2 × Hieff Canace ™ Advance Fast High -Fidelity PCR Master Mix (med färgämne) -10164ES

YeasenSku: 10166ES01

Storlek: 250 ul
Pris:
Försäljningspris$20.00
Stock:
I lager


2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye) är en färdigblandad 2x förblandad lösning som innehåller Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA-polymeras, dNTPs och ett optimerat buffertsystem, som innehåller förtillagda elektroforesindikatorer. Förblandningen innehåller förtillsatt elektroforesindikator, PCR-produkter kan elektrofores direkt, amplifieringsprodukterna är platta ändar. 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye) har fördelarna av snabbt och enkelt, hög känslighet, hög specificitet, bra stabilitet, etc., reaktionssystemet kan tillsättas med endast primers och mallar. Dessutom innehåller produkten även ett specifikt skyddsmedel, så att premixen fortfarande kan bibehålla stabil aktivitet efter upprepad frysning och upptining.

Ultrahög trohet: Låg missmatchningshastighet hos mutationsbenägen hög GC-gen;
Snabb hastighet: Hastigheten är lika snabb som 5 sek/kb;
Bred tillämplighet: Den kan användas för att amplifiera gener med 20-80 % GC-innehåll och tolerera 20 % blod- och muslysat;
Bra stabilitet: Förvaras vid 37°C i 7 dagar utan att påverka prestandan;
Enkel användning: Bara att lägga till primers och mallar för amplifiering, med blått laddningsfärgämne för direkt elektrofores.

Specifikationer

Kat.nr. 10164ES01 10164ES03 10164ES08
Storlek 250 μL 1 ml 5×1 ml

Siffror

Figur: Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA-polymeras har hög kvalitet jämfört med andra märkens produkter (A). Analysen gjordes genom att undersöka mutationsfrekvensen för PCR-produkter av 6 GC-rika (cirka 80%) segment amplifierade från genomen från olika arter. PCR-produkterna amplifierade av Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA-polymeras klonades in i vektorer och 100 utvalda enkla kloner för varje sekvens utsattes för Sanger-sekvensering.

Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA-polymeras har hög amplifieringshastighet (B), hög GC-amplifieringskompatibilitet (C) och blodtolerans (D). Resultat från kunders PCR och sekvensering visar att Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA-polymeras har bra prestanda i PCR-utbyten och specificitet (EH).

Lagring

Denna produkt bör förvaras vid -25~-15 ℃ i 1 år.

Instruktioner

  1. Rekommenderade PCR-reaktionssystem.

Komponenter

Volym (μL)

Slutlig koncentration

2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (med färg)*

25

1×

Mall**

x

-

Fram Primer(10 μmol/L)***

2

0,4 μmol/L

Motsatt Primer (10 μmol/L)

2

0.4 μmol/L

ddH2O

Upp till 50

-

Tabell 1 PCR-reaktionssystem

*I 1× förblandningar innehållande 2 mM Mg2+ och 200 μM dNTPs.

**Rekommenderat intervall 10-200 ng, cDNA-provuppladdningsvolymintervall inte mer än 1/10 av reaktionssystemet, rekommenderat 1-2,5 μL.

***Den slutliga primerkoncentrationen i PCR-reaktionssystemet sträcker sig från 0,2-1 μM och 0,4 μM rekommenderas.

  1. Reaktionsprogram.

Cykel steg

Temp.

Tid

Cyklar

Initial denaturering

98℃

30 sek

1

Denaturering

98℃

10 sek

30-35

Glödgning*

60 ℃

5 sek

Förlängning**

72℃

5-10 sek/kb

Slutlig förlängning

72℃

2 min

1

Tabell 2 PCR-reaktionsprogram

*Rekommenderad temperatur: 60°C, en temperaturgradient kan ställas in för att hitta den optimala temperaturen för primerglödgning. Den rekommenderade glödgningstiden är inställd på 5 sek och kan justeras från 5-30 sek. För lång glödgningstid kan resultera i diffusa amplifieringsprodukter på gelén.

**Förlängningstid: Rekommenderad 5 sek/kb, kan även utökas till 10 sek/kb efter behov.

Anteckningar

  1. Denna produkt är endast avsedd för forskning.
  2. Använd labbrockar och engångshandskar, för din säkerhet.

Dokument:

Manualer

Citat och referenser:

[1] Dong W, Zhu Y, Chang H, et al. En SHR-SCR-modul specificerar baljväxtkortikala cellöde för att möjliggöra nodulation. Natur. 2021;589(7843):586-590. doi:10.1038/s41586-020-3016-z(IF:42.779)

[2] Sun L, Yan Y, Lv H, et al. Rapamycin riktar sig mot STAT3 och påverkar c-Myc för att undertrycka tumörtillväxt. Cell Chem Biol. 2022;29(3):373-385.e6. doi:10.1016/j.chembiol.2021.10.006(IF:8.116)

[3] Ye M, Xiong L, Dong Y, et al. Den potentiella rollen för metioninaminopeptidasgenen PxMetAP1 i en kosmopolitisk skadedjur för Bacillus thuringiensis toxintolerans. Int J Mol Sci. 2022;23(21):13005. Publicerad 2022 27 oktober. doi:10.3390/ijms232113005(IF:6.208)

[4] He Y, Zhou J, Fu R, et al. Tillämpningen av DNA-HRP-funktionaliserade AuNP-sonder vid kolorimetrisk detektion av citrusassocierade Alternaria-gener. Talanta. 2022;237:122917. doi:10.1016/j.talanta.2021.122917(IF:6.057)

[5] Guo L, Yang W, Huang Q, et al. Selenocystein-specifik masspektrometri avslöjar vävnadsdistinkta selenoproteomer och kandidatselenoproteiner. Cell Chem Biol. 2018;25(11):1380-1388.e4. doi:10.1016/j.chembiol.2018.08.006(IF:5.592)

[6] Dou W, Zhu Q, Zhang M, Jia Z, Guan W. Screening och utvärdering av de starka endogena promotorerna i Pichia pastoris. Fakta om mikrobceller. 2021;20(1):156. Publicerad 2021 9 aug. doi:10.1186/s12934-021-01648-6(OM:5.328)

[7] Xiong Y, Yi Y, Wang Y, Yang N, Rudd CE, Liu H. Ubc9 interagerar med och SUMOylerar TCR-adaptern SLP-76 för NFAT-transkription i T-celler. J Immunol. 2019;203(11):3023-3036. doi:10.4049/jimmunol.1900556(IF:4.718)

[8] Huang L, Xiang M, Ye P, Zhou W, Chen M. Beta-catenin främjar makrofagmedierad akut inflammatorisk respons efter hjärtinfarkt. Immunol Cell Biol. 2018;96(1):100-113. doi:10.1111/imcb.1019(IF:4.557)

[9] Wang X, Du A, Yu G, Deng Z, He X. Guanidin N-metylering av BlsL är beroende av acylering av beta-amin arginin i biosyntesen av Blasticidin S. Front Microbiol. 2017;8:1565. Publicerad 2017 22 aug. doi:10.3389/fmicb.2017.01565(IF:4.076)

[10] Yu P, Zhou L, Yang WT, et al. Jämförande mitogenomanalyser avslöjar mitogenomegenskaper och fylogenetiska implikationer av underfamiljen Cobitinae. BMC Genomics. 2021;22(1):50. Publicerad 2021 14 januari. doi:10.1186/s12864-020-07360-w(IF:3,969)

[11] Liu G, Liu Y, Niu B, et al. Genetisk mutation av TRPV2 inducerar ångest genom att minska GABA-B R2-uttrycket i hippocampus. Biochem Biophys Res Commun. 2022;620:135-142. doi:10.1016/j.bbrc.2022.06.079(IF:3,575)

[12] Tan KS, Zhang Y, Liu L, et al. Molekylär kloning och karakterisering av ett atypiskt butyrylkolinesterasliknande protein i zebrafisk. Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol. 2021;255:110590. doi:10.1016/j.cbpb.2021.110590(IF:2.231)

Storage

This product should be stored at -25~-15℃ for 1 years.

FAQ

When dealing with fragments larger than 10 kb, it is advisable to combine 68℃ with 10 sec/kb to enhance the amplification success rate. For fragments smaller than 10 kb, an amplification speed of 5 sec/kb can be used.
(1) This 10166ES product can accommodate cDNA amplification ranging from 1 kb to 14 kb. If you need to perform long fragment amplification, it is recommended to use the validated 11149ES reverse transcription kit from Yeasen Biotechnology to reverse transcribe the target RNA. The resulting cDNA template can then be used in conjunction with 10166ES for long fragment amplification.
(2) If the RNA sample is small or if you need to obtain a very long target fragment, it is recommended not to perform digestion during reverse transcription. The longer the target fragment, the more RNA needs to be input, and accordingly, more cDNA will be required.
10166ES is a high-fidelity PCR product. High fidelity means a lower error rate and more accurate sequences. However, different experimental methods may result in variations. Product mutations are low-probability events. It is recommended to perform multiple repeated sets of new amplifications to obtain unmutated amplification products.
Yes, after testing, the 10166ES can cover fragments with GC content ranging from 20% to 80%. When expanding fragments with a high GC content, it is recommended to adjust the temperature to 68℃, which will significantly increase the success rate.
The 10166ES can tolerate a certain amount of bacterial solution. After testing, it has been found that this product can tolerate bacterial solution at a proportion of 12.5% in the reaction system, and it has good specificity. If you need to directly expand the bacterial solution, please keep the proportion below 12.5%.
The 10166ES product can tolerate a certain amount of cDNA stock solution, which contains residual RNA and degraded RNA. Therefore, cDNA containing uracil can be used as the template. However, there is a certain range. After product performance testing, 10166ES can meet the requirement of a cDNA input volume accounting for 15% of the reaction system.
(1) For plant genomes, after product performance testing, it can detect as low as 100pg of plant genome.
(2) For animal genomes, after product performance testing, the minimum detectable amount is 100pg of animal genome.
(3) For plasmids, since they are relatively pure, after product performance testing, the minimum detectable amount is 1pg of plasmid.
Possible causes and solutions:
(1)The thawing requirements for 10166ES stipulate that it should be thawed slowly on ice, and it cannot be thawed at room temperature or through heating.
(2) When performing the amplification process, it is recommended to set the temperature at 68℃ and the amplification speed at 10 seconds per kilobase.
(3) The longer the target fragment to be amplified is, the more template should be used.
(4) In the PCR system, the concentration of primers is too low or the number of cycles is insufficient: appropriately increase the amount of primers, or increase the number of amplification cycles;

Citations

Applications

Du kanske också gillar

Förfrågan

Vanliga frågor

Produkten är endast avsedd för forskningsändamål och är inte avsedd för terapeutisk eller diagnostisk användning hos människor eller djur. Produkter och innehåll skyddas av patent, varumärken och upphovsrätt som ägs av Yeasen Biotechnology. Varumärkessymboler anger ursprungsland, inte nödvändigtvis registrering i alla regioner.

Vissa applikationer kan kräva ytterligare immateriella rättigheter från tredje part.

Yeasen är dedikerad till etisk vetenskap, och anser att vår forskning bör behandla kritiska frågor samtidigt som den säkerställer säkerhet och etiska standarder.