनिश्चित करते हुए महत्वपूर्ण प्रश्नों का समाधान किया जाना चाहिए।