Bölüm 1: PCR Teknolojisi
1.1 PCR Prensipleri
PCR (Polimeraz Zincir Reaksiyonu) veya polimeraz zincir reaksiyonu, DNA polimerazını ifade eder DNA'nın ana ipliği tarafından bir şablon olarak katalize edilen, özel astar başlangıç noktasının uzatılması için dNTP, Mg ilavesi2+ Ve uzatma faktörleri, amplifikasyon geliştirme faktörler. Denatürasyon, tavlama ve uzatma adımlarıyla, Kız ipliğin in vitro replikasyonu, ana iplik şablon DNA'sını tamamlayıcıdır ve bu da herhangi bir hedef DNA'yı in vitro olarak hızlı ve özgül bir şekilde çoğaltabilir.
1.2 DNA polimerazların sınıflandırılması
DNA pol bir önemli enzim hücresel DNA'nın replikasyonu. Termal kararlılığa, sentez yeteneğine, hıza, sadakate ve özgüllük, Taq DNA polimeraz, yüksek doğruluklu DNA polimeraz, sıcak başlangıçlı DNA polimeraz, doğrudan genişlemeli DNA polimeraz, uzun parçalı DNA polimeraz olarak sınıflandırılabilir enzim, hızlı DNA polimeraz, çoklu DNA polimeraz vb..
Bunlardan en yaygın olanı, 5'→3' ucunda polimeraz aktivitesine sahip olan Taq DNA polimerazıdır ve ekzonükleaz aktivitesi 5'→3' ucunda, ama hayır 3'→5' uç düzeltme aktivitesi. Taq'ın en önemli özelliği, termal denatürasyona dayanabilen iyi ısı direncidir. adım PCR'ninBu da, işlemin yarısında daha fazla enzim eklemeye gerek kalmamasını sağlar. Ancak Taq'ın hiçbir düzeltme etkinliği olmadığından sadakati düşüktür. esas olarak magnezyum iyonları ve dNTP'lerin konsantrasyonu ve oranı ile elde edilir.
Yüksek doğruluklu DNA polimerazı bir polimerizasyon merkezi ve bir kesme merkezi içerir, polimerizasyon merkezi 5'→3' DNA polimeraz aktivitesine sahiptir ve bu da katalize edebilir DNA sentezi 5'→3' yönünde; kesme merkezi, baz uyumsuzluklarının onarımını gerçekleştirebilen 3'→5' ekzonükleaz aktivitesine sahiptir. Bu nedenle, Taq DNA polimerazının özelliklerine ek olarak, yüksek doğruluklu DNA polimerazı da düzeltici aktiviteye sahiptir ve bu da çıkarma uyumsuz nükleotidler, böylece ürünün doğruluğunu garanti eder.
Yukarıdaki diyagram DNA polimerazın nasıl çalıştığını göstermektedir [1].
Direkt PCR (Doğrudan PCR) bir tepki PCR amplifikasyonu ve hayvan için saflaştırılmamış numuneler kullanır veya doğrudan çoğaltım için bitki dokuları. Şu anda, Yeasen Direkt PCR kitleri bitki, hayvan dokuları, kan vb. gibi ham örneklerin PCR çoğaltımında kullanılabilir. nükleik asit saflaştırmasına gerek kalmadan, PCR deneylerinin sürecini büyük ölçüde basitleştirir.
Yukarıdaki şekilde Direkt PCR tekniği gösterilmektedir.
A. Doğrudan yöntem: Az miktarda numune alın ve doğrudan PCR'ye ekleyin PCR tanımlaması için Master Mix;
B. Lizis yöntemi: Örnek alındıktan sonra genomu serbest bırakmak için lizis solüsyonuna ekleyin, lizis üst sıvısından az miktarda alın ve PCR tanımlaması için PCR Master Mix'e ekleyin.
1.3 Sıkça Sorulan Sorular ve Çözümleri
| Bela | Sebep | Çözüm |
| Güçlendirilmiş bantlar olmadan | Elektroforez sistemi sorunları | Nükleik asit boya, jel konsantrasyonu ve elektroforez tamponu sorunlarını giderin. |
| Yanlış denatürasyon sıcaklığı | PCR cihazının belirtilen sıcaklığı gerçek sıcaklıkla tutarlı mıdır? Sıcaklık çok yüksekse, enzim hızla ilk birkaç döngüde; eğer çok düşükse, şablon denatürasyonu tamamlanmamıştır. | |
| Reaksiyon sisteminde proteaz ve nükleaz kontaminasyonu | Taq enzimi eklenmeden önce reaksiyon sistemi 95°C’de 5-10 dakika ısıtılmalıdır. | |
| Primer hatası | BLAST kullanarak primer özgüllüğünü kontrol edin veya primerleri yeniden tasarlayın. | |
| Şablon safsızlıklar içeriyor | Özellikle formaldehit fiksasyonlu ve parafine gömülmüş dokular sıklıkla formik asit içermekte olup, bu durum DNA depurinasyonuna neden olarak PCR sonuçlarını etkilemektedir. | |
| Primer bozulması ve arızası | Sentetik primerlerin doğru, saflaştırılmış veya uygunsuz depolama koşulları nedeniyle inaktif hale geldiğini teyit edin. | |
| Daha az miktarda PCR ürünü | Uygun olmayan tavlama sıcaklığı | Tavlama sıcaklığını 2 derecelik bir gradyanla optimize etmek için bir gradyan PCR reaksiyonu tasarlandı. |
| DNA şablonunda inhibitörlerin varlığı | DNA şablonunun temiz olduğundan emin olun. | |
| Uzun süreli denatürasyon | Uzun süreli denatürasyon DNA polimerazın inaktivasyonuna yol açar. | |
| Uzatma çok kısa | Uzatma süresi çok kısa. Uzatma süresini 1kb/dk prensibine göre ayarlayın. | |
| DNA şablonunun miktarı çok düşük | DNA şablonunun miktarını artırın. | |
| Yetersiz miktarda primer | Sistemdeki primer içeriğini artırın. | |
| PCR döngüsü sayısı yetersiz | Tepkime çevrimlerinin sayısını artırın. | |
| Çoklu bantlar | Zayıf primer özgüllüğü | Primer özgüllüğünü kontrol etmek veya primerleri yeniden tasarlamak için BLAST ve Primer gibi primer tasarım yazılımlarından yararlanıldı. |
| Aşırı sayıda döngü | Şablon miktarını uygun şekilde artırın ve döngü sayısını azaltın. | |
| Ekzojen DNA Kontaminasyonu | Temiz bir çalışma sağlayın. | |
| Aşırı miktarda şablon | Plazmit DNA miktarı <50ng, genomik DNA miktarı ise <200ng olmalıdır. | |
| Çok fazla astar | Reaksiyon sistemindeki primer miktarını azaltın. | |
| Reaksiyon çözeltisi iyi karıştırılmamış | Reaksiyon tamponunun tamamen eridiğinden ve iyice karıştığından emin olun. | |
| Mg Yüksek konsantrasyon | Kullanılan Mg konsantrasyonunu uygun şekilde ayarlayın. | |
| Yüksek enzim dozajı veya düşük enzim kalitesi | Enzim miktarını azaltın veya başka bir kaynakla değiştirin. | |
| Düşük tavlama sıcaklığı, uzun tavlama ve uzatma süresi | Denatürasyon ve uzatma süresini azaltmak için tavlama sıcaklığını artırın veya tavlama sıcaklığını optimize etmek için bir gradyan PCR reaksiyonu tasarlayın. | |
| PCR karışımının kendisiyle ilgili sorunlar | PCR premiks ise reaktifin kendi kalitesinden kaynaklanabilir, partiyi veya başka markaları değiştirmeniz önerilir. | |
| Yanlış Boyut | Ckirlenme | Tezgahı yeni reaktifler ve uçlarla temizleyin. |
| Şablonların veya astarların yanlış kullanımı | Primerleri ve şablonları değiştirin. | |
| Genotip | Çalışılan genler üzerinde dizi analizi ve BLAST çalışmaları yapıldı. |
Bölüm 2: Nükleik Asit Elektroforezi
2.1 Nükleik asit elektroforezinin prensipleri
Yüklü parçacıkların, elektriksel özelliklerine zıt bir elektroda doğru bir elektrik alanının etkisi altında hareket etmesine Elektroforez denir. Elektrik alanındaki yüklü parçacıklar kullanılarak farklı hızlarda hareket edip ayırma işlemine elektroforez adı verilir. Nükleik asit elektroforezi bir önemli araç nükleik asit araştırmaları için ve bir gibi tekniklerin ayrılmaz bir parçası nükleik asit probları, nükleik asit amplifikasyonu ve dizi analizi. Nükleik asit elektroforezi genellikle gerçekleştirillen agarozda veya poliakrilamid jeller. Farklı konsantrasyonlar agaroz ve poliakrilamid, farklı moleküler elek gözenek boyutlarına sahip jeller oluşturabilir ve bu jeller farklı molekül ağırlıklarına sahip nükleik asit parçalarını ayırmak için kullanılabilir.
2.2 Agaroz jel elektroforezi
Agaroz, deniz yosunundan elde edilen doğrusal bir polimerdir. Agaroz, bir tampon çözeltisinde ısıtılır ve daha sonra dökülen berrak, şeffaf bir çözeltiye eritilir. jelatin bir kalıba dökülür ve yoğunluğu jel olarak bilinen katı bir matris oluşturmak üzere katılaşır agaroz konsantrasyonu.
Agaroz jel elektroforezi, agarozun destek ortamı olarak kullanıldığı bir tür elektroforez yöntemidir ve arasındaki temel fark analitik prensip ve diğer destek elektroforezi, bunun çift rol "moleküler elek" ve "elektroforez". jel yerleştirilir elektrik alanı, altında eylemi elektrik alanı, yüklü nükleik asitler göç eder olumlu direk başından sonuna kadar ağ ile ilgili , jel. The oranı göç, büyüklüğünden etkilenir nükleik asit molekülleri, agaroz konsantrasyonu, uygulanan voltaj, elektrik alanı, elektroforez tamponu ve gömülü boya miktarı. Uygun elektrofor süresinden sonraSdır altında farklı koşullarFarklı büyüklük ve konformasyondaki nükleik asit parçaları jel üzerinde farklı pozisyonlarda bulunacak ve böylece ayırma amacına ulaşılacaktır.Agaroz jelinin ayrılması geniş bir yelpazeye sahiptir, genellikle DNA kesme jeli geri kazanımında, DNA izolasyonunda kullanılır ve DNA'nın rekombinant olup olmadığını desteklemek için kullanılır, plazmid, vb. Plazmidin kesilip kesilmediğine bakılmaksızın, farklı agar jel konsantrasyonları uzunluğundan ayrılabilir 200bp ile 50kb ile ilgili DNA Parçalar.
2.3 Deneysel Yöntemler
Yapımı zamk
Örnek olarak %1 konsantrasyonunu alalım: 1 g agaroz tartın, 250 ml'lik bir konik şişeye dökün, 100 ml 0,5×TBE elektroforez tamponu ekleyin ve iyice karıştırın, mikrodalga fırında kaynatın ve sonra yaklaşık 60℃'ye kadar hava ile kurutun, uygun miktarda nükleik asit boyası ekleyin ve iyice çalkalayın ve daha sonra önceden hazırlanmış temiz bir jel plakasına dökün, iki elinizle bir tarak alın jel solüsyonuna dikey olarak yerleştirin ve bekleyin jel olmak Tamamen katılaşana kadar (25-30dk) doğal olarak soğutulur.
Tutkal yapma tarağını çıkarın
Jeli dikkatlice elektroforez tankına aktarın (jel tepsisiyle veya sadece jel ile)), numune kuyusu tarafını negatif kutba yerleştirin ve 0,5× TBE ekleyin Elektroforez tamponu jel yaklaşık 1 mm altına gelene kadar bekletilir.
Eklemek örnek
10× yükleme tamponu ekleyin (yükleme tampon) DNA örneklerine, İyi karıştırın ve ardından numune karışımını yavaşça suya ekleyinBbirleştirilmiş jel kuyular pipet tabancasıyla, kuyu başına 5-10 μL örnek eklenerek (en fazla 40 μL). Genellikle, ilk kuyu DNA işaretleyicisi ile doldurulmalı, ikincisi pozitif kontrolle (tanımlanmış DNA), Ve üçüncüsü negatif kontrol (reaktif veya su) ile), Ve Numunelerin sırası kaydedilmelidir.
Elektroforez
Örtün elektroforez tankı, bağlayın teller, gücü açın ve elektroforez voltajını, akımını ayarlayın ve zaman parametreler. Genellikle, Voltaj 5 v/cm'yi geçmemelidir (uzunluk, elektroforez tankının pozitif ve negatif kutupları arasındaki mesafe), Ve elektroforez süresi genellikle 15-30dk.
Elektroforezin sonu
Kaldırmak , jel (jel tepsisi olmadan) ve net bir elektroforetik görüntü elde etmek için UV görüntüleme sistemi altında görüntülenmesi, ardından elektroforetik görüntünün düzenlenmesi görüntü düzenleme yazılımıyla ve Üzerine örnek bilgilerini, tarihi ve operatörü yazın.
2.4 Sıkça Sorulan Sorular ve Çözümleri
| Bela | Sebep | Çözüm |
| Hedef bant eksik | Küçük DNA'nın jeli tükendi | Elektroforez süresini kısaltın, voltajı azaltın, jel konsantrasyonunu artırın. |
| Benzer moleküler ağırlık boyutuna sahip DNA bantları kolayca ayırt edilemez | Optimal jel konsantrasyonuna ulaşmak için elektroforez süresini artırın. | |
| Hedef parça konvansiyonel elektroforez için çok büyüktür. | Darbeli jel elektroforezinde analiz edildi. | |
| Amaçsız Klip | PCR işlemi hatalı olup hedef ürünü çoğaltamamıştır. | |
| Bulanık DNA bantları | Bayat elektroforez tamponu | Elektroforez tamponu çok sayıda kullanıldığında iyonik şiddet azalacak, PH değeri yavaş yavaş yükselecek ve yıkama kabiliyeti zayıflayacak, böylece elektroforez etkisi etkileneceğinden elektroforez tamponunun sık sık değiştirilmesi önerilir. |
| DNA bozulması | Nükleaz kontaminasyonundan kaçının. | |
| Kullanılan elektroforez koşulları elektroforez için uygun değildir | Elektroforez voltajı 20V/cm’yi geçmemeli ve sıcaklık <30°C olmalıdır; büyük DNA zincirlerinin elektroforez sıcaklığı <15°C olmalıdır; kullanılan elektroforez tamponunun yeterli tamponlama kapasitesine sahip olup olmadığı kontrol edilmelidir. | |
| Aşırı DNA örneklemesi | Jelde yukarı örneklenen DNA miktarını azaltın. | |
| DNA örnekleri çok tuzlu | Elektroforez öncesinde fazla tuz etanol çöktürülerek uzaklaştırıldı. | |
| protein kontaminasyonu | Elektroforez öncesi fenol ekstraksiyonu proteinleri uzaklaştırır. | |
| Örnek konsantrasyonu çok yüksek | Üst numunenin konsantrasyonu 500ng/kuyudan az olmalıdır, konsantrasyon çok yüksek olursa elektroforez hızı etkilenecek, sürüklenme ve bulanıklık oluşacaktır. | |
| Zayıf veya hiç bant yok | DNA'nın yetersiz örnek boyutu | DNA alım miktarının artırılması |
| DNA bozulması | DNA'nın nükleaz kontaminasyonundan kaçınılması | |
| Nükleik asit boyaları için uygun olmayan ışık kaynağı | Nükleik asit boyasına ait talimatlara göre uygun dalga boyu ışık kaynağını seçin. | |
| Ayrılmamış bantlar | zaman eksikliği | Elektroforez süresini artırın |
| Yanlış jel konsantrasyonu | Tutkal konsantrasyonu çok yüksek olduğundan ayrılmaya karşı çok fazla direnç oluşur. | |
| Numunedeki tuz iyonlarının konsantrasyonu çok yüksek | Yüksek tuz iyon konsantrasyonu elektroforetik direnci arttırır ve bantların ayrılmasını önler (örneğin endonükleaz tamponu içeren sindirilmiş örnekler). | |
| Belirsiz bantlar | RNA kontaminasyonu | Numunelerin yeniden hazırlanması |
| Numuneler arasındaki kontaminasyon | Dolum sırasında ucun değiştirilmesi; hacimleri >40 μl olan numunelerin dökülmesinin önlenmesi. |
2.5 Poliakrilamid jel elektroforezi
Poliakrilamid jeller, akrilamid monomeri, zincir polimerizasyon katalizörleri N,N,N',N'-tetrametiletilendiamin (TEMED) ve amonyum persülfat ile çapraz bağlayıcı ajan N,N'-metilenbisakrilamid arasındaki kimyasal reaksiyonla oluşur. Akrilamid monomeri, uzun bir akrilamit oluşturmak için bir katalizör varlığında polimerize olur. zincirler, ki bunlar çapraz bağlı ile bir jel oluşturmak için çapraz bağlayıcı bir madde, gözenek boyutu zincir uzunluğu ve çapraz bağlama derecesi tarafından belirlenir. Gözenek boyutu zincir uzunluğu ve çapraz bağlama derecesi tarafından belirlenir çapraz bağlanma derecesi. Zincir uzunluğu şunlara bağlıdır: Akrilamid konsantrasyonu ve polimerin çapraz bağlanma derecesi, akrilamidin çapraz bağlama maddesine oranının ayarlanmasıyla değiştirilebilir.
Poliakrilamid jel elektroforezi şu amaçlarla kullanılabilir: ayırmak örneklere dayalı farklılıklar şarj, moleküler boyut ve şekli elektroforezlenmiş numunelerMoleküler eleme ve elektrostatik elemeyi birleştirir ve agar jel elektroforezinden daha yüksek bir ayırma gücüne sahiptir. DNA parçaları sadece farklılık gösteren bir nükleotid ayrılabilir.
Poliakrilamid jel elektroforezi, 1 kb'den daha kısa DNA parçalarını analiz etmek ve hazırlamak için kullanılır. boyutu izole edilecek nükleik asit parçaları, jelleri farklı hazırlanabilir.
Aşağıdaki tabloda farklı akrilamid ve DNA konsantrasyonları için etkili ayırma aralıkları gösterilmektedir:
| Konsantrasyon. (%) | Etkili ayırma aralığı (bp) |
| 3.5 | 100 ila 2000 |
| 5 | 80 ila 500 |
| 8 | 60 ila 400 |
| 12 | 40 ila 200 |
| 15 | 25 ila 150 |
| 20 | 10 ila 100 |
2.4 İlgili ürünlerin seçimine ilişkin kılavuzlar
Geleneksel PCR | ||||
| Şartname | 10167ES | 10102ES | 10103ES | 10108ES |
| Amplifikasyon Uzunluğu | ≤10-15 kb | ≤5 kb | ≤5 kb | ≤4 kb |
| Uzatma Süresi | 1-10 sn/kb | 30 sn/kb | 30 sn/kb | 30 sn/kb |
| Ürün Son Yapısı | 3'-dA | 3'-dA | 3'-dA | 3'-dA |
| Tavlama Sıcaklığı | 60℃ | Tm-(2~5)℃ | Tm-(2~5)℃ | Tm-(2~5)℃ |
| GC Uyumluluk Aralığı | %30-70 | %40-70 | %40-70 | %30-70 |
| 5'-3' Ekzonükleaz Aktivitesi | Sunmak | Sunmak | Sunmak | Sunmak |
| Koloni PCR | Uygun | Uygun | Uygun | Uygun |
| Gen Tanımlama | Uygun | Uygun | Uygun | Uygun |
| Çoklu PCR | Uygun değil | Uygun değil | Uygun değil | 3-4 pleks PCR |
| Elektroforez Göstergesi | Mor-kırmızı | Mavi | Renksiz | Mavi |
| Sıcak Başlangıç | Sıcak Başlangıç | Sıcak Başlatma Değil | Sıcak Başlatma Değil | Sıcak Başlangıç |
| Ön karışım/Kit | Ön karışım | Ön karışım | Ön karışım | Ön karışım |
Doğrudan PCR | ||||
| Şartname | 10185ES | 10188ES | 10187ES | |
| Ürün Türü | Fare Doğrudan Amplifikasyonu | Kan Doğrudan Amplifikasyonu | Bitki Doğrudan Amplifikasyonu | |
| Amplifikasyon Uzunluğu | ≤1 kb | ≤8 kb | ≤1 kb | |
| Uzatma Süresi | 30 sn/kb | ≤2 kb için 3-5 s/kb, | 60 sn/kb | |
| ≤8 kb için 10 s/kb | ||||
| Örnek lizis süresi | 15 dk | 0-3 dk | 0-10 dk | |
| Ürün Son Yapısı | Künt Uç | Künt Uç | Künt Uç | |
| Tavlama Sıcaklığı | Tm-(2~5)℃ | Tm-(1~2)℃ | Tm-(2~5)℃ | |
| GC Uyumluluk Aralığı | %30-70 | %30-75 | %40-65 | |
| 5'-3' Ekzonükleaz Aktivitesi | √ | √ | √ | |
| Gen Tanımlama | √ | √ | √ | |
| Çoklu PCR | 3-4 pleks | |||
| Doğrudan Örnek Amplifikasyonu | √ | √ | √ | |
| Elektroforez Göstergesi | Mavi | Renksiz | Mavi | |
| Sıcak Başlangıç | √ | √ | √ | |
| Ön karışım/Kit | Kit (Karışımlı) | Kit (Miks + Tampon ile) | Kit (Karışımlı) | |
| Uygun Organizmalar | Fare, Sıçan | İnsan, Fare, Keçi, Tavuk, Domuz vb. | Pirinç, Mısır, Tütün, Kolza, Buğday, Soya fasulyesi vb. | |
| Uygun Doku/Malzeme | Kuyruk, Kulak, Ayak Parmakları (kaslı) ve diğer organlar | EDTA, Heparin, Sitrat vb. içeren taze kan, soğutulmuş (dondurulmuş) kan, ticari kuru kan lekeleri | Genç yapraklar, yaşlı yapraklar, fideler, genç gövdeler | |
| Örnek giriş | Doku: 5-10 mg; Kuyruk: 1-5 mm | Tam kan: %0,5-%20, kuru kan lekesi: 1 mm² | Yaprak: 1-10 mm, Tohum: 1-3 mm | |
Yüksek Sadakat PCR | ||||
| Şartname | 10164ES | 10153ES | 10154ES | |
| Amplifikasyon Uzunluğu | ≤10 kb gDNA, ≤10 kb cDNA, ≤16 kb λDNA | ≤10 kb gDNA, ≤10 kb cDNA, ≤13 kb λDNA | ≤10 kb gDNA, ≤10 kb cDNA, ≤13 kb λDNA | |
| Uzatma Süresi | 5 sn/kb | 30 sn/kb | 30 sn/kb | |
| Sadakat (Tak) | 83× | 83× | 83× | |
| Ürün Son Yapısı | Künt Uç | Künt Uç | Künt Uç | |
| Tavlama Sıcaklığı | 60℃ | 68℃ | 68℃ | |
| GC Uyumluluk Aralığı | %20-80 | %30-60 | %30-60 | |
| 5'-3' Ekzonükleaz Aktivitesi | Mevcut olmayan | Mevcut olmayan | Mevcut olmayan | |
| Elektroforez Göstergesi | Mavi | Renksiz | Mavi | |
| Tek Enzim/Ön Karışım | Ön karışım | Tek Enzim | Ön karışım | |
| Hoşgörü | / | / | Kan, Fare Doku Lizatı | |
Nükleik Asit Elektroforezi | ||||
| Ürün Kategorisi | Kedi NO. | Ürün Adı | Başvuru | |
| Agaroz | 10208ES | Agaroz | Rutin nükleik asit elektroforezi | |
| 10221ES | Yüksek Eleme Agaroz (PCR Sınıfı) | 20 bp-800 bp DNA parçalarını ayırmak için uygundur, poliakrilamid jel ile karşılaştırılabilir | ||
| 10226ES | Agaroz Tabletler (0.5 gr/tablet) | Rutin agaroz uygulamaları için uygundur | ||
| Nükleik Asit Boyası | 10202ES | YeaRed Nükleik Asit Jel Boyası (Suda 10.000×) | Suda çözünür, EB'ye benzer spektral özelliklere sahip, 300 nm UV ışığında uyarılabilir | |
| DNA İşaretleyicisi | 10510ES | GoldBand 1 kb DNA Merdiveni | 250-12000 bp (13 bant) | |
| 10515ES | GoldBand 50 bp DNA Merdiveni | 50-1000 bp (14 bant) | ||
| 10507ES | GoldBand 100bp DNA Merdiveni | 100-1500 bp (12 bant) | ||
| 10516ES | GoldBand 100 bp artı DNA Merdiveni | 100-3000 bp (14 bant) | ||
| 10517ES | GoldBand 200 bp DNA Merdiveni | 200-5000 bp (12 bant) | ||
| 10518ES | GoldBand 500 bp DNA Merdiveni | 500-5000 bp (8 bant) | ||
| 10501ES | GoldBand DL2000 DNA İşaretleyicisi | 100-2000 bp (6 bant) | ||
| 10504ES | GoldBand DL5000 DNA İşaretleyicisi | 100-5000 bp (9 bant) | ||
| 10505ES | GoldBand DL10.000 DNA İşaretleyicisi | 100-10000 bp (10 bant) | ||
| 10511ES | GoldBand Tam Ölçekli DNA Merdiveni | 100-12000 bp (20 bant) | ||
| 10512ES | GoldBand DL15000 DNA İşaretleyicisi | 250-15000 bp (7 bant) |
2.5 Nükleik Asit Elektroforez Ürünlerini Kullanan Yayınlar (P(ekstra)
[1] Luo J, Yang Q, Zhang X, ve diğerleri. TFPI, hipervirülan klad 2 C. difficile'den TcdB için bir kolon kript reseptörüdür. Hücre. 2022;185(6):980-994. e15. doi:10.1016/j.cell.2022.02.010 (IF:41.584)
[2] Huang N, Chen H, Gong H ve diğerleri. Stresle uyarılan hidrojen peroksidazlı yeni bir gen ifade sistemi olan SeHed ide eliminasyon özelliği ve yaşlanma karşıtı etkisi. Sinyal Transdüksiyonu ve Hedefli Terapi. 2022, 7, 235. doi: 10.1038/s41392-022-01047-2. (EĞER: 38.1)
[3] Zhang C, Zhou B, Gu F, ve diğerleri. Mikropeptit PACMP inhibisyonu sentetik öldürücü etkilere yol açar CtIP'yi azaltarak ve poli(ADP-ribozil) asyonu. mol Hücre. 2022;82(7):1297-1312.e8. doi:10.1016/j.molcel.2022.01.020 (EĞER:(17.970)
[4] Zhu M, DaiX. Değiştirilmiş (p)ppGpp düzeyleri tarafından büyümenin baskılanması, optimum olmayan kaynak tahsisi Escherichia coli. Nükleik Asitler Araştırması. 2019;47(9):4684-4693. doi:10.1093/nar/gkz211 (EĞER:11.147)
[5] Rizwan HM, Zhimin L, HarsonowatiW ve diğerleri. Hasat Sonrası Kontrolü için Mantar Patojenlerinin Tanımlanması Çarkıfelek Meyvesi (Passiflora edulis) Çürümeleri ve Çoklu Omik Karşılaştırmalı Yol Analizi Şunları Ortaya Koyar Mor Daha Dirençli Patojenlere Karşı Sarı Bir Çeşitten Daha İyi. j Mantarlar (Basel). 2021;7(10):879. 2021 Ekim 19'da yayınlandı. doi:10.3390/jof 7100879 (EĞER:5.816)
[6] LiT, Zhou B, Luo Z ve diğerleri. Bir Yapısal Karakterizasyon Geniş Aktiviteye Sahip Nanobody'yi Nötralize Etme SARS-CoV-2 Varyantları. Front Microbiol. 2022;13:875840. Yayımlanma tarihi 2022 Haz. doi:10.3389/fmicb.2022.875840 (EĞER:5.640)
[7] Wang T, Ren D, Guo H, ve diğerleri. CgSCD1 Melanin Biyosentezi ve Patojenitesi İçin Önemlidir Colletotrichum'un gloeosporioides. patojenler. 2020;9(2) :141. 2020 Şubat'ta yayımlandı. doi:10.3390/pathogens9020141(IF:3.018) :141. 2020 Şubat'ta yayımlandı. doi:10.3390/patojenler9020141 (IF:3.018)
[8] Lv Y, LiX, Zhang H, Zou F, Shen B. Deltametrin duyarlı ve dirençlilerde CircRNA ekspresyon profilleri
pipiens pallens (Diptera: Culicidae). Comp Biyokimya Fizyol B Biyokimya Mol Biol. 2022;261:110750. doi:10.1016 /j.cbpb.2022.110750 (EĞER:2.231)
[9] Hu M, DaiX. Değiştirilmiş (p) ppGpp ile büyümenin baskılanması düzeyleri, optimum olmayan kaynak tahsisinden kaynaklanır Escherichia coli[J]. Nükleik asitler araştırması, 2019, 47(9): 4684-4693.(IF11.6)
[10] Guo L, Yang W, Huang Q, ve diğerleri. Selenosisteine özgü kütle spektrometrisi, dokuya özgü selenoproteomları ve aday selenoproteinleri ortaya çıkarır[J]. Hücre kimyasalı biyoloji, 2018, 25(11): 1380-1388. e4. (IF6.762)
2.6 PCR Ürünlerini Kullanan Yayınlar (Kısmi)
[1] Wang Y, Fu Z, LiX, ve ve diğerleri. Sitoplazmik DNA algılama ile KÜ karmaşık içinde yaşlı CD4+T hücre güçlendiriciler T hücre aktifleştirmek tion Ve yaşlanmayla ilgili otoimmün iltihap. Bağışıklık. 2021;54(4):632-647.e9. yap:10.1016/j.immu
ni.2021.02.003(IF:31.745)
[2] Yang X, Gao F, Zhang B, ve ve diğerleri. "Yıldız" miR-34a Ve CXCR4 rakip temelli nanoplex için ikilive kooperatif göç tedavisi tekrarT metastatik göğüs kanser. J Kontrol Yayın. 2020;326:615-627. doi:10.1016/j. jconrel.2020.07.029(EĞER:7.727)
[3] QiaoY, Du J, Ge R, ve ve diğerleri. Bir Örnek Ve Tespit Mikroiğne Yama için Sedef hastalığı MikroRNA Biyobelirteç
Analiz içinde Ara geçiş Sıvı. Anal Kimya 2022;94(14):5538-5545. doi:10.1021/acs.analchem.1c04401(EĞER:6.986)
[4] Lin S,Ye X, Huang Z, ve ve diğerleri. Grafen Oksit bazlı Bastırma ile ilgili Belirsizlik içinde Döngü Aracılı İzoter kötüAmplifikasyon Hassas Olanı Etkinleştirme Tespit Siklooksijenaz-2 mRNA içinde Kolorektal Kanser. Anal Kimya 2019;91(24):15694-15702. doi:10.1021/acs.analchem.9b03861(IF:6.350)
[5] Lin Q, Huang Z,Ye X, ve ve diğerleri. Laboratuvar içinde A tüp: İzolasyon, çıkarma, Ve dırdiğer amplifikasyon tespit ile ilgili ekzosomal uzun kodlamayan RNA mide kanser. Talanta. 2021;225:122090.
doi:10.1016/j.tta.2021.122090(EĞER:6.057)
[6] Liu C, Zou G, ve al. 5-Formilurasil gibi A Çokişlevsel Bina Engellemek içinde Biyosensör Tasarımlar[J].Angew Kimya Uluslararası Ed İngilizce 2018 Temmuz 26;57(31):9689-9693.（IF 11.992）
[7] Vang M, Zhang S, Zheng G, ve ve diğerleri. Fonksiyon Kazancı Mutasyona uğramışiyon Card14'ün Yol açar Kendiliğinden olan Sedef hastalığına benzer Deri Enflamasyon yoluyla Geliştirilmiş Keratinosit Yanıt IL-17A. Bağışıklık. 2018;49(1):66-79.e5.
doi:10.1016/j.immuni.2018.05.012(IF:19.734)
[8] Zhang Y, Çıngırak H, Wang X, ve ve diğerleri. MK2 teşvik eder Tfcp2l1 bozulma aracılığıyla β-TrCP ubikitin benigaz ile düzenlemek fare embriyonik kök hücrenin kendini yenilemesi. Hücre Temsilci 2021;37(5):109949. doi:10.1016/j.celrep.2021.109949 (EĞER:9.423)
[9] Lin Q,Ye X,Yang B, ve ve diğerleri. Gerçek zamanlı floresan döngü aracılı izotermal amplififikation deneme için ani Ve hassas tespit Streptokok gallolyticus alt türü. galolyticus ile ilişkili kolorektal kanser[J].
Analitik Ve biyoanalitik kimya, 2019, 411(26): 6877-6887.（IF6.35）
[10] Lin S,Ye X, Huang Z, ve ve diğerleri. Grafen Oksit bazlı Bastırma ile ilgili Belirsizlik içinde Döngü Aracılı İzoter kötüAmplifikasyon Hassasiyeti Etkinleştirme Tespit Siklooksijenaz-2'nin mRNA içinde Renkktal Kanser[J].Analiz kal kimya, 2019.（IF6.35）
Atıf:
[1] Loeb LA, Jr R. DNA polimerazları ve insan hastalıkları[J]. Nature Reviews Genetics.