HIFAIR ™ Advance Fast 1st Strand cDNA Supermix Supermix cho qPCR (GDNA Digester Plus) _ 11155es

YeasenSKU: 11155ES10

Kích cỡ: 10 t
Giá:
Giá bán$55.00
Cổ phần:
Trong kho

Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix cho qPCR (gDNA digester plus) là phiên bản nâng cấp của Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix cho qPCR (gDNA digester plus). So với thế hệ trước Hifair™ Ⅲ Reverse Transcriptase, sản phẩm này thể hiện khả năng chịu đựng chất ức chế được tăng cường, tốc độ phiên mã ngược nhanh hơn và năng suất cDNA cao hơn, khiến nó phù hợp với các phản ứng phiên mã ngược của RNA từ động vật, thực vật và vi sinh vật. gDNA Digester Mix -V2 có trong sản phẩm này đã được cải thiện đáng kể về khả năng loại bỏ DNA còn sót lại, tiêu hóa hiệu quả tới 1000 ng DNA, đảm bảo kết quả đáng tin cậy hơn bằng cách loại bỏ nhiễm DNA trong các khuôn mẫu RNA.

Hifair™ AdvanceFast SuperMix chứa tất cả các thành phần cần thiết cho phiên mã ngược. Chỉ cần thêm khuôn mẫu RNA và H không có RNase2O để bắt đầu phản ứng, đồng thời chấm dứt hoạt động của gDNA Digester để đảm bảo tính toàn vẹn của cDNA.

Các sản phẩm phiên mã ngược phù hợp với qPCR dựa trên thuốc nhuộm và dựa trên đầu dò. Tuy nhiên, chúng không được khuyến nghị cho khuếch đại đoạn dài như nhân bản gen. Đối với các ứng dụng như vậy, Hifair™ Bộ tổng hợp cDNA sợi 1 AdvanceFast (Cat#11150ES) được khuyên dùng cho phiên mã ngược hiệu suất cao.

Thông số kỹ thuật

Số mèo

11155ES10 / 11155ES60

Kích cỡ

10 T / 100 T

Thành phần

Số thành phần

Tên

11155ES10

11155ES60

11155-A

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

60 μL

600 μL

11155-B

gDNA Digester Mix -V2

20 μL

200 μL

11155-C

RNase miễn phí H2Ồ

200 μL

2×1 ml

Kho

Sản phẩm này nên được bảo quản ở nhiệt độ -25~-15℃ trong 1 năm.

Hướng dẫn

1. Khi nào cần loại bỏ DNA

1) Tiêu hóa DNA

Chuẩn bị hỗn hợp sau trong ống ly tâm không có RNase, trộn nhẹ bằng cách hút bằng pipet và ủ ở 37℃ trong 2 phút:

Thành phần

Âm lượng(μL)

gDNA Digester Mix -V2

2

Tổng RNA

10 pg–2 µg*

hoặc mRNA

10 pg–500 ng

RNase miễn phí H2Ồ

Lên đến 14

*Khuyến cáo sử dụng ≤ 2 µg RNA tổng số. Nếu biểu hiện gen mục tiêu thấp, có thể tăng lượng lên đến 5 µg RNA tổng số.

2) Thiết lập phản ứng phiên mã ngược (Hệ thống 20 µL):

Thành phần

Âm lượng(μL)

Hỗn hợp phản ứng từ bước 1

14

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

6

3) Chương trình phản ứng:

Nhiệt độ

Thời gian

50℃

5 phút

85℃

5 giây

2. Khi loại bỏ DNA là Không Yêu cầu

1) Thiết lập phản ứng phiên mã ngược (Hệ thống 20 µL):

Thành phần

Âm lượng(μL)

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

6

Tổng RNA

10 pg–2 µg*

hoặc mRNA

10 pg–500 ng

RNase miễn phí H2Ồ

Lên đến 20

*Khuyến cáo sử dụng ≤ 2 µg RNA tổng số. Nếu biểu hiện gen mục tiêu thấp, có thể tăng lượng lên đến 5 µg RNA tổng số.

2) Chương trình phản ứng:

Nhiệt độ

Thời gian

50℃

5 phút

85℃

5 giây

Ghi chú

1. Sản phẩm này chỉ dùng cho mục đích nghiên cứu.

2. Vui lòng sử dụng áo khoác phòng thí nghiệm và găng tay dùng một lần,vì sự an toàn của bạn.

3. Thực hiện tất cả các bước lấy mẫu và trộn trên đá để duy trì tính toàn vẹn của mẫu.

4. Nhẹ nhàng đảo ngược và ly tâm từng thành phần ở tốc độ thấp trước khi sử dụng để đảm bảo trộn đều.

Tài liệu:

Thủ công

Storage

This product should be stored at -25~ -15℃ for 1 year.

FAQ

This product is subsequently used for qPCR of common RNA. Random primers N6 and Oligo dT have been added in a certain proportion in the reverse transcription premix, so no additional primers are required. If qPCR or long fragment PCR for special RNAs such as small RNAs or circular RNAs is to be conducted subsequently, it is recommended to use the separate primer reverse transcription kits 11139ES or 11149ES.
For molecular enzyme reagents, simply invert and mix them together, then perform a gentle centrifugation. It is not recommended to vigorously shake to mix them.
The 11155ES can accommodate RNA input ranging from 10 pg to 5 μg. However, an excessively high RNA input does not necessarily lead to a more forward Ct value. Additionally, an excessively high input of self-prepared RNA also brings about residual other components. These inhibitory components remaining in the reverse transcription product may inhibit the subsequent qPCR reaction, resulting in an increased Ct value, fluctuation of the curve, or precipitation of the product. Ultimately, it is necessary to dilute the cDNA for use to achieve the final result.
It is not recommended to use a longer reverse transcription time. Using a longer time may cause the Ct value to be delayed. It is recommended to follow the procedure suggested in the manual.
For the PCR instrument, proper settings should be made. It is recommended to set the temperature at 4℃ for an infinite duration (∞) after the reaction is completely terminated. This is to prevent the possibility of forgetting to remove the tube after the reaction is completed. The PCR hot lid, through heat conduction, keeps the product in a high-temperature heating state.
No need. The reverse transcription product is usually a mixture, besides the cDNA product, there are also residual RNA, proteins, salt ions, dNTPs, etc. Among them, dNTPs cause significant interference for the determination using a microplate spectrophotometer, and the final measured value obtained from the product determination is not the concentration of the product. The equal amount level has been controlled and added in the RNA section before reverse transcription.
The product has been tested and found to be stable for one week at room temperature without any adverse effects. Therefore, it can be used to complete the subsequent experiments.
After opening, ensure that the reagents have not been contaminated by the syringe tips. Then, they can be stored at 4℃. However, it is recommended to use them up within 2 weeks.
We recommend using products 11188–11190ES.

Citations

Bạn cũng có thể thích

Cuộc điều tra

Câu hỏi thường gặp

Sản phẩm chỉ dành cho mục đích nghiên cứu và không dùng để điều trị hoặc chẩn đoán ở người hoặc động vật. Sản phẩm và nội dung được bảo vệ bởi các bằng sáng chế, nhãn hiệu và bản quyền thuộc sở hữu của Yeasen Công nghệ sinh học. Biểu tượng nhãn hiệu chỉ ra quốc gia xuất xứ, không nhất thiết phải đăng ký ở tất cả các khu vực.

Một số ứng dụng có thể yêu cầu thêm quyền sở hữu trí tuệ của bên thứ ba.

Yeasen dành riêng cho khoa học đạo đức, tin rằng nghiên cứu của chúng tôi phải giải quyết các vấn đề quan trọng đồng thời đảm bảo các tiêu chuẩn về an toàn và đạo đức.