รีเอเจนต์ทรานสเฟกชันเซลล์กลายมาเป็นรีเอเจนต์ประจำสำหรับการศึกษาและควบคุมการทำงานของยีนในเซลล์ยูคาริโอต รีเอเจนต์ทรานสเฟกชันใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยการทำงานของยีน การควบคุมการแสดงออกของยีน และการวิเคราะห์การกลายพันธุ์ รวมถึงการบำบัดด้วยยีน การบำบัดด้วยเซลล์ การผลิตโปรตีน และการผลิตวัคซีน ทรานสเฟกชันคืออะไร และจะเลือกรีเอเจนต์ทรานสเฟกชันประเภทใดตามการทดลองของคุณ?

การถ่ายโอนยีนมีประเภทใดบ้าง?

คุณสมบัติของรีเอเจนต์ทรานส์เฟกชั่นจาก Yeasen

จะเลือกชนิดของรีเอเจนต์ทรานสเฟกชันให้เหมาะกับการทดลองของคุณอย่างไร?

กรณีการใช้งาน

เอกสารอ้างอิงสำหรับเงื่อนไขการถ่ายโอนยีน

คำถามที่พบบ่อย

เคารพการอ่าน

การถ่ายโอนยีนมีประเภทใดบ้าง?

กรดนิวคลีอิกถูกรวมเข้ากับโครโมโซมของเซลล์โฮสต์หลังการถ่ายยีนหรือไม่ โดยจะแบ่งออกเป็น "ชั่วคราว" (การถ่ายยีนชั่วคราว) และ "เสถียร" (การถ่ายยีนเสถียร) ประสิทธิภาพการถ่ายยีน ความเป็นพิษต่อเซลล์ ผลกระทบต่อสรีรวิทยาปกติ และระดับการแสดงออกของยีนของวิธีถ่ายยีนที่แตกต่างกันนั้นแตกต่างกัน หลักการ การใช้งาน และลักษณะเฉพาะต่างๆ จะถูกเปรียบเทียบในตารางต่อไปนี้:

ตารางที่ 1 การเปรียบเทียบวิธีการถ่ายยีนที่แตกต่างกัน

คุณสมบัติของ สารเคมีถ่ายโอนยีนจาก Yeasen

สำหรับรีเอเจนต์การถ่ายโอนดีเอ็นเอและรีเอเจนต์การถ่ายโอนอาร์เอ็นเอ Yeasen บริษัทเทคโนโลยีชีวภาพมีทีมวิจัยและพัฒนาและผลิตที่แข็งแกร่ง ปรับปรุงสูตรอย่างต่อเนื่อง ปรับปรุงกระบวนการผลิต และเปิดตัวผลิตภัณฑ์ต่างๆ มากมายที่ใช้ไลโปโซมและโพลีเมอร์ที่มีประจุบวก สถาบันวิจัยวิทยาศาสตร์และบริษัทต่างๆ จัดหาผลิตภัณฑ์ครบวงจร และสายผลิตภัณฑ์ครอบคลุมทุกสาขาที่เกี่ยวข้องกับรีเอเจนต์ทรานส์เฟกชัน

• ประสิทธิภาพสูง: เหมาะสำหรับการถ่ายยีนชั่วคราวหรือถ่ายยีนแบบเสถียรของสายเซลล์
• ความเป็นพิษต่ำ: เซลล์ที่ถูกถ่ายโอนยังคงมีชีวิตอยู่ได้ดี
• ความสามารถในการปรับตัวได้กว้าง: ครอบคลุมเซลล์ทั่วไปและเซลล์หลักที่ถ่ายโอนได้ยาก
• ใช้งานง่าย: เหมาะสำหรับตัวกลางที่มีซีรั่ม โดยไม่ต้องเปลี่ยนตัวกลางก่อนและหลังการถ่ายยีน
• ประหยัดต้นทุน: ประหยัดและใช้งานได้จริง ประสิทธิภาพการถ่ายโอนข้อมูลสูง ราคาต่ำ

จะเลือกชนิดของรีเอเจนต์ทรานสเฟกชันให้เหมาะกับการทดลองของคุณอย่างไร?

การเลือกสารเคมีสำหรับการถ่ายโอนยีนจะต้องเลือกตามวัตถุประสงค์ในการทดลองและเนื้อหาของการทดลองที่แตกต่างกัน เช่น สารที่ถ่ายโอนยีน เซลล์เฉพาะ ความสะดวกในการดำเนินการ และปัจจัยอื่นๆ

กรณีการใช้งาน

รีเอเจนต์การถ่ายโอนลิโปโซม Hieff Trans™

ไฮฟ์ ทรานส์™ มีจำหน่ายในรูปแบบของเหลวที่ผ่านการฆ่าเชื้อ โดยทั่วไป สำหรับการถ่ายยีนด้วยแผ่น 24 หลุม แต่ละครั้ง ให้ใช้ Hieff Trans™ 1 มล. ประมาณ 1.5 μL สามารถทำได้ประมาณ 660 ทรานส์เฟกชั่น สำหรับเพลท 6 หลุม ประมาณ 6 μL ต่อครั้ง Hieff Trans™ 1 มล. สามารถทำได้ประมาณ 660 ทรานส์เฟกชั่น 160 ทรานส์เฟกชั่น;

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติมกรุณาดู ความมั่นใจในการถ่ายโอนยีนด้วย Hieff Trans™ Lipofectamine Reagent

โพลีเอทิลีนเอมีนเชิงเส้น (PEI) เอ็มW40000 (สลายตัวอย่างรวดเร็ว)

PEI 40000 เป็นพอลิเมอร์ที่มีประจุบวกสูงที่มีน้ำหนักโมเลกุล 40,000 ซึ่งจับโมเลกุลของกรดนิวคลีอิกที่มีประจุลบได้ง่ายมาก ทำให้เกิดสารเชิงซ้อนและทำให้สารเชิงซ้อนเข้าสู่เซลล์ได้ PEI 40000 เป็นรีเอเจนต์การถ่ายโอนชั่วคราวที่มีพิษต่อเซลล์ต่ำ ประสิทธิภาพการถ่ายโอนสูง และประสิทธิภาพการแสดงออกของยีนสูงในเซลล์ เช่น HEK293 และ CHO รีเอเจนต์การถ่ายโอน PEI เชิงเส้นได้รับการตรวจสอบแล้วสำหรับสายเซลล์หลากหลายประเภท เช่น เซลล์ HEK-293, HEK293T, CHO-K1, COS-1, COS-7, NIH/3T3, Sf9, HepG2 และ Hela ประสิทธิภาพการถ่ายโอนสูงถึง 80%~90%

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติมกรุณาดู ตัวใหม่ที่เป็นที่ชื่นชอบสำหรับการถ่ายโอนยีน —— Linear PEI MW 40000 รีเอเจนต์การถ่ายโอนยีนที่มีประสิทธิภาพมากขึ้น

ไฮฟ์ ทรานส์™ ในหลอดทดลอง รีเอเจนต์ถ่ายโอน siRNA/miRNA

ผลิตภัณฑ์นี้สามารถบรรลุประสิทธิภาพการแสดงออกมากกว่า 90% ของ siRNA 1 nM ในสายเซลล์ที่หลากหลาย โดยหลีกเลี่ยงผลกระทบนอกเป้าหมาย เหมาะสำหรับการถ่ายโอนยีนของเซลล์หลากหลายชนิด รวมถึงเซลล์ Hela, MCF-7, HepG2, CHO และเซลล์ที่ยึดเกาะอื่นๆ และสายเซลล์แขวนลอยที่ถ่ายโอนยีนได้ยาก เช่น เซลล์ K562 หรือ THP-1 สามารถบรรลุประสิทธิภาพในการทำให้เงียบได้ 80% รวมถึงเซลล์หลักบางชนิด ไฟโบรบลาสต์ของมนุษย์หลัก และเซลล์ตับของมนุษย์หลัก เป็นต้น สามารถบรรลุประสิทธิภาพในการทำให้เงียบได้ 80%

เอกสารอ้างอิงสำหรับเงื่อนไขการถ่ายโอนยีน

นอกจากคำแนะนำสำหรับผลิตภัณฑ์แต่ละชนิดแล้ว ลูกค้ายังต้องปฏิบัติตามเนื้อหาการทดลองเฉพาะของตนเองด้วย และปริมาณการใช้ก็จะแตกต่างกันออกไป ตามสภาพการถ่ายโอนเซลล์ในหลอดทดลองที่ลูกค้ารายงานหลังจากใช้ผลิตภัณฑ์ เราจึงได้คัดแยกไว้เป็นข้อมูลอ้างอิงสำหรับคุณ

คำถามที่พบบ่อย

1 Hieff Trans™ รีเอเจนต์การถ่ายโอนไลโปโซม

1.1 ถาม: สามารถมีเซรั่มเมื่อเตรียมคอมเพล็กซ์รีเอเจนต์การถ่ายโอนกรดนิวคลีอิกได้หรือไม่

A: การมีซีรั่มจะส่งผลต่อการสร้างไลโปโซม ขอแนะนำให้ใช้ตัวกลางที่ไม่มีซีรั่ม (โดยทั่วไปคือตัวกลาง MEM) เมื่อเตรียมคอมเพล็กซ์รีเอเจนต์การถ่ายโอนกรดนิวคลีอิก

1.2 ถาม: ฉันควรใส่ใจอะไรเมื่อใช้ Hieff Trans™ Liposomal Nucleic Acid Transfection Reagent?

ก:

1) เมื่อเซลล์ได้รับการถ่ายยีน ความหนาแน่นของเซลล์จะอยู่ที่ 80%-95% เป็นหลัก และความหนาแน่นของการเพาะเลี้ยงเฉพาะจะถูกกำหนดตามสถานการณ์ของเซลล์

2) การใช้ DNA ที่มีความบริสุทธิ์สูงช่วยให้ได้รับประสิทธิภาพการถ่ายโอนยีนที่สูงขึ้น

3) จำเป็นต้องเจือจาง DNA และรีเอเจนต์การถ่ายโอนด้วยตัวกลางที่ปราศจากซีรั่มเมื่อเตรียมสารเชิงซ้อนการถ่ายโอน

4) ไม่สามารถเติมยาปฏิชีวนะลงในอาหารเลี้ยงเชื้อระหว่างการถ่ายยีนได้

5) ควรเก็บสารเคมีที่อุณหภูมิ 2-8°C และควรระวังอย่าเปิดฝาซ้ำๆ เป็นเวลานาน

6) ควรปรับความเข้มข้นของ DNA และจำนวนรีเอเจนต์ไลโปโซมประจุบวกให้เหมาะสมสำหรับการใช้ครั้งแรกเพื่อให้ได้ประสิทธิภาพการถ่ายโอนยีนสูงสุด โดยทั่วไปอัตราส่วนของ DNA ต่อรีเอเจนต์การถ่ายโอนยีนควรอยู่ที่ 1:2-1:3

1.3 ถาม: จำเป็นต้องยุติการถ่ายยีนหลังการถ่ายยีนหรือไม่?

A: ไม่จำเป็น คอมเพล็กซ์ไลโปโซมจะคงตัวอยู่ได้ 6 ชั่วโมง หากไม่เปลี่ยนอาหารเลี้ยงเซลล์ก่อนการถ่ายยีน เพื่อให้แน่ใจว่ามีสารอาหารที่จำเป็นสำหรับการเจริญเติบโตของเซลล์ตามปกติ จำเป็นต้องเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่หลังจากผ่านไป 4-6 ชั่วโมง อย่างไรก็ตาม หากมีการเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเซลล์ก่อนการถ่ายยีน ก็ไม่จำเป็นต้องเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเซลล์หลังการถ่ายยีนไลโปโซม

1.4 ถาม: สามารถทำ co-transfection ของ DNA และ siRNA ได้หรือไม่ ได้ผลเป็นอย่างไรบ้าง

A: ใช่ เมื่อ DNA และ siRNA ถูกถ่ายโอนร่วมกัน ประสิทธิภาพการถ่ายโอน siRNA จะแย่ลงเล็กน้อย

1.5 ถาม: รีเอเจนต์การถ่ายโอนยีนสามารถใช้ในการถ่ายโอนยีนบรรจุภัณฑ์เลนติไวรัสได้หรือไม่

A: สามารถบรรจุ Lentiviral ได้

1.6 ถาม: สามารถถ่ายโอนยีนไปยังเซลล์แขวนลอยด้วย Hieff Trans™ Liposomal Nucleic Acid Transfection Reagent ได้หรือไม่

A: สามารถใช้ Hieff Trans™ Liposome Nucleic Acid Transfection Reagent สำหรับการถ่ายโอนเซลล์แบบแขวนลอยได้ โปรดดูรายละเอียดใน Protocol นอกจากนี้ เรายังแนะนำรีเอเจนต์การถ่ายโอนเซลล์แบบแขวนลอยโดยเฉพาะ (Cat No.40805, สารรีเอเจนต์การถ่ายโอนลิโปโซมปลอดเซลล์แขวนลอย Hieff Trans™

2 ไฮเอฟ ทรานส์™ ในหลอดทดลอง รีเอเจนต์ถ่ายโอน siRNA/miRNA

2.1 ถาม: จำเป็นต้องเปลี่ยนสารเคมีสำหรับการถ่ายโอนยีนหลังการถ่ายโอนยีนหรือไม่?

A: ปัญหานี้สามารถแบ่งได้เป็น 2 กรณี: 1. หากไม่มีการเปลี่ยนแปลงตัวกลางก่อนการถ่ายยีน ควรเปลี่ยนตัวกลางประมาณ 6 ชั่วโมงหลังการถ่ายยีนเพื่อให้แน่ใจว่ามีสารอาหารที่จำเป็นสำหรับการเจริญเติบโตของเซลล์ 2. หากมีการเปลี่ยนแปลงตัวกลางก่อนการถ่ายยีน สามารถดำเนินการตามการทำงานปกติของเซลล์ที่เพาะเลี้ยงได้หรือไม่? ? หลังจากการดำเนินการเปลี่ยนของเหลวหรือไม่?

2.2 ถาม: สามารถแช่แข็งสารเคมีการถ่ายโอนยีนได้หรือไม่?

A: ไม่สามารถแช่แข็งได้ เนื่องจากรีเอเจนต์ทรานสเฟกชันเป็นรีเอเจนต์ทรานสเฟกชัน PEI ที่มีประจุบวก การแช่แข็งที่อุณหภูมิต่ำจะทำลายการทำงานของรีเอเจนต์ทรานสเฟกชัน PEI ดังนั้น จึงควรเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 2-8 °C เพื่อรักษาประสิทธิภาพการทรานสเฟกชันให้ดีที่สุด

ข้อมูลสินค้า

บทความบางส่วนที่ตีพิมพ์โดยใช้ผลิตภัณฑ์ของเรา

[1] Liu R, Yang J และคณะ การควบคุมการทำงานของ RNA และการเผาผลาญด้วยออปโตเจเนติกส์โดยใช้โปรตีนที่จับกับ RNA ที่เปลี่ยนแสงได้ซึ่งออกแบบขึ้นโดยวิศวกร Nat Biotechnol 3 มกราคม 2022 (IF:55)

[2] Luo J, Yang Q และคณะ TFPI คือตัวรับคริปต์ลำไส้ใหญ่สำหรับ TcdB จากกลุ่ม 2 C. difficile ที่มีไวรัสรุนแรงมาก Cell. 17 มีนาคม 2022 (IF:41.582)

[3] Zhou J, Chen P และคณะ Cas12a variants Designed for lower genome-wide off-target effect throughstrictent PAM recognition. Mol Ther. 2022 ม.ค. 5.(IF:11.454)

[4] Chen S, Cao X และคณะ circVAMP3 ขับเคลื่อนการแยกเฟส CAPRIN1 และยับยั้งมะเร็งเซลล์ตับด้วยการยับยั้งการแปล c-Myc Adv Sci (Weinh) 24 มกราคม 2022 (IF:16.808)

[5] Gu C, Wang Y และคณะ AHSA1 เป็นเป้าหมายการบำบัดที่มีแนวโน้มดีสำหรับการแพร่กระจายของเซลล์และการดื้อต่อสารยับยั้งโปรตีเอโซมในมะเร็งไมอีโลม่าหลายแห่ง J Exp Clin Cancer Res. 6 ม.ค. 2022 (IF:11.161)

[6] Zhang Y, Yu X และคณะ Splicing factor arginine/serine-rich 8 ส่งเสริมให้เกิดมะเร็งไมอีโลม่าหลายแห่งและการทำลายกระดูกผ่านการตัดต่อทางเลือกของ CACYBP และการสื่อสารของเซลล์ที่ใช้ exosome Clin Transl Med. 2022 ก.พ. (IF:11.492)

[7] Qin J, Cai Y และคณะ กลไกระดับโมเลกุลของการกระตุ้นและการกระตุ้นย้อนกลับในตัวรับเกรลิน Nat Commun. 2022 ม.ค. 13.(IF:14.9)

[8] Tang X, Deng Z และคณะโปรตีนใหม่ที่เข้ารหัสโดย circHNRNPU ส่งเสริมความก้าวหน้าของมะเร็งไมอีโลม่าหลายแห่งโดยควบคุมไมโครเอนไวรอนเมนต์ของไขกระดูกและการตัดต่อทางเลือก J Exp Clin Cancer Res. 2022 Mar 8.(IF:11.161)

[9] Xie F, Su P และคณะ วิศวกรรมเวสิเคิลนอกเซลล์ที่เสริมด้วย ACE2 ที่ถูกปาล์มิโตอิเลตเพื่อใช้เป็นยารักษา COVID-19 Adv Mater. 2021 ต.ค. 19. (IF:30.849)

[10] Liang Y, Lu Q และคณะ การกระตุ้นการทำงานของยีนระงับเนื้องอกในมะเร็งเต้านมโดยการสลับเอนฮานเซอร์ผ่านเครือข่าย NamiRNA Nucleic Acids Res. 7 กันยายน 2021 (IF:16.9)

[11] Fan Y, Wang J และคณะ CircNR3C2 ส่งเสริมผลการยับยั้งเนื้องอกที่เกิดจาก HRD1 ผ่านการดูดซับ miR-513a-3p ในมะเร็งเต้านมชนิดสามชนิด Mol Cancer 2 กุมภาพันธ์ 2021 (IF:27.403)

[12] Dai L, Dai Y และคณะ ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับโครงสร้างในการสรรหาคอมเพล็กซ์ BRCA1-BARD1 ไปยังโครมาตินที่เสียหาย Mol Cell 1 กรกฎาคม 2021 (IF:17.97)

[13] Zhang K, Wang A และคณะ แกน UBQLN2-HSP70 ลดการรวมตัวกันของ poly-Gly-Ala และบรรเทาข้อบกพร่องทางพฤติกรรมในแบบจำลองสัตว์ C9ORF72 Neuron 16 มิถุนายน 2021 (IF:17.17)

[14] Li T, Chen X และคณะ อุปกรณ์ออปโตเจเนติกส์สังเคราะห์ที่ใช้ BRET สำหรับการแสดงออกของทรานส์ยีนแบบเป็นจังหวะซึ่งช่วยให้รักษาสมดุลของกลูโคสในหนูได้ Nat Commun. 27 ม.ค. 2021 (IF:14.92)

[15] Yan F, Huang C และคณะ Threonine ADP-Ribosylation of Ubiquitin by a Bacterial Effector Family Blocks Host Ubiquitination. Mol Cell. 2020 พฤษภาคม 21.(IF:17.97)

[16] Sun X, Peng X และคณะ ADNP ส่งเสริมการแยกตัวของเซลล์ประสาทโดยปรับเปลี่ยนการส่งสัญญาณ Wnt/β-catenin Nat Commun. 12 มิ.ย. 2020 (IF:14.911)

[17] Yang X, Wang H และคณะ การเชื่อมต่อสัญญาณ ERBB3 และ ERK ใหม่ช่วยให้ต้านทานการยับยั้ง FGFR1 ในมะเร็งทางเดินอาหารที่มีการกลายพันธุ์ ERBB3-E928G Protein Cell. 2020 ธ.ค. (IF:14.872)

[18] Zou Y, Wang A และคณะ การวิเคราะห์ภูมิประเทศรีดอกซ์และพลวัตในเซลล์ที่มีชีวิตและในร่างกายโดยใช้เซ็นเซอร์ฟลูออเรสเซนต์ที่เข้ารหัสทางพันธุกรรม Nat Protoc. 2018 ต.ค. (IF:13.490)

[19] Hao H, Hu S และคณะ การสูญเสีย Endothelial CXCR7 ทำให้การรักษาสมดุลของหลอดเลือดและการปรับโครงสร้างของหัวใจหลังกล้ามเนื้อหัวใจตาย: ผลกระทบต่อการค้นพบยาสำหรับหลอดเลือด Circulation 28 มีนาคม 2017 (IF:29.69)

เคารพการอ่าน

สารเคมีถ่ายโอนยีน – Hieff Trans™ และ PEI

Linear PEI MW 40000 สารถ่ายโอนยีนที่มีประสิทธิภาพมากขึ้น