2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (с красителем) — это готовый к использованию 2-кратный предварительно смешанный раствор, содержащий Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase, dNTPs и оптимизированная буферная система, которая содержит предварительно добавленные индикаторы электрофореза. Премикс содержит предварительно добавленный индикатор электрофореза, продукты ПЦР могут быть подвергнуты непосредственному электрофорезу, продукты амплификации представляют собой плоские концы. 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye) имеет преимущества быстроты и простоты, высокой чувствительности, высокой специфичности, хорошей стабильности и т. д., реакционную систему можно добавлять только с праймерами и матрицами. Кроме того, продукт также содержит специальный защитный агент, так что премикс может сохранять стабильную активность после многократного замораживания и оттаивания.
Сверхвысокая точность: Низкий уровень несоответствия у людей, склонных к мутациям ген с высоким содержанием GC;
Быстрая скорость: Скорость такая же высокая, как 5 сек/кб;
Широкая применимость: Его можно использовать для амплификации генов с содержанием ГЦ 20–80 %, а также он допускает использование 20 % лизатов крови и мышей;
Хорошая устойчивость: Хранить при температуре 37°C в течение 7 дней без снижения производительности;
Простота использования: Просто добавляем праймеры и матрицы для амплификации с синим загрузочным красителем для прямого электрофореза.
Технические характеристики
| Кат.№ | 10164ES01 | 10164ES03 | 10164ES08 |
| Размер | 250 мкл | 1 мл | 5×1 мл |
Цифры
Рисунок: ДНК-полимераза Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity обладает высокой точностью по сравнению с продуктами других брендов (A). Анализ проводился путем изучения частоты мутаций продуктов ПЦР 6 сегментов, богатых GC (около 80%), амплифицированных из геномов разных видов. Продукты ПЦР, амплифицированные ДНК-полимеразой Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity, клонировались в векторы, и 100 выбранных отдельных клонов для каждой последовательности подвергались секвенированию по Сэнгеру.
Высокоточная ДНК-полимераза Hieff Canace™ AdvanceFast отличается высокой скоростью амплификации (B), высокой совместимостью с GC-амплификацией (C) и переносимостью кровью (D). Результаты ПЦР и секвенирования, полученные нашими клиентами, показывают, что ДНК-полимераза Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity демонстрирует хорошие показатели выходов и специфичности ПЦР (EH).
Хранилище
Данный продукт следует хранить при температуре от -25 до -15℃ в течение 1 года.
Инструкции
- Рекомендуемые системы ПЦР-реакций.
| Компоненты | Объем (мкл) | Финал концентрация |
| 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (с красителем)* | 25 | 1× |
| Шаблон** | х | - |
| Вперед Праймер (10 мкмоль/л)*** | 2 | 0,4 мкмоль/л |
| Обеспечить регресс Праймер (10 мкмоль/л) | 2 | 0.4 мкмоль/л |
| ддх2О | До 50 | - |
Таблица 1 Система реакции ПЦР
*В 1× премиксах, содержащих 2 мМ Mg2+ и 200 мкМ dNTP.
**Рекомендуемый диапазон 10–200 нг, диапазон загружаемого объема образца кДНК не более 1/10 объема реакционной системы, рекомендуемый диапазон 1–2,5 мкл.
***Конечная концентрация праймера в системе ПЦР-реакции составляет 0,2–1 мкМ, рекомендуемая концентрация — 0,4 мкМ.
- Программа реагирования.
| Цикл шаг | Темп. | Время | Циклы |
| Начальная денатурация | 98℃ | 30 сек. | 1 |
| Денатурация | 98℃ | 10 сек. | 30-35 |
| Отжиг* | 60℃ | 5 сек. | |
| Расширение** | 72℃ | 5-10 сек/кб | |
| Финал расширение | 72℃ | 2 мин. | 1 |
Таблица 2 Программа реакции ПЦР
*Рекомендуемая температура: 60°C, можно задать температурный градиент, чтобы найти оптимальную температуру для отжига праймера. Рекомендуемое время отжига установлено на 5 секунд и может быть скорректировано от 5 до 30 секунд. Слишком длительное время отжига может привести к диффузным продуктам амплификации на геле.
**Время расширения: рекомендуемое 5 сек/КБ, при необходимости можно увеличить до 10 сек/КБ.
Примечания
- Данный продукт предназначен только для исследовательских целей.
- Для вашей безопасности работайте в лабораторных халатах и одноразовых перчатках.
Документы:
Цитаты и ссылки:
[1] Dong W, Zhu Y, Chang H и др. Модуль SHR-SCR определяет судьбу кортикальных клеток бобовых, чтобы обеспечить образование клубеньков. Nature. 2021;589(7843):586-590. doi:10.1038/s41586-020-3016-z(IF:42.779)
[2] Sun L, Yan Y, Lv H и др. Рапамицин воздействует на STAT3 и c-Myc, подавляя рост опухоли. Cell Chem Biol. 2022;29(3):373-385.e6. doi:10.1016/j.chembiol.2021.10.006(IF:8.116)
[3] Ye M, Xiong L, Dong Y и др. Потенциальная роль гена метиониновой аминопептидазы PxMetAP1 у космополитического вредителя для устойчивости к токсинам Bacillus thuringiensis. Int J Mol Sci. 2022;23(21):13005. Опубликовано 27 октября 2022 г. doi:10.3390/ijms232113005(IF:6.208)
[4] He Y, Zhou J, Fu R и др. Применение ДНК-HRP-функционализированных зондов AuNP в колориметрическом обнаружении генов Alternaria, ассоциированных с цитрусовыми. Talanta. 2022;237:122917. doi:10.1016/j.talanta.2021.122917(IF:6.057)
[5] Го Л., Ян В., Хуан Ц. и др. Селеноцистеин-специфическая масс-спектрометрия выявляет тканеспецифичные селенопротеомы и селенопротеины-кандидаты. Cell Chem Biol. 2018;25(11):1380-1388.e4. doi:10.1016/j.chembiol.2018.08.006(IF:5.592)
[6] Доу В., Чжу Ц., Чжан М., Цзя З., Гуань В. Скрининг и оценка сильных эндогенных промоторов Pichia Pastoris. Факт о микробной клетке. 2021;20(1):156. Опубликовано 9 августа 2021 г. doi:10.1186/s12934-021-01648-6(ЕСЛИ:5.328)
[7] Xiong Y, Yi Y, Wang Y, Yang N, Rudd CE, Liu H. Ubc9 взаимодействует с адаптером TCR SLP-76 и SUMOylates для транскрипции NFAT в Т-клетках. J Immunol. 2019;203(11):3023-3036. doi:10.4049/jimmunol.1900556(IF:4.718)
[8] Хуан Л., Сян М., Е. П., Чжоу В., Чэнь М. Бета-катенин стимулирует опосредованный макрофагами острый воспалительный ответ после инфаркта миокарда. Immunol Cell Biol. 2018;96(1):100-113. doi:10.1111/imcb.1019(IF:4.557)
[9] Ван X, Ду А, Ю Г, Дэн Z, Хе X. N-метилирование гуанидина BlsL зависит от ацилирования бета-амина аргинина в биосинтезе бластицидина S. Front Microbiol. 2017;8:1565. Опубликовано 22 августа 2017 г. doi:10.3389/fmicb.2017.01565(IF:4.076)
[10] Ю П., Чжоу Л., Ян В. Т. и др. Сравнительный анализ митогенома раскрывает особенности митогенома и филогенетические последствия подсемейства Cobitinae. BMC Genomics. 2021;22(1):50. Опубликовано 14 января 2021 г. doi:10.1186/s12864-020-07360-w(IF:3.969)
[11] Лю Г., Лю И., Ниу Б. и др. Генетическая мутация TRPV2 вызывает тревожность, снижая экспрессию GABA-B R2 в гиппокампе. Biochem Biophys Res Commun. 2022;620:135-142. doi:10.1016/j.bbrc.2022.06.079(IF:3.575)
[12] Тан КС, Чжан И, Лю Л и др. Молекулярное клонирование и характеристика атипичного белка, подобного бутирилхолинэстеразе, у данио-рерио. Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol. 2021;255:110590. doi:10.1016/j.cbpb.2021.110590(IF:2.231)
Storage
FAQ
(2) If the RNA sample is small or if you need to obtain a very long target fragment, it is recommended not to perform digestion during reverse transcription. The longer the target fragment, the more RNA needs to be input, and accordingly, more cDNA will be required.
(2) For animal genomes, after product performance testing, the minimum detectable amount is 100pg of animal genome.
(3) For plasmids, since they are relatively pure, after product performance testing, the minimum detectable amount is 1pg of plasmid.
(1)The thawing requirements for 10166ES stipulate that it should be thawed slowly on ice, and it cannot be thawed at room temperature or through heating.
(2) When performing the amplification process, it is recommended to set the temperature at 68℃ and the amplification speed at 10 seconds per kilobase.
(3) The longer the target fragment to be amplified is, the more template should be used.
(4) In the PCR system, the concentration of primers is too low or the number of cycles is insufficient: appropriately increase the amount of primers, or increase the number of amplification cycles;
Citations
Applications
Вам также может понравиться
Расследование
Часто задаваемые вопросы
Продукт предназначен только для исследовательских целей и не предназначен для терапевтического или диагностического использования на людях или животных. Продукты и содержимое защищены патентами, товарными знаками и авторскими правами, принадлежащими Yeasen Biotechnology. Символы товарных знаков указывают на страну происхождения, а не обязательно на регистрацию во всех регионах.
Для некоторых приложений могут потребоваться дополнительные права интеллектуальной собственности третьих лиц.
Йесен привержен этической науке, полагая, что наши исследования должны затрагивать важнейшие вопросы, обеспечивая при этом безопасность и соблюдение этических стандартов.