Descripción
La ADN polimerasa Tth es una ADN polimerasa resistente al calor descubierta a partir de la bacteria termófila Thermus thermophilus HB8En presencia de Mg²⁺, esta enzima exhibe actividad de ADN polimerasa 5′-3′ y actividad de exonucleasa 5′-3′, pero carece de actividad de exonucleasa 3′-5′, lo que la hace ampliamente aplicable en reacciones de amplificación por PCR. En presencia de Mn²⁺, la enzima muestra una potente actividad de transcriptasa inversa a temperaturas de 55-70 °C, lo que la hace adecuada para reacciones de RT-PCR de un solo paso.
Especificación
Definición de unidad: Una unidad (U) de actividad se define como la cantidad de enzima que incorpora 10 nmol de nucleótidos totales en un producto insoluble en ácido en 30 minutos a 74 °C, utilizando ADN de esperma de salmón activado como plantilla/cebador.
Componente
| No. | Nombre | Tamaño | |
| 14607ES72 (250 U) | 14607ES80 (1250 U) | ||
| 14607-A | ADN polimerasa Tth (5 U/μL) | 50 μL | 250 μL |
| 14607-B | RT-PCR 5×Tth Buffer | 1 ml | 4×1,25 ml |
| 14607-C | PCR 10×Tth Buffer (con Mg2+) | 500 μL | 2×1,25 ml |
| 14607-D | 50 mM de Mg(OAc)2 | 250 μL | 1.25 ml |
| 14607-E | Mezcla de dNTP (10 mM cada uno) | 150 μL | 750 μL |
Envío y almacenamiento
Envíocon hielo seco. Almacenar en -20°C, con una vida útil de 2 años.
Precauciones
1) Si aparece una pequeña cantidad de precipitado en la solución tampón al descongelarla, es normal. Invierta la solución y mézclela bien antes de usarla.
2) Para su seguridad y salud, use bata de laboratorio y guantes desechables durante la operación.
3) ¡Este producto es solo para uso en investigación!
Instrucciones
Procedimiento de reacción de PCR recomendado:
1.Preparación del sistema de reacción
| Nombre | Volumen (μL) |
| PCR 10×Tth Buffer (con Mg2+) | 5 |
| ADN polimerasa Tth (5 U/μL) | 0.5 |
| Mezcla de dNTP (10 mM cada uno) | 1 |
| Río arriba Cebador 10 μM | 2 |
| Río abajo Cebador 10 μM | 2 |
| ADN de plantilla | 50 pág.- 1 μg |
| ddH2Oh | a 50 |
[Nota]: Las cantidades de ADN polimerasa Tth, cebadores ascendentes y descendentes y mezcla de dNTP se pueden ajustar según las necesidades experimentales específicas.
2. Configuración del ciclo
| Pasos | Temperatura(ºC) | Tiempo | Ciclos |
| Predesnaturalización | 94 | 30 segundos - 5 minutos | 1 |
| Desnaturalización | 94 | 30 segundos |
35
|
| Recocido | 50-70 | 30 segundos | |
| Extensión | 72 | 60 segundos/kb | |
| Extensión final | 72 | 10 minutos | 1 |
[Nota]: Las condiciones de reacción se pueden ajustar según los requisitos experimentales específicos.
Procedimiento de reacción de RT-PCR recomendado:
1. Preparación del sistema de reacción
| Nombre | Volumen (μL) |
| RT-PCR 5×Tth Buffer | 10 |
| ADN polimerasa Tth (5 U/μL) | 1.5 |
| 50 mM de Mg(OAc)2 | 2.5 |
| Mezcla de dNTP (10 mM cada uno) | 1.5 |
| Río arriba Cebador 10 μM | 2 |
| Río abajo Cebador 10 μM | 2 |
| Plantilla ARN | 50 pág.- 1 μg |
| ddH2O | a 50 |
[Nota]: Las cantidades de ADN polimerasa Tth, cebadores ascendentes y descendentes y mezcla de dNTP se pueden ajustar según las necesidades experimentales específicas.
2.Configuración del ciclo
| Pasos | Temperatura (ºC) | Tiempo | Ciclos |
| Transcripción inversa | 55-70 | 30 minutos | 1 |
| Pre-desnaturalización | 94 | 30 segundos - 5 minutos | 1 |
| Desnaturalización | 94 | 30 segundos |
35
|
| Recocido | 50-70 | 30 segundos | |
| Extensión | 72 | 60 segundos/kb | |
| Extensión final | 72 | 10 minutos | 1 |
[Nota]: Las condiciones de reacción se pueden ajustar según los requisitos experimentales específicos.
Pago y seguridad
Su información de pago se procesa de forma segura. No almacenamos detalles de la tarjeta de crédito ni tenemos acceso a la información de su tarjeta de crédito.
Consulta
También te puede gustar
Preguntas frecuentes
El producto es solo para fines de investigación y no está destinado a uso terapéutico o diagnóstico en humanos o animales. Los productos y el contenido están protegidos por patentes, marcas comerciales y derechos de autor propiedad de Yeasen Biotechnology. Los símbolos de marca comercial indican el país de origen, no necesariamente el registro en todas las regiones.
Algunas aplicaciones pueden requerir derechos de propiedad intelectual adicionales de terceros.
Yeasen se dedica a la ciencia ética y cree que nuestra investigación debe abordar cuestiones críticas al tiempo que garantiza la seguridad y los estándares éticos.