HIFAIR ™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Supermix für qPCR (GDNA Figester Plus) _ 11155es

YeasenSKU: 11155ES10

Größe: 10 t
Preis:
Verkaufspreis$55.00
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Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix für qPCR (gDNA digester plus) ist eine aktualisierte Version von Hifair™ Ⅲ 1. Strang cDNA Synthese SuperMix für qPCR (gDNA Digester plus). Im Vergleich zur vorherigen Generation Hifair™ Ⅲ Reverse Transkriptase. Dieses Produkt weist eine verbesserte Toleranz gegenüber Inhibitoren, eine schnellere Reverse-Transkriptionsgeschwindigkeit und eine höhere cDNA-Ausbeute auf und eignet sich daher für Reverse-Transkriptionsreaktionen von RNA von Tieren, Pflanzen und Mikroorganismen. Der in diesem Produkt enthaltene gDNA Digester Mix -V2 wurde in seiner Fähigkeit zur Entfernung von Rest-DNA deutlich verbessert. Er verdaut effektiv bis zu 1000 ng DNA und sorgt so für zuverlässigere Ergebnisse durch die Eliminierung von DNA-Verunreinigungen in RNA-Vorlagen.

Hifair™ AdvanceFast SuperMix enthält alle Komponenten, die für die reverse Transkription benötigt werden. Fügen Sie einfach RNA-Template und RNase-freies H hinzu2O, um die Reaktion zu starten und gleichzeitig die Aktivität des gDNA-Digesters zu beenden, um die cDNA-Integrität sicherzustellen.

Die Reverse-Transkriptionsprodukte eignen sich für farbstoff- und sondenbasierte qPCR. Sie werden jedoch nicht für die Amplifikation langer Fragmente, wie z. B. das Klonen von Genen, empfohlen. Für solche Anwendungen bietet Hifair™ Für eine hocheffiziente Reverse Transkription wird das AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Kat.-Nr. 11150ES) empfohlen.

Technische Daten

Kat.-Nr.

11155ES10 / 11155ES60

Größe

10 T / 100 T

Komponenten

Komponenten Nr.

Name

11155ES10

11155ES60

11155-A

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

60 μl

600 μL

11155-B

gDNA-Verdauungsmix -V2

20 μL

200 μL

11155-C

RNase-freies H2O

200 μl

2×1 ml

Lagerung

Dieses Produkt sollte bei -25~-15℃ gelagert werden für 1 Jahre.

Anweisungen

1. Wenn eine DNA-Entfernung erforderlich ist

1) DNA-Verdauung

Bereiten Sie die folgende Mischung in einem RNase-freien Mikrozentrifugenröhrchen vor, mischen Sie sie vorsichtig durch Pipettieren und inkubieren Sie sie 2 Minuten lang bei 37 °C:

Komponenten

Volumen(μL)

gDNA-Verdauungsmix -V2

2

Gesamt-RNA

10 pg–2 µg*

oder mRNA

10 pg–500 ng

RNase-freies H2O

Bis zu 14

*Es wird empfohlen, ≤ 2 µg Gesamt-RNA zu verwenden. Bei geringer Zielgenexpression kann die Menge auf bis zu 5 µg Gesamt-RNA erhöht werden.

2) Aufbau der Reverse-Transkriptionsreaktion (20-µL-System):

Komponenten

Volumen(μL)

Reaktionsmischung aus Schritt 1

14

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

6

3) Reaktionsprogramm:

Temperatur

Zeit

50℃

5 Minuten

85℃

5 Sek.

2. Wenn die DNA-Entfernung Nicht Erforderlich

1) Aufbau der Reverse-Transkriptionsreaktion (20-µL-System):

Komponenten

Volumen(μL)

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

6

Gesamt-RNA

10 pg–2 µg*

oder mRNA

10 pg–500 ng

RNase-freies H2O

Bis zu 20

*Es wird empfohlen, ≤ 2 µg Gesamt-RNA zu verwenden. Bei geringer Zielgenexpression kann die Menge auf bis zu 5 µg Gesamt-RNA erhöht werden.

2) Reaktionsprogramm:

Temperatur

Zeit

50℃

5 Minuten

85℃

5 Sek.

Hinweise

1. Dieses Produkt ist nur für Forschungszwecke bestimmt.

2. Bitte operieren Sie mit Laborkittel und Einweghandschuhen,zu Ihrer Sicherheit.

3. Führen Sie alle Pipettier- und Mischschritte auf Eis durch, um die Probenintegrität zu wahren.

4. Um eine ordnungsgemäße Mischung zu gewährleisten, drehen Sie jede Komponente vor Gebrauch vorsichtig um und zentrifugieren Sie sie bei niedriger Geschwindigkeit.

Dokumentieren:

Handbuch

Storage

This product should be stored at -25~ -15℃ for 1 year.

FAQ

This product is subsequently used for qPCR of common RNA. Random primers N6 and Oligo dT have been added in a certain proportion in the reverse transcription premix, so no additional primers are required. If qPCR or long fragment PCR for special RNAs such as small RNAs or circular RNAs is to be conducted subsequently, it is recommended to use the separate primer reverse transcription kits 11139ES or 11149ES.
For molecular enzyme reagents, simply invert and mix them together, then perform a gentle centrifugation. It is not recommended to vigorously shake to mix them.
The 11155ES can accommodate RNA input ranging from 10 pg to 5 μg. However, an excessively high RNA input does not necessarily lead to a more forward Ct value. Additionally, an excessively high input of self-prepared RNA also brings about residual other components. These inhibitory components remaining in the reverse transcription product may inhibit the subsequent qPCR reaction, resulting in an increased Ct value, fluctuation of the curve, or precipitation of the product. Ultimately, it is necessary to dilute the cDNA for use to achieve the final result.
It is not recommended to use a longer reverse transcription time. Using a longer time may cause the Ct value to be delayed. It is recommended to follow the procedure suggested in the manual.
For the PCR instrument, proper settings should be made. It is recommended to set the temperature at 4℃ for an infinite duration (∞) after the reaction is completely terminated. This is to prevent the possibility of forgetting to remove the tube after the reaction is completed. The PCR hot lid, through heat conduction, keeps the product in a high-temperature heating state.
No need. The reverse transcription product is usually a mixture, besides the cDNA product, there are also residual RNA, proteins, salt ions, dNTPs, etc. Among them, dNTPs cause significant interference for the determination using a microplate spectrophotometer, and the final measured value obtained from the product determination is not the concentration of the product. The equal amount level has been controlled and added in the RNA section before reverse transcription.
The product has been tested and found to be stable for one week at room temperature without any adverse effects. Therefore, it can be used to complete the subsequent experiments.
After opening, ensure that the reagents have not been contaminated by the syringe tips. Then, they can be stored at 4℃. However, it is recommended to use them up within 2 weeks.
We recommend using products 11188–11190ES.

Citations

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Anfrage

FAQ

Das Produkt ist nur für Forschungszwecke bestimmt und nicht für die therapeutische oder diagnostische Anwendung bei Menschen oder Tieren. Produkte und Inhalte sind durch Patente, Marken und Urheberrechte von Yeasen Biotechnology geschützt. Markensymbole geben das Herkunftsland an, nicht unbedingt die Registrierung in allen Regionen.

Für bestimmte Anwendungen sind möglicherweise zusätzliche geistige Eigentumsrechte Dritter erforderlich.

Yeasen engagiert sich für ethische Wissenschaften und ist davon überzeugt, dass unsere Forschung kritische Fragen ansprechen und gleichzeitig Sicherheit und ethische Standards gewährleisten sollte.