- ความอยากที่จะล้างเอนไซม์
เหตุใดโปรตีเอสและฟอสฟาเตสจึงบริสุทธิ์จากโปรตีน?
เมื่ออยู่ในสภาวะสมดุล โปรตีนภายในร่างกายจะถูกผลิตและย่อยสลาย ทำให้ระดับเซลล์ของโปรตีนยังคงเสถียร เมื่อโปรตีนถูกสกัดจากเซลล์และเนื้อเยื่อในหลอดทดลอง เอนไซม์ภายในร่างกายจำนวนมากที่สามารถย่อยสลายโปรตีนที่สกัดได้ เช่น ฟอสฟาเตสและโปรตีเอส ก็จะถูกปลดปล่อยออกมาด้วย เมื่อการผลิตโปรตีนถูกยับยั้งอย่างมีนัยสำคัญและการย่อยสลายยังคงดำเนินต่อไป เอนไซม์เหล่านี้สามารถย่อยสลายโปรตีนในสารสกัดได้อย่างรวดเร็ว เพื่อป้องกันการทำลายโปรตีนเป้าหมายโดยโปรตีเอสในระหว่างการทำให้โปรตีนบริสุทธิ์ จึงมีการเติมสารยับยั้งโปรตีเอสเพื่อยับยั้งการทำงานของโปรตีน
นอกจากนี้ การฟอสโฟรีเลชันและดีฟอสโฟรีเลชันของโปรตีนในเซลล์ยังเป็นสวิตช์ควบคุมกิจกรรมทางชีวภาพที่สำคัญหลายอย่าง เช่น การถ่ายทอดสัญญาณ การแพร่กระจายของเซลล์ การแบ่งตัวของเซลล์ และการตายของเซลล์ การปกป้องสถานะการฟอสโฟรีเลชันของโปรตีนมีความสำคัญในการศึกษาเส้นทางการฟอสโฟรีเลชันของโปรตีนและเส้นทางการถ่ายทอดสัญญาณ ดังนั้น การควบคุมการทำงานของฟอสฟาเตสจึงมีความสำคัญทางสรีรวิทยาอย่างมากในการวิจัยโปรตีน
การแนะนำผลิตภัณฑ์
สารยับยั้งโปรตีโอไลติก (สารยับยั้งโปรตีเอส) หมายถึงสารที่จับกับกลุ่มบางกลุ่มที่ศูนย์กลางการทำงานของโมเลกุลโปรตีเอส ทำให้กิจกรรมของโมเลกุลลดลงหรือกำจัดออกไปโดยไม่ทำให้โปรตีนเอนไซม์เสียสภาพ สารต่างๆ เช่น ลิวเพปติน แอนติเพน ไคโมสแตติน อีลาสตาตินัลดีไฮด์ อะโปรตินิน และฟอสโฟรามิดอน ซึ่งแยกได้จากน้ำหมักแอคติโนไมซีต สามารถยับยั้งทริปซิน ปาเปน ไคโมทริปซิน อีลาสเตส เปปซิน และเมทัลโลโปรตีเนส ตามลำดับ และถือเป็นสารยับยั้งโปรตีเอสทั้งหมด
ส่วนประกอบของผลิตภัณฑ์
| สารยับยั้ง | ส่วนประกอบ | ประเภทการยับยั้ง |
| สารยับยั้งโปรตีเอส | AEBSF（หมายเลขรหัส 20111ES） | สารยับยั้งเอนไซม์เซอรีนโปรตีเอสที่ไม่สามารถย้อนกลับได้ |
| อะโปรตินิน (Cat#20105ES) | สารยับยั้งเอนไซม์เซอรีนโปรตีเอสแบบกลับคืนได้ที่สามารถแข่งขันได้ | |
| เบสตาติน（Cat#20132ES） | สารยับยั้งอะมิโนเปปไทเดสแบบกลับคืนได้ | |
| E-64（หมายเลขรหัสสินค้า 20129ES） | สารยับยั้งโปรตีเอสซิสเตอีนที่ไม่สามารถย้อนกลับได้ | |
| ลิวเพปติน (Cat#20112ES) | สารยับยั้งโปรตีเอสเซอรีนและซิสเตอีนแบบกลับคืนได้ | |
| เปปสแตติน เอ (Cat#20113ES) | สารยับยั้งโปรตีเอสแอสปาร์ติกแบบกลับคืนได้ | |
| EDTA（หมายเลขรหัสสินค้า 60126ES） | สารยับยั้งเมทัลโลโปรตีเนสแบบกลับคืนได้ | |
| 1,10-ฟีแนนโทรลีน | สารยับยั้งเมทัลโลโปรตีเนสแบบกลับคืนได้ | |
| ฟอสโฟรามิดอน | สารยับยั้งเมทัลโลโปรตีเนสแบบกลับคืนได้ | |
| สารยับยั้งฟอสฟาเตส | แคนทาริดิน | สารยับยั้งโปรตีนฟอสฟาเทส 2A ที่สามารถกลับคืนได้ |
| (-)-พี-โบรโมเททรามิโซล ออกซาเลต | สารยับยั้งฟอสฟาเตสอัลคาไลน์ที่ไม่สามารถกลับคืนได้ | |
| ไมโครซิสติน-แอลอาร์ | สารยับยั้งโปรตีนฟอสฟาเทส 1 และโปรตีนฟอสฟาเทส 2A ที่สามารถกลับคืนได้ | |
| โซเดียมออร์โธวานาเดต (Cat#20133ES) | สารยับยั้งฟอสฟาเตสอัลคาไลน์และฟอสฟาเตสไทโรซีนแบบกลับคืนได้ | |
| โซเดียม โมลิบเดต | สารยับยั้งกรดฟอสฟาเตสที่ไม่สามารถกลับคืนได้ | |
| โซเดียมทาร์เตรต | สารยับยั้งกรดฟอสฟาเตสแบบกลับคืนได้ | |
| อิมิดาโซล | สารยับยั้งฟอสฟาเตสอัลคาไลน์แบบกลับคืนได้ | |
| โซเดียมฟลูออไรด์ | สารยับยั้งกรดฟอสฟาเตสแบบกลับคืนได้ |
ข้อมูลสินค้า
สารสกัดโปรตีนแต่ละชนิดมีโปรตีเอสที่แตกต่างกัน ตัวอย่างเช่น สารสกัดเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมมักมีเซอรีนโปรตีเอสในปริมาณสูง สารสกัดเซลล์แบคทีเรียมักมีเซอรีนโปรตีเอสและเมทัลโลโปรตีเอเนสมากกว่า และสารสกัดจากพืชมักมีเซอรีนโปรตีเอสและซิสเตอีนโปรตีเอสจำนวนมาก รวมทั้งบางส่วนมีโปรตีเอสแอสปาร์ติกโปรตีเอสด้วย นอกจากนี้ AEBSF อาจทำให้เกิดการเคลื่อนตัวของจุดสูงสุดของแมสสเปกโตรเมตรี ดังนั้นสารยับยั้งโปรตีเอสที่มี AEBSF จึงไม่เหมาะสำหรับการตรวจจับและวิเคราะห์ด้วยแมสสเปกโตรเมตรี (Mass Spectrometry, MS) ดังนั้น
การสั่งซื้อสินค้า
| หมายเลขสินค้า | ชื่อสินค้า | ส่วนประกอบ | ข้อมูลจำเพาะ |
| 20123ES | InStab™ Protease Cocktail ปราศจาก EDTA ในรูปแบบเม็ดยาขนาดเล็ก | ประกอบด้วย AEBSF, Aprotinin, Bestatin, E-64, Leupeptin, Pepstatin A และส่วนประกอบอื่น ๆ | 1 ขวด (10 เม็ด) / 1 ขวด (50 เม็ด) |
| 20124ES | ค็อกเทลสารยับยั้งโปรตีเอส InStab™ ปราศจาก EDTA สารละลายสต็อก DMSO 100 เท่า | ประกอบด้วย AEBSF, Aprotinin, Bestatin, E-64, Leupeptin, Pepstatin A และส่วนประกอบอื่น ๆ | 1มล./10×1มล./100×1มล. |
| 20134ES | ค็อกเทลสารยับยั้งโปรตีเอส InStab™ สำหรับสารสกัดจากเชื้อราและยีสต์ ปราศจาก EDTA สารละลายสต็อก DMSO 100× | ประกอบด้วย AEBSF, E-64, Pepstatin A, 1,10-phenanthroline | 1 มล. |
| 20135ES | ค็อกเทลสารยับยั้งโปรตีเอส InStab™ เพื่อการชำระโปรตีนที่มีแท็ก His ปราศจาก EDTA สารละลายสต็อก 100×DMSO | ประกอบด้วย AEBSF, Bestatin, E-64, Pepstatin A, Phosphoramidon Disodium Salt | 1 มล. |
| 20136ES | ค็อกเทลสารยับยั้งโปรตีเอส InStab™ สำหรับสกัดเซลล์และเนื้อเยื่อพืช ปราศจาก EDTA สารละลายสต็อก DMSO 100× | ประกอบด้วย AEBSF, เบสติติน, E-64, ลิวเพปติน, เปปสตาติน เอ, 1,10-ฟีแนนโทรลีน | 1 มล. |
| 20137ES | ค็อกเทลสารยับยั้งโปรตีเอส InStab™ สำหรับสกัดเซลล์แบคทีเรีย 100 เท่าของสต็อก | ประกอบด้วย AEBSF, Bestatin, E-64, Pepstatin A และ EDTA บรรจุแยกชิ้น | 2 มล. |
| 20138ES | ค็อกเทลสารยับยั้งโปรตีเอส InStab™ สำหรับ MS-SAFE สารละลายสต็อก 50× | ประกอบด้วย Aprotinin, Bestatin, E-64, Leupeptin และ EDTA บรรจุแยกชิ้น | 2 มล. |
| 20109ES | หลอดบรรจุสารแคนทาริดิน โบรโมเททรามิโซล ไมโครซิสติน-แอลอาร์ หลอดบรรจุสารโซเดียมออร์โธวานาเดต โซเดียมโมลิบเดต โซเดียมทาร์เทรต อิมิดาโซล โซเดียมฟลูออไรด์ | 2มล./10×2มล./100×2มล. | |
| 20140ES | ค็อกเทลสารยับยั้งดีอะซิไทเลส (100 เท่าใน 70% DMSO) | ประกอบด้วย Trichostatin A, EX-527, Nicotinamide, Sodium Butyrate | 1 มล. |
| 20104ES | พีเอ็มเอสเอฟ |
| 1ก/5×1ก |