HIFAIR ™ Advancefast 1st ADNc Syntesis supmix para QPCR (GDNA Digester Plus) _ 11155ES

YeasenSku: 11155ES10

Tamaño: 10 T
Precio:
Precio de venta$55.00
Existencias:
En stock

Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix para qPCR (digestor de gDNA plus) es una versión mejorada de Hifair™ III SuperMix de síntesis de ADNc de primera cadena para qPCR (digestor de ADNg plus). Comparado con la generación anterior de Hifair.™ Ⅲ Transcriptasa inversa: este producto presenta una mayor tolerancia a los inhibidores, una mayor velocidad de transcripción inversa y un mayor rendimiento de ADNc, lo que lo hace adecuado para reacciones de transcripción inversa de ARN de animales, plantas y microorganismos. La mezcla digestora de ADNg V2 incluida en este producto ha mejorado significativamente su capacidad para eliminar el ADN residual, digiriendo eficazmente hasta 1000 ng de ADN, lo que garantiza resultados más fiables al eliminar la contaminación de ADN en las plantillas de ARN.

Hifair™ AdvanceFast SuperMix contiene todos los componentes necesarios para la transcripción inversa. Simplemente añada la plantilla de ARN y H sin ARNasa.2O para iniciar la reacción, mientras que simultáneamente termina la actividad del digestor de gDNA para asegurar la integridad del ADNc.

Los productos de transcripción inversa son adecuados para la qPCR basada en colorantes y sondas. Sin embargo, no se recomiendan para la amplificación de fragmentos largos, como la clonación génica. Para estas aplicaciones, Hifair...™ Se recomienda el kit de síntesis de ADNc de primera cadena AdvanceFast (Cat#11150ES) para una transcripción inversa de alta eficiencia.

Presupuesto

N.º de cat.

11155ES10 / 11155ES60

Tamaño

10 toneladas / 100 T

Componentes

Componentes No.

Nombre

11155ES10

11155ES60

11155-A

Hifair™ SuperMix AdvanceFast

60 μL

600 μL

11155-B

Mezcla digestora de gDNA -V2

20 μL

200 micrasYo

11155-C

ARNasa libre H2Oh

200 μL

2×1 ml

Almacenamiento

Este producto debe almacenarse a -25 ~ -15 ℃ durante 1 años.

Instrucciones

1. Cuándo es necesaria la eliminación de ADN

1) Digestión del ADN

Prepare la siguiente mezcla en un tubo de microcentrífuga libre de ARNasa, mezcle suavemente con una pipeta e incube a 37 °C durante 2 minutos:

Componentes

Volumen(μL)

Mezcla digestora de gDNA -V2

2

ARN total

10 pg–2 µg*

o ARNm

10 pg–500 ng

ARNasa libre H2Oh

Hasta 14

*Se recomienda utilizar ≤ 2 µg de ARN total. Si la expresión del gen diana es baja, la cantidad puede aumentarse hasta 5 µg de ARN total.

2) Configuración de la reacción de transcripción inversa (sistema de 20 µL):

Componentes

Volumen(μL)

Mezcla de reacción del paso 1

14

Hifair™ SuperMix AdvanceFast

6

3) Programa de reacción:

Temperatura

Tiempo

50℃

5 minutos

85℃

5 segundos

2. Cuando se elimina el ADN No Requerido

1) Configuración de la reacción de transcripción inversa (sistema de 20 µL):

Componentes

Volumen(μL)

Hifair™ SuperMix AdvanceFast

6

ARN total

10 pg–2 µg*

o ARNm

10 pg–500 ng

ARNasa libre H2Oh

Hasta 20

*Se recomienda utilizar ≤ 2 µg de ARN total. Si la expresión del gen diana es baja, la cantidad puede aumentarse hasta 5 µg de ARN total.

2) Programa de reacción:

Temperatura

Tiempo

50℃

5 minutos

85℃

5 segundos

Notas

1. Este producto es solo para uso en investigación.

2. Por favor, trabaje con bata de laboratorio y guantes desechables.,Para su seguridad.

3. Realice todos los pasos de pipeteo y mezcla en hielo para mantener la integridad de la muestra.

4. Invierta suavemente y centrifugue cada componente a baja velocidad antes de usarlo para garantizar una mezcla adecuada.

Documento:

Manual

Storage

This product should be stored at -25~ -15℃ for 1 year.

FAQ

This product is subsequently used for qPCR of common RNA. Random primers N6 and Oligo dT have been added in a certain proportion in the reverse transcription premix, so no additional primers are required. If qPCR or long fragment PCR for special RNAs such as small RNAs or circular RNAs is to be conducted subsequently, it is recommended to use the separate primer reverse transcription kits 11139ES or 11149ES.
For molecular enzyme reagents, simply invert and mix them together, then perform a gentle centrifugation. It is not recommended to vigorously shake to mix them.
The 11155ES can accommodate RNA input ranging from 10 pg to 5 μg. However, an excessively high RNA input does not necessarily lead to a more forward Ct value. Additionally, an excessively high input of self-prepared RNA also brings about residual other components. These inhibitory components remaining in the reverse transcription product may inhibit the subsequent qPCR reaction, resulting in an increased Ct value, fluctuation of the curve, or precipitation of the product. Ultimately, it is necessary to dilute the cDNA for use to achieve the final result.
It is not recommended to use a longer reverse transcription time. Using a longer time may cause the Ct value to be delayed. It is recommended to follow the procedure suggested in the manual.
For the PCR instrument, proper settings should be made. It is recommended to set the temperature at 4℃ for an infinite duration (∞) after the reaction is completely terminated. This is to prevent the possibility of forgetting to remove the tube after the reaction is completed. The PCR hot lid, through heat conduction, keeps the product in a high-temperature heating state.
No need. The reverse transcription product is usually a mixture, besides the cDNA product, there are also residual RNA, proteins, salt ions, dNTPs, etc. Among them, dNTPs cause significant interference for the determination using a microplate spectrophotometer, and the final measured value obtained from the product determination is not the concentration of the product. The equal amount level has been controlled and added in the RNA section before reverse transcription.
The product has been tested and found to be stable for one week at room temperature without any adverse effects. Therefore, it can be used to complete the subsequent experiments.
After opening, ensure that the reagents have not been contaminated by the syringe tips. Then, they can be stored at 4℃. However, it is recommended to use them up within 2 weeks.
We recommend using products 11188–11190ES.

Citations

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Consulta

Preguntas frecuentes

El producto es solo para fines de investigación y no está destinado a uso terapéutico o diagnóstico en humanos o animales. Los productos y el contenido están protegidos por patentes, marcas comerciales y derechos de autor propiedad de Yeasen Biotechnology. Los símbolos de marca comercial indican el país de origen, no necesariamente el registro en todas las regiones.

Algunas aplicaciones pueden requerir derechos de propiedad intelectual adicionales de terceros.

Yeasen se dedica a la ciencia ética y cree que nuestra investigación debe abordar cuestiones críticas al tiempo que garantiza la seguridad y los estándares éticos.