Denna produkt är ett bakteriofag T7 RNA-polymeras som härrör från rekombinant proteinuttryck i Escherichia coli. Den katalyserar 5'→3'-syntesen av RNA på dubbelsträngat DNA från dess T7-promotorsekvens (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') och använder NTP som substrat. DNA:t med dubbelsträngade linjära trubbiga ändar eller 5'-utskjutande ändar kan användas som mallar för T7 RNA-polymeras, så linjäriserade plasmider och PCR-produkter kan användas som mallar för in vitro syntes av RNA.
Notera: G* är den första basen i RNA-transkriptet.
Denna produkt tillverkas i enlighet med GMP-föreskrifter och tillhandahålls i flytande form.
Särdrag
- Syntetisera långa transkript och korta transkript, RNA kan produceras 100-200 μg med 1 μg DNA-mall
- Högre avkastning och lätt att använda
- Lägre endotoxiner
- Testad för frånvaro av endonukleaser, exonukleaser, RNaser
Ansökan
- Radiomärkt RNA-sondpreparat
- RNA-generering för studier av RNA-struktur, bearbetning och katalys
- Uttryckskontroll via antisens-RNA
- mRNA, sgRNA-syntes
Specifikation
| Källa | Uttryckt i E. coli med en rekombinant T7 RNA-polymerasgen |
| Optimal temperatur | 37℃ |
| Förvaringsbuffert | 50 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0,1 % Triton X-100, 50 % (v/v) glycerin, pH 7,9 at 25℃ |
| Enhetsdefinition | Mängden enzym som krävs för att införliva 1 nmol [3H] GMP i den syraolösliga fällningen inom 1 timme vid 37°C och pH 8,0 definieras som 1 enhet. |
Kvalitet
| COA-artiklar | Standard |
| Aktivitet | 250-300U/μL |
| Protein koncentration | ≥0,5 mg/ml |
| Renhet | ≥95 % |
| Endotoxin | <20 EU/mg |
| Kvarvarande proteas | Negativ |
| Kvarvarande exonukleas | Negativ |
| Kvarvarande Nickase | Negativ |
| Kvarvarande RNas | Negativ |
| E. coli värdprotein | <50 ppm |
| E.coli-värd DNA | <10 fg/U |
| Mykoplasma DNA | Negativ |
Komponenter
| Komponentnr. | Namn | 10625ES10 (10 KU) | 10625ES60 (100 KU) | 10625ES86 (2 500 KU) | 10625ES99 (100 MU) |
| 10625 | T7 RNA-polymeras GMP-kvalitet (250 U/μL) | 40 μL | 400 μL | 10 ml | 400 ml |
Frakt och förvaring
T7 RNA Polymerase GMP-klassade produkter levereras med torris och kan lagras vid -15 ℃ ~ -25 ℃ i ett år.
Siffror
Figur 1. Standard-RNA syntetiserades in vitro med användning av T7 RNA-synteskit.
Reaktionen inkuberades i PCR-instrument vid 37°C under 2 timmar och renades sedan med magnetiska pärlor (Cat #12602). Utbytesresultatet analyserades med NanoDrop-spektrofotometer som visas i figur 1.
Figurer 2. Transkriptionsdemonstrationen av RNA av olika längd med T7-kit i respektive elektroforetogram (figur 2A), kapillärelektroforesdiagram (figur 2B) och kromatogram (figur 2C)
Figur 3. Syntes av kapslad RNA in vitro.
Reaktionen inkuberades i PCR-instrument vid 37°C under 2 timmar och renades sedan med magnetiska pärlor (Cat #12602). Utbytesresultatet analyserades med NanoDrop-spektrofotometer som visas i figur 3A. Integritetsresultatet analyserades genom kapillärelektrofores som visas i figur 3B.
10625_Manual_HB221111_SV.pdf
Citat och referenser:
Storage
FAQ
1)ptimizing the sequence immediately upstream of the template's 3' end;
2)Controlling the IVT yield, as excessively high transcription levels tend to increase the frequency of self-extension events.
Citations
Documents
Du kanske också gillar
Förfrågan
Vanliga frågor
Produkten är endast avsedd för forskningsändamål och är inte avsedd för terapeutisk eller diagnostisk användning hos människor eller djur. Produkter och innehåll skyddas av patent, varumärken och upphovsrätt som ägs av Yeasen Biotechnology. Varumärkessymboler anger ursprungsland, inte nödvändigtvis registrering i alla regioner.
Vissa applikationer kan kräva ytterligare immateriella rättigheter från tredje part.
Yeasen är dedikerad till etisk vetenskap, och anser att vår forskning bör behandla kritiska frågor samtidigt som den säkerställer säkerhet och etiska standarder.