qPCR के लिए Hifair™ एडवांसफास्ट वन-स्टेप RT-gDNA डाइजेस्टियन सुपरमिक्स, Hifair™ के उन्नत संस्करण का प्रतिनिधित्व करता है Ⅲ qPCR (gDNA डाइजेस्टर प्लस) के लिए 1st स्ट्रैंड cDNA सिंथेसिस सुपरमिक्स। इसे एक ही ट्यूब में रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन और जीनोम रिमूवल दोनों तरह की प्रतिक्रियाओं को संचालित करने की मांगों को पूरा करने के लिए डिज़ाइन किया गया है। इसके अलावा, यह प्रतिक्रिया प्रक्रिया को सुव्यवस्थित करता है, प्रतिक्रिया समय को काफी कम करता है, और रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन उत्पाद की उपज को बढ़ाता है। 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix में रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन प्रतिक्रिया के लिए सभी आवश्यक अभिकर्मक शामिल हैं। प्रतिक्रिया के दौरान, आपको बस इसे gDNA रिमूवर मिक्स, टेम्प्लेट RNA और पानी के साथ पूरक करने की आवश्यकता है ताकि cDNA के प्रारंभिक स्ट्रैंड को कुशलतापूर्वक संश्लेषित किया जा सके और साथ ही जीनोमिक DNA संदूषण को समाप्त किया जा सके। यह उत्पाद जटिल RNA टेम्प्लेट के रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन के लिए उपयुक्त है और कम टेम्प्लेट मात्रा और कम-कॉपी जीन वाले रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन के लिए अत्यधिक प्रभावी साबित होता है।
इस विशेष उत्पाद द्वारा उत्पन्न रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन उत्पाद जांच-आधारित और डाई-आधारित qPCR विधियों दोनों के साथ पूरी तरह से संगत है। जांच-आधारित qPCR के लिए, हम Hieff Unicon® यूनिवर्सल TaqMan मल्टीप्लेक्स qPCR मास्टर मिक्स (Cat#11211) का उपयोग करने की सलाह देते हैं, जबकि डाई-आधारित qPCR के लिए, Hieff UNICON® यूनिवर्सल ब्लू qPCR SYBR ग्रीन मास्टर मिक्स (Cat#11184) उच्च-प्रदर्शन जीन अभिव्यक्ति विश्लेषण के लिए अनुशंसित विकल्प है।
हालांकि, यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि इस उत्पाद द्वारा उत्पादित रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन उत्पाद बाद के अनुप्रयोगों जैसे कि लंबे टुकड़ों के प्रवर्धन के लिए उपयुक्त नहीं है। यदि आपको इन उद्देश्यों के लिए कुशल रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन की आवश्यकता है, तो हम Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Cat#11149, Cat#11150) का उपयोग करने की सलाह देते हैं।
विशेषताएँ
- 5 मिनट का RT
-
एक ट्यूब में एकीकृत आरटी और जीडीएनए पाचन
अनुप्रयोग
- आरटी-क्यूपीसीआर
- एंटीसेन्स आरएनए संश्लेषण
विशेष विवरण
| अंतिम उत्पाद का प्रकार | सीडीएनए (प्रथम स्ट्रैंड) |
| पीसीआर विधि | आरटी-पीसीआर |
| अभिकर्मक का प्रकार | रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन |
| नमूने का प्रकार | शाही सेना |
| इष्टतम प्रतिक्रिया तापमान | 37℃ |
| रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस | एम MLV |
अवयव
| नहीं। | नाम | 11151ES10 (10टी) | 11151ES60 (100टी) |
| 11151-ए | 4×हाईफेयर® एडवांसफास्ट वन-स्टेप आरटी सुपरमिक्स | 50 μएल | 500 μएल |
| 11151-बी | gDNA रिमूवर मिक्स | 10 μएल | 100 μएल |
| 11151-सी | आरएनेज़-मुक्त जल | 1 एमएल | 2×1 एमएल |
शिपिंग और भंडारण
उत्पाद को सूखी बर्फ के साथ भेजा जाता है और इसे -15°C ~ -25°C पर 12 महीने तक संग्रहीत किया जा सकता है।
उपयोग हेतु निर्देश
पिघलना 11151-A/B/C घटकों को बर्फ पर रखें, धीरे से हिलाएं और प्रत्येक अभिकर्मक घटक को अच्छी तरह से मिलाएं। फिर, निम्नलिखित को इकट्ठा करें अवयव आरएनज़-मुक्त ट्यूब के भीतर:
| अवयव | आयतन (μL) |
| RNase मुक्त पानी | 20 μL तक |
| 4×हाईफेयर® एडवांसफास्ट वन-स्टेप आरटी सुपरमिक्स | 5 μएल |
| gDNA रिमूवर मिक्स | 1 μएल |
| कुल आरएनए | 10 पीजी -5 μg* |
| या mRNA | 10 पीजी-500 एनजी* |
तालिका 1: प्रतिक्रिया तैयारी
*हम सुझाव देते हैं कि कुल RNA इनपुट मात्रा 2 μg से अधिक न हो। लक्ष्य जीन की कम अभिव्यक्ति बहुतायत के मामले में, कुल RNA इनपुट को अधिकतम 5 μg तक बढ़ाया जा सकता है।
| तापमान | समय |
| 37℃ | 5 मिनट* |
| 85℃ | 30 सेकंड |
तालिका 2: प्रतिक्रिया प्रोटोकॉल
*इस प्रक्रिया में रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन और जीडीएनए पाचन दोनों शामिल हैं।
रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन उत्पाद qPCR प्रतिक्रियाओं में तत्काल उपयोग के लिए उपयुक्त है या इसे थोड़े समय के लिए -20°C पर संग्रहीत किया जा सकता है। विस्तारित भंडारण के लिए, हम कई फ़्रीज़-थॉ चक्रों को रोकने के लिए इसे -80°C पर एलिकोटिंग और संग्रहीत करने की सलाह देते हैं।
सावधानियां:
1. सभी प्रक्रियाएं बर्फ पर की जानी चाहिए, तथा RNase संदूषण को रोकने के लिए अत्यंत सावधानी बरती जानी चाहिए।
2. प्रयोगशाला कोट और डिस्पोजेबल दस्ताने पहनकर अपनी सुरक्षा और भलाई सुनिश्चित करें।
3. यह उत्पाद केवल वैज्ञानिक अनुसंधान के उद्देश्य से है और इसका अन्यथा उपयोग नहीं किया जाना चाहिए।
Storage
FAQ
Yes. Scale up the reaction system proportionally according to the manual, and make sure to adjust the reaction volume settings on your PCR instrument accordingly.
Citations
Applications
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उपवास
यह उत्पाद केवल शोध उद्देश्यों के लिए है और मनुष्यों या जानवरों में चिकित्सीय या नैदानिक उपयोग के लिए अभिप्रेत नहीं है। उत्पाद और सामग्री येसेन बायोटेक्नोलॉजी के स्वामित्व वाले पेटेंट, ट्रेडमार्क और कॉपीराइट द्वारा संरक्षित हैं। ट्रेडमार्क प्रतीक मूल देश को इंगित करते हैं, जरूरी नहीं कि सभी क्षेत्रों में पंजीकरण हो।
कुछ अनुप्रयोगों के लिए अतिरिक्त तृतीय-पक्ष बौद्धिक संपदा अधिकारों की आवश्यकता हो सकती है।
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