HIFAIR ™ Advance Fast 1st Strand cDNA -syntes Supermix för qPCR (GDNA Digester Plus) _ 11155ES

YeasenSku: 11155ES10

Storlek: 10 T
Pris:
Försäljningspris$55.00
Stock:
I lager

Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix för qPCR (gDNA digester plus) är en uppgraderad version av Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix för qPCR (gDNA digester plus). Jämfört med föregående generation Hifair™ Ⅲ Omvänt transkriptas, denna produkt uppvisar ökad tolerans mot inhibitorer, snabbare omvänd transkriptionshastighet och högre cDNA-utbyte, vilket gör den lämplig för omvänd transkriptionsreaktioner av RNA från djur, växter och mikroorganismer. gDNA Digester Mix -V2 som ingår i denna produkt har förbättrats avsevärt i sin förmåga att ta bort resterande DNA, effektivt smälta upp till 1000 ng DNA, vilket säkerställer mer tillförlitliga resultat genom att eliminera DNA-kontamination i RNA-mallar.

Hifair™ AdvanceFast SuperMix innehåller alla komponenter som krävs för omvänd transkription. Lägg bara till RNA-mall och RNase-fri H2O för att initiera reaktionen, samtidigt som aktiviteten av gDNA Digester avslutas för att säkerställa cDNA-integritet.

De omvända transkriptionsprodukterna är lämpliga för färgämnesbaserad och sondbaserad qPCR. De rekommenderas dock inte för amplifiering med långa fragment såsom genkloning. För sådana applikationer, Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Cat#11150ES) rekommenderas för högeffektiv omvänd transkription.

Specifikationer

Kat.nr.

11155ES10 / 11155ES60

Storlek

10 T / 100 T

Komponenter

Komponentnr.

Namn

11155ES10

11155ES60

11155-A

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

60 μL

600 μL

11155-B

gDNA Digester Mix -V2

20 μL

200 μL

11155-C

RNase-fri H2O

200 μL

2×1 ml

Lagring

Denna produkt bör förvaras vid -25~-15 ℃ för 1 år.

Instruktioner

1. När DNA-borttagning krävs

1) DNA-digestion

Förbered följande blandning i ett RNase-fritt mikrocentrifugrör, blanda försiktigt genom pipettering och inkubera vid 37 ℃ i 2 minuter:

Komponenter

Volym(μL)

gDNA Digester Mix -V2

2

Totalt RNA

10 pg–2 µg*

eller mRNA

10 pg–500 ng

RNase-fri H2O

Upp till 14

*Det rekommenderas att använda ≤ 2 µg totalt RNA. Om målgenexpressionen är låg kan mängden ökas upp till 5 µg Total RNA.

2) Inställning av omvänd transkriptionsreaktion (20 µL system):

Komponenter

Volym(μL)

Reaktionsblandning från steg 1

14

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

6

3) Reaktionsprogram:

Temperatur

Tid

50 ℃

5 min

85 ℃

5 sek

2. När DNA-borttagning är Inte Nödvändig

1) Inställning av omvänd transkriptionsreaktion (20 µL system):

Komponenter

Volym(μL)

Hifair™ AdvanceFast SuperMix

6

Totalt RNA

10 pg–2 µg*

eller mRNA

10 pg–500 ng

RNase-fri H2O

Upp till 20

*Det rekommenderas att använda ≤ 2 µg totalt RNA. Om målgenexpressionen är låg kan mängden ökas upp till 5 µg Total RNA.

2) Reaktionsprogram:

Temperatur

Tid

50 ℃

5 min

85 ℃

5 sek

Anteckningar

1. Denna produkt är endast avsedd för forskning.

2. Använd labbrockar och engångshandskar,för din säkerhet.

3. Utför alla pipetterings- och blandningssteg på is för att bibehålla provets integritet.

4. Vänd försiktigt upp och centrifugera varje komponent vid låg hastighet före användning för att säkerställa korrekt blandning.

Dokumentera:

Manuell

Storage

This product should be stored at -25~ -15℃ for 1 year.

FAQ

This product is subsequently used for qPCR of common RNA. Random primers N6 and Oligo dT have been added in a certain proportion in the reverse transcription premix, so no additional primers are required. If qPCR or long fragment PCR for special RNAs such as small RNAs or circular RNAs is to be conducted subsequently, it is recommended to use the separate primer reverse transcription kits 11139ES or 11149ES.
For molecular enzyme reagents, simply invert and mix them together, then perform a gentle centrifugation. It is not recommended to vigorously shake to mix them.
The 11155ES can accommodate RNA input ranging from 10 pg to 5 μg. However, an excessively high RNA input does not necessarily lead to a more forward Ct value. Additionally, an excessively high input of self-prepared RNA also brings about residual other components. These inhibitory components remaining in the reverse transcription product may inhibit the subsequent qPCR reaction, resulting in an increased Ct value, fluctuation of the curve, or precipitation of the product. Ultimately, it is necessary to dilute the cDNA for use to achieve the final result.
It is not recommended to use a longer reverse transcription time. Using a longer time may cause the Ct value to be delayed. It is recommended to follow the procedure suggested in the manual.
For the PCR instrument, proper settings should be made. It is recommended to set the temperature at 4℃ for an infinite duration (∞) after the reaction is completely terminated. This is to prevent the possibility of forgetting to remove the tube after the reaction is completed. The PCR hot lid, through heat conduction, keeps the product in a high-temperature heating state.
No need. The reverse transcription product is usually a mixture, besides the cDNA product, there are also residual RNA, proteins, salt ions, dNTPs, etc. Among them, dNTPs cause significant interference for the determination using a microplate spectrophotometer, and the final measured value obtained from the product determination is not the concentration of the product. The equal amount level has been controlled and added in the RNA section before reverse transcription.
The product has been tested and found to be stable for one week at room temperature without any adverse effects. Therefore, it can be used to complete the subsequent experiments.
After opening, ensure that the reagents have not been contaminated by the syringe tips. Then, they can be stored at 4℃. However, it is recommended to use them up within 2 weeks.
We recommend using products 11188–11190ES.

Citations

Du kanske också gillar

Förfrågan

Vanliga frågor

Produkten är endast avsedd för forskningsändamål och är inte avsedd för terapeutisk eller diagnostisk användning hos människor eller djur. Produkter och innehåll skyddas av patent, varumärken och upphovsrätt som ägs av Yeasen Biotechnology. Varumärkessymboler anger ursprungsland, inte nödvändigtvis registrering i alla regioner.

Vissa applikationer kan kräva ytterligare immateriella rättigheter från tredje part.

Yeasen är dedikerad till etisk vetenskap, och anser att vår forskning bör behandla kritiska frågor samtidigt som den säkerställer säkerhet och etiska standarder.