Набор для анализа генов с двойным люциферазой _ 11402ES
Перевернуть изображение, чтобы увеличить Нажмите на изображение, чтобы увеличить
Набор для анализа генов с двойным люциферазой _ 11402ES
Набор для анализа генов с двойным люциферазой _ 11402ES
Люцифераза светлячка — это белок с молекулярной массой около 61 кДа, который может катализировать окисление люциферина в оксилюциферин в присутствии АТФ, ионов магния и кислорода. Он испускает биолюминесценцию с длиной волны около 560 нм. Люцифераза рениллы — это белок с молекулярной массой около 36 кДа, который может катализировать окисление целентеразина в целентерамид в присутствии кислорода и испускает длину волны 480 нм в процессе окисления. о биолюминесценции. Обе биолюминесценции можно измерить с помощью хемилюминесценции. Принцип обнаружения показан на рисунке 1: Рисунок 1: Схема анализа люциферазы Firefly и Renilla Обычно 5'UTR или...

Frequently Bought Together

Набор для анализа генов с двойным люциферазой _ 11402ES

YeasenSku: 11402ES10
Размер: 10 т
Цена:
$25.00
Запас:
В наличии

Люцифераза светлячка — это белок с молекулярной массой около 61 кДа, который может катализировать окисление люциферина в оксилюциферин в присутствии АТФ, ионов магния и кислорода. Он испускает биолюминесценцию с длиной волны около 560 нм. Люцифераза рениллы — это белок с молекулярной массой около 36 кДа, который может катализировать окисление целентеразина в целентерамид в присутствии кислорода и испускает длину волны 480 нм в процессе окисления. о биолюминесценции. Обе биолюминесценции можно измерить с помощью хемилюминесценции. Принцип обнаружения показан на рисунке 1:

Рисунок 1: Схема анализа люциферазы Firefly и Renilla

Обычно 5'UTR или промотор целевого гена клонируется выше люциферазы светлячка, или 3'UTR клонируется ниже люциферазы светлячка, и эффект регуляции транскрипции промотора или регуляторного элемента обнаруживается путем определения количества люциферазы светлячка. Люцифераза Renilla использовалась в качестве внутреннего контроля для устранения различий в количестве клеток, эффективности трансфекции и т. д. Набор для анализа гена-репортера двойного люциферазы использует люциферин в качестве субстрата для определения активности гена-репортера люциферазы светлячка, а затем использует целентеразин в качестве субстрата для определения люциферина Renilla при тушении реакции флуоресценции. Активность гена-репортера фермента. Набор обладает характеристиками высокой чувствительности.

Функции

Расширенные возможности лизиса: способность полностью лизировать подавляющее большинство типов клеток.

Более сильный сигнал: точное обнаружение слабой экспрессии промотора.

Более высокая чувствительность: обнаруживается до 10–20 пикомолей молекул люциферазы.

Более широкий линейный диапазон: Линейный диапазон обнаружения превышает 8 порядков концентрации фермента.

Приложения

Проверка взаимодействий miRNA с 3'UTR целевого гена

Проверка взаимодействий lncRNA-miRNA

Проверка регуляции факторов транскрипции в промоторной области

Анализ сигнальных путей

Анализ активности SNP

Технические характеристики

Форма

жидкость

Люцифераза

Светлячок и Ренилла

Период полураспада сигнала

30 мин.

Количество компонентов продукта

5

Рабочий процесс

Два Степ

Компоненты

Номер компонента

Имя

11402ES60

11402ES80

11402-А

Клеточные лизаты

20 мл

10×20 мл

11402-Б

Буфер Люциферазы Светлячка

10 мл

10×10 мл

11402-С

Субстрат люциферазы светлячка (50 ×)

200 мкл

10×200 мкл

11402-Д

Буфер люциферазы Рениллы

10 мл

10×10 мл

11402-Е

Субстрат люциферазы Renilla (50 ×)

200 мкл

10×200 мкл

Доставка и хранение

Продукты набора для анализа гена-репортера двойного люциферазы следует хранить при температуре -15℃. ~ -25℃ для 1 год.

Цифры

Рисунок1. ЙЕСЕН (Кот#: 11402) имеет интенсивность флуоресценции, сопоставимую с таковой у марки P.

Фигура2. ИИЗЕН (Кот#: 11402) реагенты обнаружения взаимодействуют с люциферазой для достижения оптимальной интенсивности люминесценции. После добавления субстрата люциферазы Renilla биолюминесценция люциферазы светлячка гасится: ее можно по существу полностью погасить.

Документы:

Паспорт безопасности

11402 MSDS HB220209 EN.PDF

Руководства

11402 Руководство HB241230 RU.pdf

Цитаты и ссылки:

[1] Ван Х., Ян Дж., Цай И., Чжао И. Макрофаги подавляют сердечное перепрограммирование фибробластов in vivo посредством опосредованной IFN межклеточной самостимулирующей цепи [опубликованное исправление появилось в Protein Cell. 2024 2 декабря;15(12):938. doi: 10.1093/procel/pwae038]. (ЕСЛИ=21,1)

[2] Чжао Л., Чжу И., Тао Х. и др. Айлантон улучшает течение легочного фиброза, подавляя активацию MEOX1, зависящую от JUN. Acta Pharm Sin B. 2024;14(8):3543-3560. doi:10.1016/j.apsb.2024.04.013(ЕСЛИ=14,5)

[3] Wu X, Chen S, Zhang Z и др. Путь вирусной малой интерферирующей РНК-растения-хозяина мРНК модулирует вызванную вирусом устойчивость к засухе путем усиления аутофагии. Plant Cell. 2024;36(9):3219-3236. doi:10.1093/plcell/koae158(ЕСЛИ=12,6)

[4] Xuan H, Li Y, Liu Y и др. Домен H1/H5 способствует разделению фаз OsTRBF2 и репрессии генов во время развития риса. Plant Cell. 2024;36(9):3787-3808. doi:10.1093/plcell/koae199(ЕСЛИ=12)

[5] Han Y, Hu Q, Gong N и др. Естественная изменчивость MORE GRAINS 1 регулирует количество и вес зерен в рисе. J Integr Plant Biol. 2024;66(7):1440-1458. doi:10.1111/jipb.13674(ЕСЛИ=11,4)

[6] Pan M, Luo M, Liu L и др. EGR1 подавляет рост HCC и аэробный гликолиз путем транскрипционного подавления PFKL. J Exp Clin Cancer Res. 2024;43(1):35. Опубликовано 29 января 2024 г. doi:10.1186/s13046-024-02957-5(ЕСЛИ=11,3)

[7] Hao X, Wang S, Fu Y и др. Модуль WRKY46-MYC2 играет решающую роль в реакциях, вызванных E-2-гексеналь, на антитравоядных животных, способствуя накоплению флавоноидов. Plant Commun. 2024;5(2):100734. doi:10.1016/j.xplc.2023.100734(ЕСЛИ=10,5)

[8] Wu J, Li P, Li M и др. Тепловой стресс ухудшает окончание цветочной меристемы и развитие плодов, влияя на каскад BR-SlCRCa в томате. Plant Commun. 2024;5(4):100790. doi:10.1016/j.xplc.2023.100790(ЕСЛИ=10,5)

[9] Чэнь Л., Ся С., Ван Ф. и др. Абляция NR1D1, вызванная метилированием m6A, нарушает циркадные часы HSC и способствует фиброзу печени. Pharmacol Res. 2023;189:106704. doi:10.1016/j.phrs.2023.106704(ЕСЛИ=10,33)

[10] Niu MX, Feng CH, He F и др. Модуль miR6445-NAC029 регулирует устойчивость к засухе, регулируя экспрессию глутатион-S-трансферазы U23 и поглощение активных форм кислорода в Populus. New Phytol. 2024;242(5):2043-2058. doi:10.1111/nph.19703(ЕСЛИ=9,4)

[11]Хуан Т., Ю К., Хуан Д. и др.Положительная обратная связь между PDIA3P1 и OCT4 способствует свойствам стволовых клеток плоскоклеточного рака пищевода. Cell Commun Signal. 2024;22(1):60. Опубликовано 22 января 2024 г. doi:10.1186/s12964-024-01475-3(ЕСЛИ=8,4)

[12]Ван С., Лю И., Хао Х., Чэнь И., Ван З., Шэнь И. Усиление растительных дефензинов в пустынном кустарнике: исследование регуляторного пути AnWRKY29. Int J Biol Macromol. 2024;270(Pt 1):132259. doi:10.1016/j.ijbiomac.2024.132259(ЕСЛИ=8,2)

Storage

The Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit products should be stored at -15℃ ~ -25℃ for 1 year.

FAQ

Yes, they can be stored at -80°C, similar to standard protein storage protocols. Lysed samples can be stored at -80°C for up to 6 months and at -20°C for up to 1 month.
Strict light protection is not required during operation. However, store them protected from light. Low temperature is a more critical storage condition—especially for coelenterazine (the Renilla substrate), which is recommended to be stored at -80°C.
The ratio should be adjusted according to specific experimental conditions. Pilot experiments are recommended—for instance, testing Renilla vector to Firefly vector ratios at 1:10, 1:20, 1:50, and 1:100.
They are assayed in the same well. There is no mutual interference because the Renilla luciferase substrate reagent contains a compound that quenches Firefly luminescence. While separate assays are possible, sequential measurement in a single well is standard.
Different microplate readers vary in sensitivity and parameter settings, which can lead to differences in background signal readings for the same sample.
Opaque white microplates.
Add 0.3 mL of Triton X-100 to 10 mL of PBS to prepare a 3% Triton X-100 solution.
Dilute the cell lysate sample 5-fold prior to testing.
1. Luciferase is expressed intracellularly and is a enzyme non-native to humans (yielding extremely low background). It cannot cross cell membranes. In contrast, luciferase substrates are hydrophobic, cyclic small molecules that penetrate cell membranes easily. Thus, any luciferase expression is exogenous, and adding substrate directly to culture media or injecting it in vivo yields detectable signals.
2. In vitro reporter assays require cell lysis to homogenize samples, overcoming transfection heterogeneity, uneven substrate permeability, and signal variation. In vitro reporter assays are highly quantitative and sensitive, requiring ATP and oxygen. Cell lysis fully releases expressed luciferase to optimize the reaction; since intracellular oxygen is limited, omitting lysis leads to signal reduction (some lysis buffers include optimized additives like ATP to boost signal). Therefore, cell lysis ensures superior signal in in vitro assays. 3. In vivo imaging instruments possess high sensitivity and power capable of penetrating skin and tissue, enabling strong signal detection without cell lysis.
No, the order cannot be adjusted. In this kit, Component B (Firefly Luciferase Buffer) is essential for detecting both Firefly and Renilla luciferases. The optimal reaction environment for Renilla luciferase requires the presence of Component B; otherwise, Renilla luciferase readings will be extremely low.

Citations

Documents

Manual
11402_Manual_HB260114_EN.pdf
MSDS
11402_MSDS_HB220209_EN.pdf

Applications

Вам также может понравиться

Расследование

Часто задаваемые вопросы

Продукт предназначен только для исследовательских целей и не предназначен для терапевтического или диагностического использования на людях или животных. Продукты и содержимое защищены патентами, товарными знаками и авторскими правами, принадлежащими Yeasen Biotechnology. Символы товарных знаков указывают на страну происхождения, а не обязательно на регистрацию во всех регионах.

Для некоторых приложений могут потребоваться дополнительные права интеллектуальной собственности третьих лиц.

Йесен привержен этической науке, полагая, что наши исследования должны затрагивать важнейшие вопросы, обеспечивая при этом безопасность и соблюдение этических стандартов.