Arka plan
Transferrin, transferrin (TRF, Tf) olarak da bilinir, sindirim sistemi tarafından emilen demiri ve kırmızı kan hücrelerinin parçalanmasıyla açığa çıkan demiri taşımaktan sorumludur. Olgun kırmızı kan hücrelerinin üretimi için üç değerlikli demir kompleksi (Tf-Fe3+) formunda kemik iliğine girer. Transferrin esas olarak plazmada bulunur. Plazmadaki transferrin vücudun çoğu dokusuna demir sağlarken, ulaşamadığı bölgelerde, bu dokular tarafından sentezlenen transferrin yerel alanda demir transferi üretir.

Şekil 1. Transferinin yapısı
İnsan transferini esas olarak karaciğerde sentezlenir. Homolog N-terminus ve C-terminusta bulunan iki lobdan oluşan tek zincirli bir glikoproteindir. İnsan transferini 678 amino asit kalıntısı, 5,9 izoelektrik noktası ve 76 kD moleküler ağırlığı içerir. Her transferin molekülü 2 üç değerlikli demir iyonu (Fe3+). Transferin ve Fe arasındaki etkileşim3+ pH'a bağlıdır. pH 7.4'te transferin ve Fe3+ etkili bir şekilde bağlanır ve ikisi asidik pH'ta ayrılır.
Varoluş
Holo-Transferrin, Kısmen doymuş transferrin, Apo-Transferrin
Fonksiyonel Mekanizmalar
Transferrin (Tf), reseptörü Transferrin Reseptörü 1 (TfR1) ile etkileşime girerek demire bağlanır. TfR1, hücre yüzeyinde ifade edilen, disülfür bağlarıyla birbirine bağlanan iki homodimerik alt birimden oluşan bir glikoproteindir. Hücre yüzeyinde Tf, holo-Tf oluşturmak için Fe3+ ile etkileşime girer ve TfR1 reseptörüne bağlanarak endositoz altında endosom içine girer. Asidik endosom ortamında Fe3+, Tf'den ayrılır ve STEAP3, Fe3+'yi Fe2+'ye indirger ve bu da iki değerlikli metal iyon taşıyıcısı 1 (DMT1) tarafından sitoplazmaya taşınır. Daha sonra, Fe3+'yi serbest bırakan Tf, TfR1 ile bir Tf/TfR1 kompleksi oluşturur ve ekzositoz yoluyla hücre yüzeyine geri göç eder. Hücre yüzeyinde transferrin (Tf), apo-Tf olmak için reseptör TfR1'den ayrılır ve daha sonra demir döngüsüne katılmak için Fe3+ ile yeniden bağlanır. Tüm süreç tamamlandıktan sonra Tf ve TfR1 geri dönüştürülür ve hücresel demir alımının bir sonraki döngüsüne girer.

Şekil 2. Transferin döngüsünün mekanizma diyagramı[1]
Transferrinin temel işlevi
- Serbest radikallerin oluşumunu önleyin ve hücre büyümesini koruyun.
- Antibakteriyel, sterilize edici, detoks edici
- Hücre çoğalmasını ve büyümesini sürdürün
- Hücre dışı demir depolanmasını ve taşınmasını destekler
Transferrin kaynakları
Kaynak | Emniyet | Toplu Farklar | |
Doğal olarak elde edilen transferin | İnsan ve sığır plazmasından elde edilen özüt | Güvenlik zayıf, son ürün patojenler içerebilir | Transferin, insan serumu veya sığır serumunun farklı partilerinden çıkarılır ve performansı büyük ölçüde değişir |
Rekombinant transferin | Prokaryotik ve ökaryotik hücrelerde ifade edilir | İyi güvenlik, son ürün patojen içermez | Her parti, aynı hücre hattı kullanılarak, istikrarlı performansla ifade edilir |
Ürün Özellikleri
İyi güvenlik: Ürün, patojenlerin bulaşmasından kaçınılarak çok sayıda kalite kontrol ve test aşamasından geçmiştir;
Düşük toksisite: Sitotoksisite çok düşüktür ve sonraki deneyler üzerinde hiçbir etkisi yoktur;
İstikrarlı performans: Her parti, aynı hücre hattından, minimum performans farklılıkları ve yüksek protein saflığıyla ifade edilir
Kullanımı kolay: ürünü sadece tabana ekleyin;
Yaygın olarak uygulanabilir: Farklı hücre tiplerinin yetiştirilmesinde kullanılabilir.
SSS
S1: Serumsuz kültür ortamına ekstrakte edilmiş transferrin mi yoksa rekombinant transferrin mi eklenmelidir?
A: Çıkarılan transferinin zayıf güvenlik ve partiden partiye büyük farklılıklar gibi kusurları vardır. Özellikle, çıkarılan transferin hücre kültürü için serumsuz kültür ortamına eklendiğinde, insan veya hayvan patojenlerini (deli dana hastalığı virüsü, Creutzfeldt-Jakob virüsü ve diğer bilinmeyen patojenler gibi) hücrelere getirebilir ve hücreleri kirletebilir. Rekombinant transferin patojen kontaminasyonu olasılığını tamamen ortadan kaldırır, bu nedenle rekombinant transferin serumsuz kültür ortamına eklenmelidir.
S2: Kültür ortamına demirle doymuş (Holo) transferrin mi yoksa apo (Apo) transferrin mi eklenmelidir?
A: Kültür ortamında demir yoksa veya demir içeriği düşükse, demirle doymuş (Holo) transferrin eklemeyi tercih edin; kültür ortamı demir açısından zenginse, apo transferrin seçin.
S3: Hangisi daha iyidir; demirle doymuş (Holo) transferin mi yoksa apo (Apo) transferin mi?
A: İkisinin etkisini teorik olarak çıkarmak imkânsızdır ve deneysel testler gereklidir.
S4: Serumsuz kültür ortamında transferinin konsantrasyonu nedir?
Cevap: Transferrin konsantrasyonu hücre tipiyle ilişkilidir. Spesifik konsantrasyon hücre durumu, hücre konsantrasyonu ve deneysel amaçla ilişkilidir.Genel birincil hücreler: 5-100 mg/L; Çin hamster yumurtalık hücreleri: 10-50 mg/L; hibridoma ve Vero hücreleri: 5-20 mg/L
Sipariş bilgileri
Ürün Adı | Ürün Numarası | Şartname |
40102ES60/80 | 100 mg | |
Sığır Transferini (HOLO) | 40103ES60/80 | 100 mg/1g |
İnsan Transferini (İnsan plazmasından türetilmiştir) | 40133ES60/76/80 | 100 mg/500 mg/1g |
92288ES60/76/80 | 100 mg/500 mg/1g | |
92289ES60/76/80 | 100 mg/5 |