एस-एडेनोसिल मेथियोनीन (एस-एडेनोसिल मेथियोनीन, एसएएम) मिथाइल ट्रांसफर प्रतिक्रिया में शामिल एक सहायक सब्सट्रेट है, जो शरीर में संश्लेषण की क्रिया के तहत मेथियोनीन एडेनोसिलट्रांसफेरेज़ में एडेनोसिन ट्राइफॉस्फेट और मेथियोनीन से बना होता है। एसएएम 10 एमएम एचसीएल, 10% इथेनॉल और पीएच 4 के घोल में 25 डिग्री सेल्सियस पर तैयार किया जाता है। यह उत्पाद जीएमपी प्रक्रिया आवश्यकताओं द्वारा निर्मित है और तरल रूप में उपलब्ध कराया जाता है।
विशेषताएँ
- मान्य, उत्पाद-विशिष्ट प्रक्रियाएं और विश्लेषणात्मक विधियां
- उत्पाद-विशिष्ट स्थिरता
- दस्तावेज़ीकरण लागू GMP दिशानिर्देशों का पालन करता है
- एओएफ उत्पादन प्रक्रिया और कच्चे माल (टीएसई और बीएसई)
- नाइट्रोसामाइन कथन
- विनियामक समर्थन दस्तावेज़ उपलब्ध हैं
- बड़े पैमाने पर उत्पादन
अनुप्रयोग
- mRNA टीकों और चिकित्सा विज्ञान के लिए एंजाइमेटिक कैपिंग प्रक्रिया
- बायोपॉलिमर का एंजाइमेटिक मिथाइलेशन
विशेष विवरण
| CAS संख्या | 485-80-3 |
| FORMULA | सी15एच23एन6हे5एस+ |
| आणविक वजन | 399.44 ग्राम/मोल |
| शुद्धता (एचपीएलसी) | ＞ 90% |
| सामग्री | 32 मिमी ± 2 मिमी |
| रचना (1X) | 10 mM एचसीएल, 10% इथेनॉल पीएच 4 25℃ पर |
| संरचना |  |
अवयव
| घटक सं. | नाम | 10619ES02 | 10619ES25 | 10619ES50 | 10619ES76 |
| 10619 | एस-एडेनोसिलमेथियोनीन (एसएएम) जीएमपी-ग्रेड (32 मिमी) | 0.5 एमएल | 25 एमएल | 50 एमएल | 500 एमएल |
शिपिंग और भंडारण
उत्पाद सूखी बर्फ के साथ भेजा जाता है और इसे एक वर्ष के लिए -15℃ ~ -25℃ पर संग्रहीत किया जा सकता है।
आंकड़ों
- शुद्धता मूल्यांकन
चित्र 1. एसएएम उत्पाद की शुद्धता (एचपीएलसी) 98% से अधिक हो सकती है (चित्र 1ए) और (एस, एस) -एसएएम आइसोफॉर्म की ऑप्टिकल शुद्धता (ईई, %) हमेशा लगभग 70% होती है (चित्र 1बी)।
- एंजाइम अवशिष्ट का पता लगाना
चित्र 2. एगरोज़ जेल वैद्युतकणसंचलन द्वारा कोई एंजाइम अवशेष नहीं पाया गया।
500 एनजी λDNA के हिंद III डाइजेस्ट और 2 μl एस-एडेनोसिलमेथियोनीन (एसएएम) युक्त बफर में 20 µl प्रतिक्रिया को 37ºC पर 4 घंटे के लिए इनक्यूबेट किया जाता है, जिसके परिणामस्वरूप एगरोज जेल वैद्युतकणसंचलन (चित्र 2A) द्वारा नियंत्रण (प्रतिक्रिया प्रणाली में एसएएम मुक्त) की तुलना में कोई अंतर नहीं होता है।500 एनजी पीयूसी19 प्लाज्मिड और 2 µl एस-एडेनोसिलमेथियोनीन (एसएएम) युक्त बफर में 20 µl प्रतिक्रिया 37ºC पर 4 घंटे के लिए इनक्यूबेट की जाती है, जिसके परिणामस्वरूप एगरोज जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस (चित्रा 2 बी) द्वारा नियंत्रण (प्रतिक्रिया प्रणाली में एसएएम मुक्त) की तुलना में कोई अंतर नहीं होता है।
- कार्यात्मक परीक्षण और सत्यापन
चित्र 3 YEASEN पोस्ट-ट्रांसक्रिप्शनल कैपिंग प्रतिक्रिया की कैपिंग दक्षता 99% के करीब हो सकती है।
बफर में 1 µg λDNA, 1 यूनिट M. SssI (CpG मिथाइलट्रांसफेरेज़) और 160 µM S-एडेनोसिलमेथियोनीन (SAM) युक्त 20 µl अभिक्रिया को 37°C पर 1 घंटे के लिए इनक्यूबेट किया जाता है। परिणामी DNA, एगरोज़ जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस (चित्र 3A) द्वारा निर्धारित BstUI के साथ पाचन के लिए प्रतिरोधी है। कैपिंग से पहले 5 मिनट के लिए 65°C पर इनक्यूबेशन द्वारा 10 μg RNAs को विकृत किया गया। 20 μL पोस्ट-ट्रांसक्रिप्शनल कैपिंग अभिक्रिया को सेट किया गया और PCR मशीन में 37°C पर 2 घंटे के लिए इनक्यूबेट किया गया। चुंबकीय मोतियों (कैट#12602) द्वारा प्रतिलेखों को शुद्ध किया गया। फिर LC-MS (चित्र 3B) द्वारा कैपिंग दक्षता का पता लगाया जाता है।
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