giriiş ile organoidler
Organoidler, kök hücrelerin bir matris jeline yerleştirildiği üç boyutlu hücre kültürleridir. Kimyasal küçük molekül inhibitörleri/aktivatörlerinin etkisi altında, sitokinler, ve orta katkı maddeleri, Bu kültürler organ benzeri doku yapılarına dönüşür.
Karakterizasyon ile ilgili organoidler
Organoidler sahip olmak , yetenek ile kendini yenilemek, sürdürmek , fizyolojik yapı Ve işlev kaynak doku, ve "Petri kabındaki mikro organlar" olarak bilinirler. Kendini yenilemeyi kullanarak, kök hücrelerin farklılaşma ve kendi kendini organize etme yetenekleri, organoidler, kullanım için kriyoprezervasyona tabi tutulabilir biyobankalar Ve genişletilmiş süresiz. Organoidler, geleneksel 2D hücre kültürlerine kıyasla yüksek karmaşıklık gösterir ve in vivo durumuna daha çok benzer.
Figür 1. Organoid kültür ile ilgili insan kolon adenokarsinom hücreler [1]
Başvuru ile ilgili organoidler
Organoidler, canlı organizma ortamının üstün simülasyonunu sağlar, hayvan modelleri ile hücresel çalışmalar arasındaki boşluğu kapatmak. Tümör araştırmaları için güçlü araçlar olarak hizmet ederler, uyuşturucu taraması, rejeneratif tıp, ve diğer alanlar, Fonksiyonel doku indüksiyonundan klinik translasyonel çalışmalara kadar uzanan uygulamalarla ve fonksiyonel doku indüksiyonu gibi çeşitli araştırma yönlerinde yaygın olarak kullanılmaktadır, hastalık modellemesi, uyuşturucu taraması, anti-inflamatuar testler, klinik son çalışmalar ve diğer araştırmalar, ve temel araştırma ve çeviri uygulamalarında kullanılmıştır.Temel araştırma ve çevirisel uygulamalarda büyük uygulama potansiyeline sahiptir.
Sürekli gelişimle organoid kültür sistemleri ve deneysel teknikler, organoid kültürleri bağırsaklar (ince bağırsak/kolon) dahil olmak üzere çeşitli dokular ve organlar için kullanılmıştır, karın, karaciğer, kalp, akciğerler, prostat, pankreas, böbrekler, meme bezleri, beyin, retina, ve iç kulak.
Tümör kök hücrelerinden elde edilen organoidler de tümör gelişim mekanizmasının anlaşılmasına yardımcı olmada büyük potansiyel göstermeye başladı, İlaç duyarlılığının taranması, ve hassas tıp ve kişiselleştirilmiş tanıyı teşvik etmek. Cell and Science'dan birkaç makale, tümör organoidlerinin antikanser ilaçlarının etkinliğini tahmin etmede yüksek hassasiyet ve özgüllüğe sahip olduğunu göstermiştir. Son zamanlarda, Tümör organoidlerinin, hastaların kanser ilaçlarına verecekleri tepkileri tahmin etmede ve kişiselleştirilmiş ilaç rejimleri geliştirmeye yardımcı olmada yararlı olduğu gösterilmiştir.
1.Gelişim mekanizmalarının incelenmesi: Organoidlerin sahip olduğu farklılaşma yeteneği embriyonik gelişim süreçlerinin ve mekanizmalarının incelenmesinde kullanılabilir.
Organoidler, Wnt ve BMP gibi sinyal yollarının neden olduğu süreçleri düzenler. beyin gibi organların gelişimini incelemek için kullanılabilir, pankreas ve mide.[2][3][4]
2.Hastalık hasarının modellenmesi: Belirli hastalık modellerinde araştırma için kullanılabilen organoid kaynaklı belirli dokular veya organlar.
Bing Zhao ve Xinhua Lin'den oluşan ekip, SARS-CoV-2 (yeni koronavirüs) enfeksiyonunun ve karaciğer hasarının moleküler mekanizmasını incelemek için insan benzeri bir organ enfeksiyonu modeli uyguladı, neokoronavirüs patogenezinin incelenmesi ve sonrasında ilaç geliştirilmesi için önemli bir araç sağlamaktadır.[5]
Pekin Üniversitesi Biyolojik Bilimler Okulu'ndaki Deng Hongkui'nin araştırma grubu, uyarım için küçük moleküller ve sitokinler kullanarak in vitro yaralanma rejenerasyon özelliklerine sahip yeni bir ince bağırsak organoidi-Hiper organoidi inşa etti. Bu organoid, uzun vadeli transmigrasyonda genomu çoğaltma ve koruma özelliğine sahiptir, Kolon dokularındaki hasar onarımını teşvik etmek, ve akut kolit hayvan modellerinde patolojik semptomları hafifletmek.[6]
3.Rejeneratif tıp: kök hücre kaynaklı organoidler, hasarlı veya hastalıklı dokuları onararak veya değiştirerek normal doku fonksiyonunu geri kazandırabilen, Hücresel terapide geniş bir uygulama yelpazesine sahiptir, diğer nörodejeneratif hastalıklar dahil, diyabet, kardiyovasküler hastalıklar, retinopati ve spinal yaralanmalar.
Rejeneratif tıp alanında yeni bir tedavi yöntemi olarak DA01, SB-431542 (Cat#53004ES) adlı küçük molekülleri kullanır, LDN193189 (Kat#53012ES), CHIR-99021
(Kedi #53003ES), ve Y-27632 (Kat#53006ES), Kedi#52604ES), ve Sonic Hedgehog (Shh) proteini (Cat#92566ES), Kedi#92589ES), Pluripotent kök hücrelerin dopaminerjik nöronlara farklılaşmasını ve ileri Parkinson hastalığı olan hastaların beyinlerindeki hasarlı bölgelere naklini teşvik etmek, Hastalığın tedavisine yönelik yeni yönlendirmeler ve fikirler sunmak.[7]
4.İlaç toksisitesi ve etkinlik testleri: yeni ilaçların belirli organ veya dokulardaki farmakokinetik toksisitesini doğrulamak için organoidlerin kullanımı, Yeni ilaç geliştirme için veri desteği sağlamak.
Cisplatin'in (sisplatin) nefrotoksisitesi Hyman böbrek organoidi kullanılarak doğrulandı.[8]
5.Uyuşturucu taraması: kök hücreden elde edilen organoidler, ilaç tepkilerinin in vitro test edilmesinde kullanılabilir, İlaç taraması için teorik destek sağlanması
Kolon organları, CFTR mutasyonları olan hastalarda dozaj rejimlerini incelemek için kullanılabilir, ve tümör organları, hastalarda kişiselleştirilmiş dozajın değerlendirilmesinde kullanılabilir.[9]
Organoidlerin evrimi
Organoidlerin kaynakları
Normal organoidler esas olarak kök hücrelerden türetilir, Bunlara pluripotent kök hücreler (PSC'ler) ve yetişkin kök hücreler (ASC'ler) dahildir, Bunlardan pluripotent kök hücreler arasında embriyonik kök hücreler (ESC'ler) bulunur, indüklenmiş pluripotent kök hücreler (İndüklenmiş pluripotent kök hücreler (iPSC'ler). Pluripotent kök hücrelerle karşılaştırıldığında, yetişkin kök hücreleri kolay ve hızlı modelleme avantajına sahiptir, ancak dezavantajı, inşa edilen organoid yapıların nispeten basit olmasıdır. Pluripotent kök hücreler tarafından inşa edilen organoid yapılar daha karmaşıktır.
Organoid kültürü
OrganoiD Tip | Gerekli Salışveriş merkezi Molekül | Gerekli Gsıra Faktörler | Medya Ve Katkı maddeleri |
İnce bağırsak | Y-27632, SB-202190, A 83-01, Gastrin, Nikotinamid | EGF, Kafa, R-Spondin 1, Wnt-3a | HEPLER, L-alanil-L-glutamin çözeltisi, penisilin-streptomisin, N-2 |
Gastrik | Y-27632, SB-202190, A 83-01, Gastrin BEN, Nikotinamid | FGF-10, EGF, Kafa, R-Spondin 1, İstemiyorum-3a | HEPLER, L-alanil-L-glutamin çözeltisi, penisilin- streptomisin |
Lkaraciğer hastalığı | Y-27632, A 83-01, DAPT, Forskolin, Gastrin, Nikotinamid, Prostaglandin E2 | BMP-4, EGF, FGF-temel, FGF-10, Yüksek GF, Kafa, İstemiyorum-3a | N-2, HEPLER, L-alanil-L-glutamin çözeltisi, penisilin-streptomisin |
böbrek | CHIR-99021、Retinoik asit | BMP-2、BMP-4、BMP-7、FGF-temel 、FGF-9 | HEPLER, L-alanil-L-glutamin çözeltisi, penisilin-streptomisin |
Lungs | CHIR-99021、SB-431542 | Aktif A、FGF-temel、FGF-4、Kafa | HEPLER, L-alanil-L-glutamin çözeltisi, penisilin-streptomisin |
Pankreas | Gastrin ben、83-01、Nikotinamid | FGF-10、 EGF、Kafa、R-Spondin 1、Wnt-3a | HEPLER, L-alanil-L-glutamin çözeltisi, penisilin-streptomisin |
Pkızarmış et | Y-27632、SB-202190、83-01、Nikotinamid、Prostaglandin E2、Testosteron | EGF、Aktif A、FGF-temel、FGF-10、Kafa、R-1'de Yanıtla、Wnt-10b | HEPLER, L-alanil-L-glutamin çözeltisi, penisilin-streptomisin |
Mammary bezi | Y-27632 | Burada gulin β-1、R-Spondin 1、R-Spondin 2、Kafa、EGF、 FGF-temel、FGF-10、Wnt-3a、Prolaktin | HEPLER, L-alanil-L-glutamin çözeltisi, penisilin-streptomisin |
Retina | CHIR-99021、Y-27632 | Şşşş、Wnt-3a | HEPLER, L-alanil-L-glutamin çözeltisi, penisilin-streptomisin |
BENiç kulak | SB-431542、83-01 | BMP-4、 FGF-temel | HEPLER, L-alanil-L-glutamin çözeltisi, penisilin-streptomisin |
Byağmur | Y-27632、MK-2206、GDC-0068、Dorsomorfin | FGF-temel、Kafa、DKK-1、 EGF、BDNF、GDNF | B-27, HEPLER, L-alanil-L-glutamin çözeltisi, penisilin-streptomisin |
Summary s'ninOrganoid kültüründe yaygın olarak kullanılan alışveriş merkezi molekülleri: süper kullanışlı, yer imlerine eklemeyi unutmayın!
❶ Y-27632 (Kat#53006ES), Cat#52604ES): Kaya tuzunun güçlü bir inhibitörüdür, p160ROCK (Ki=140 nM) ve ROCK-II'yi (IC50=800 nM) ATP ile rekabetçi bir şekilde inhibe eden, ve ayrıca PRK2'yi inhibe eder (IC50= 600 nM), ve genellikle tohum plakasına kültürün ilk zamanında eklenir, ancak sonraki kültürde böyle değil.Y-27632 (10 µM) kök hücre apoptozunu inhibe edebilir, İnsan embriyonik kök hücrelerini 1 saat boyunca Y-27632 (10 µM) ile tedavi ederek klonlama verimliliğini artırın ve hücre yavrularını uzatın.
Önerilen çalışma konsantrasyonu 10'dur μM
❷ SB-202190 (Cat#53005ES): p38α/β'yi hedef alan güçlü bir p38 MAPK kinaz inhibitörü. SB202190, insan embriyonik kök hücrelerinin kardiyomiyositlere farklılaşmasını sağlar, sinir kök hücrelerinin kendini yenilemesini teşvik eder, ve gastrointestinal ve meme organoid kültürlerinde kullanılabilir.
Önerilen çözünme konsantrasyonu: 10 mg, 3,018 mL DMSO çözeltisi eklenerek 10 mM'ye çözülür ve -20°C'de porsiyonlar halinde saklanır.
Önerilen çalışma konsantrasyonu 10'dur μM
❸ CHIR-99021 (Kat# 53003ES): GSK-3 (GSK3α/β) inhibitörü olarak etki eden bir aminopirimidin türevi, insan embriyonik kök hücrelerinin endoderme doğru farklılaşmasını sağlayan, ve böbrek ve retina organoid kültürlerinde kullanılır. CHIR-99021, diğer reaktiflerle birlikte, Somatik hücrelerin kök hücrelere yeniden programlanmasını teşvik eder.
Önerilen Çözünme Konsantrasyonu: 5 mg, 3,58 mL DMSO çözeltisi eklenerek 3 mM'ye çözülür ve -20°C'de porsiyonlar halinde saklanır.
rönerilen çalışma konsantrasyonu: 3 μM
❹ A 83-01 (Kat#53002ES): ALK5/4/7 kinaz aktivitesini inhibe eden ve genellikle karaciğerde kullanılan bir Aktivin/NODAL/TGF-β yolu inhibitörüdür, prostat, ve meme organoid kültürleri, ve genellikle iPSC'lerin farklılaşmasını engellemek ve hücrelerin in vitro kendi kendini yenilemesini sağlamak için kullanılır. Önerilen çözünme konsantrasyonu: 2 mM'ye çözünmesi için 5,93 mL DMSO çözeltisine 5 mg eklenir, -20 ℃ bölünür ve saklanır. (Özel Not: Bu ürün çözelti halinde kararsızdır, (Şimdi kullanılması tavsiye edilir.)
rönerilen çalışma konsantrasyonu: 2 μM
❺ Gastrin I (Cat#53007ES): Gastrin, mide asidinin mide astar hücrelerinden salgılanmasını uyaran endojen bir gastrointestinal peptit hormonudur. Gastrin, kolesistokinin B reseptörüne (CCKBR) bağlanır, hücre içi Ca2+'yi artıran, fosfatidilinositol üretimini teşvik eder, ve protein kinaz C aktivasyonu. Gastrin ayrıca gastrik epitel hücrelerinin çoğalması ve farklılaşmasında rol oynar ve gastrointestinal benzeri organların incelenmesinde kullanılır. Gastrin eklenmesi, bağırsak ve karaciğer organoidlerinin kültürde hayatta kalma süresini uzatmak için gereklidir.
Önerilen çözünme konsantrasyonu: 1 mg, 2,38 mL %1’lik amonyak çözeltisi eklenerek 0,2 mM’e çözülür ve -20°C’de porsiyonlar halinde saklanır.
rönerilen çalışma konsantrasyonu: 10 nM
❻ Nikotinamid Nikotinamid (Kat No: 51402ES): Çeşitli enzimatik redoks reaksiyonlarında rol oynayan ve gastrointestinal sistemde kullanılan bir B3 vitaminidir., karaciğer, ve meme organoid kültürleri.
Nikotinamid, anti-inflamatuar özellikler göstermek ve MSC'lerin insülin üreten hücrelere farklılaşmasını desteklemek için sitokinler ve diğer biyokimyasallarla birlikte kullanılır, sirtuinlerin aktivitesini engellemek, ve organoidlerin oluşumunu teşvik etmek ve organoidlerin ömrünü uzatmak.
Önerilen çözünme konsantrasyonu: 100 mg, 8,19 mL H2O (veya DMSO) eklenerek 100 mM'ye çözülür ve -20°C'de porsiyonlar halinde saklanır.
rönerilen çalışma konsantrasyonu: 10 mM
❼ Forskolin trikotesen (Kat#51001ES): Adenilil siklazı aktive eder ve genellikle hücre içi cAMP seviyelerini artırmak için kullanılır. Forskolin birçok hücre tipinin farklılaşmasını sağlar ve PXR ve FXR'yi aktive eder. Trombosit antikoagülan ve antihipertansif etkilere sahiptir ve, diğer küçük moleküllerle birleştiğinde, iPSC'lere fibroblast yeniden programlamasını indükleyebilir. Bu madde karaciğer organoid kültürlerine eklenmelidir. iPSC'lere yeniden programlanmalıdır. Karaciğer benzeri organ kültürü sırasında eklenmelidir. Önerilen çalışma konsantrasyonu: 1-10 μM
❽ Prostaglandin E2 (Cat#60810ES): Prostaglandin E2 (PGE2) birçok fizyolojik sistemi düzenler, Belirli reseptörlere bağlanarak hücre çoğalmasını ve farklılaşmasını sağlar, karaciğer benzeri ve prostat benzeri organ kültürlerine eklenmesi gerekir, ve düz kasların korunmasında rol oynadığı öne sürülmüştür, iltihap, doğurganlık, uyku döngüsü düzenlenmesi ve mide mukoza bütünlüğü.
Önerilen çözünme konsantrasyonu: 0,28 mL DMSO çözeltisine 1 mg eklenerek 10 mM'ye kadar çözülür ve -20°C'de porsiyonlar halinde saklanır.
Önerilen çalışma konsantrasyonu: 500 nM
❾ N-asetil-L-Sistein (Kat#50303ES): N-asetil-L-sistein (NAC), antioksidan glutatyonun öncüsüdür, antioksidan özelliği olan, ve nöronal hücrelerde apoptozu engelleyen bir ROS inhibitörü, ve çoğu organoid kültürüne eklenmesi gereken bir maddedir.
Önerilen çözünme konsantrasyonu: 24,51 mL H2O'ya (veya DMSO'ya) 2 g eklenip 500 mM'ye kadar çözülür ve -20°C'de porsiyonlar halinde saklanır.
Önerilen çalışma konsantrasyonu: 1 mM
Ürün TavsiyeN
Küçük molekül bileşikleri (İnhibitörler/Aktivatörler)
Ürün adı | Katalog numarası | Sşartname |
Retinoik asit (retinoik asit, retinoik asit) | 100 mg/500 mg/1 G | |
A 83-01 | 1 mg/5 mg/10 mg | |
CHIR-99021 | 2 mg/5 mg/10 mg | |
SB-431542 | 5 mg/10 mg/50 mg | |
SB-202190 | 5 mg/10 mg/25 mg | |
Y-27632 | 1 mg/5 mg/10 mg | |
Gastrin BEN (insan) | 1 mg/5 mg | |
MK-2206 2HCl | 1 mg/5 mg/10 mg | |
GDC-0068 (İpatasertib; RG7440; (GDC0068) | 53009ES | 1 mg/5 mg/10 mg |
(Dorsomorfin (2HCl) | 53010ES | 1 mg/5 mg/10 mg |
Y-27632 dihidroklorür | 5 mg/10 mg/25 mg | |
Nikotinamid | 1 g/5 G | |
DAPT (GSI-IX, LY-374973) | 5 mg/25 mg | |
Forskolin Saç Boğaz | 10 mg/50 mg/100 mg/1 G | |
Prostaglandin (ÇN) E2 Prostaglandin E2 | 60810ES | 1 mg |
Testosteron | 60803ES | 1 g/5 G |
NAK (N-asetil-L-sistein) | 50303ES | 2 G |
TemsilciSox | 5 mg/10 mg/25 mg | |
LDN193189 (DM-3189) | 53012ES | 5 mg/10 mg |
Medya ve takviyeler
Katalog numarası | Sşartname | |
HEPLER Özgür Asit Hücre Kültür Seviye | 60110ES | 100 g/500 G |
L-alanil-L-glutamin çözüm, 200 mM L-alanil-L-glutamin, 200 mM | 60701ES | 20 mL/100 mL/500 ml |
Penisilin-Streptomisin (100×), Uygun için Hücre Cu Öğrenim Penisilin-Streptomisin (Çift Antikor) için C ell Kültür |
100 ml | |
B-27 serumsuz orta, 50 X | 60703ES | 10 ml |
N-2 ek, serum özgür, 100X N-2 serum özgür katkı maddesi, 100× | 60706ES | 5 ml |
Sitokin
Ürün adı | Katalog numarası | Sşartname |
Rekombinant İnsan Aktifleştirici A | 10 μg/100 μg/500 mikrogram | |
10 μg/100 μg/500 mikrogram | ||
Rekombinant İnsan DKK-1 | 20 μg/100 μg/500 mikrogram | |
Rekombinant İnsan EGF | 100 μg/500 mikrogram | |
Rekombinant İnsan bFGF | 10 μg/100 μg/500 mikrogram | |
Rekombinant İnsan FGF-4 | 5 μg/100 μg/500 mikrogram | |
Rekombinant İnsan FGF-9 | 91305ES | 5 μg/100 μg/500 mikrogram |
Rekombinant İnsan FGF-10 | 91306ES | 5 μg/100 μg/500 mikrogram |
Rekombinant İnsan GDNF | 10 μg/100 μg/500 mikrogram | |
Rekombinant İnsan Kafa | 5 μg/100 μg/500 mikrogram | |
Rekombinant İnsan NRG1-beta1 | 10 μg/100 μg/500 mikrogram | |
Rekombinant İnsan R-Spondin 1 | 92274ES | 100 μg/1 mg |
Rekombinant İnsan Şşş | 5 μg/100 μg/500 mikrogram | |
Rekombinant İnsan BAFF | 5 μg/100 μg/500 mikrogram | |
Rekombinant İnsan sCD40 Bağ | 10 μg/100 μg/500 mikrogram | |
Rekombinant İnsan BMP-4 | 10 μg/100 μg/500 mikrogram | |
Rekombinant İnsan Yüksek GF | 5 μg/100 μg/500 mikrogram | |
Rekombinant İnsan BDNF | 5 μg/20 μg/100 mikrogram |
Mini sınıf: Küçük molekül bileşikleri, molekül ağırlığı 1000 Da'dan (özellikle 500 Da'dan) küçük olan ve biyolojik aktiviteye sahip bileşiklerdir.Sitokinler ve proteinlerin aksine, küçük moleküller hücre zarından hücreye girebilir ve biyolojik işlevlerini yerine getirebilirler. Küçük molekül bileşikleri geniş bir hedef yelpazesine sahiptir ve birçok önemli araştırmada yaygın olarak kullanılmıştır yaşam bilimleri alanları, kök gibi hücreler, organoidler, immünoloji, nörobiyoloji, epigenetik, apoptozis, iyon kanalları, onkoloji ve sinyal iletimi.
Yeasen küçük molekül ürün yelpazesi tam bir yelpazeyi ve çeşitliliği kapsar Ürünlerin, yüksek saflıkta, sıkı kalite denetimi, kalite güvencesi, profesyonel satış öncesi ve satış sonrası teknik ekip, ve mükemmel fiyat ve ürünlerin yüksek fiyat-performans oranı. Müşterilerimize bilimsel araştırmalarınıza yardımcı olmak için yüksek kaliteli ürünler sunmakta ısrar ediyoruz!
Referanslar
[1] Sato T, Stange DE, ve diğerleri. İnsan kolonundan, adenomdan, adenokarsinomumdan ve Barrett epitelinden epitel organoidlerin uzun vadeli genişlemesi. Gastroenteroloji. 2011 Kasım;141(5):1762-72. doi:10.1053/j.gastro.2011.07.050. Epub 2011 Eylül 2. PMID: 21889923.
[2] Lancaster MA, Renner M, ve diğerleri. Serebral organoidler insan beyin gelişimini ve mikrosefaliyi modelliyor. Doğa. 2013;501(7467):373-379. doi:10.1038/nature12517.
[3] Greggio C, ve diğerleri. Yapay üç boyutlu nişler in vitro pankreas gelişimini bozar. Geliştirme. 2013.140(21):4452-4462. http://dx.doi.org/10.1242/dev.096628.
[4] McCracken KW, ve diğerleri. Pluripotent kök hücre türevi mide organoidlerinde insan gelişimi ve hastalıklarının modellenmesi. doğa. 2014.516(7531):400-404. http://dx.doi.org/10.1038/nature13863.
[5] Zhao B, Ni C, ve diğerleri. İnsan karaciğer kanal organoidleri ile SARS-CoV-2 enfeksiyonu ve kolanjiyosit hasarının özetlenmesi. Protein Hücresi. 2020 Ekim;11(10 ):771-775. doi: 10.1007/s13238-020-00718-6. PMID: 32303993; PMCID: PMC7164704.
[6] Qu M, Xiong L, ve diğerleri. Yaralanmayla ilişkili epitel rejenerasyonunu modelleyen bağırsak organoid kültürlerinin oluşturulması. Cell Res. 2021 Mar;31(3). 259-271. doi: 10.1038/s41422-020-00453-x. Epub 2021 Jan 8. PMID:
[7] 33420425; PMCID: PMC8027647.
[8] BlueRock Therapeutics, İleri Parkinson Hastalığı Olan Hastalarda 1. Faz Çalışmasında İlk Hastaya DA01 Dozunun Verildiğini Duyurdu. BlueRock Therapeutics Basın Bülteni: 8 Haziran 2021.
[9] Takasato M, Er PX ve diğerleri.İnsan iPS hücrelerinden elde edilen böbrek organoidleri, birden fazla soy hattı içerir ve insan nefrogenezini modellemektedir. doğa. 2015.526(7574):564 -568. http://dx.doi.org/10.1038/nature15695.
[10] Spence JR, Mayhew CN ve diğerleri. İnsan pluripotent kök hücrelerinin in vitro bağırsak dokusuna yönlendirilmiş farklılaşması. Doğa. 2011.470(7332):105- 109. http://dx.doi.org/10.1038/nature09691.