MolPuur^TM Magnetische universele virale DNA/RNA-kit is geschikt voor het extraheren van viraal nucleïnezuur uit volbloed of celvrije lichaamsvloeistofmonsters (zoals serum, plasma, cerebrospinaal vocht, neus-/keelholte-uitstrijkje, alveolaire lavagevloeistof, enz.). Deze methode maakt gebruik van magnetische kralenzuiveringstechnologie, zonder giftige fenolchloroformextractie, veilig, niet-toxisch en snel. De resulterende producten kunnen direct worden gebruikt voor PCR, qPCR, tweedegeneratiesequencing en andere experimenten. Met het automatische extractie-instrument van de magnetische kralenmethode kan de high-throughput extractie van nucleïnezuur worden gerealiseerd.

Product ikInformatie

Componenten

Bgebotteld Versie

Voorverpakte Versie

Opslag

Deel I: Bewaren bij kamertemperatuur, transporteren bij kamertemperatuur, met een houdbaarheid van 1 jaar.

Deel II: Voor component 18521-G (Protease K), bewaren bij 2~8℃, transporteren bij kamertemperatuur.

Notities

1．De verschillende buffers in deze kit bevatten guanidiniumzouten. Draag voor uw veiligheid en gezondheid een labjas

en wegwerphandschoenen tijdens gebruik. Hanteer volgens de standaardveiligheidsmaatregelen om contact met de huid, ogen en slijmvliezen te voorkomen. Spoel bij contact onmiddellijk grondig met water en zoek medische hulp.

2．Als er neerslag in de oplossing ontstaat, moet deze in een waterbad van 30°C worden verwarmd totdat het neerslag is opgelost.

volledig opgelost zijn voor gebruik.

3．Als de magnetische kralensuspensie bevroren is, mag u deze niet gebruiken.

4．De verschillende buffers in deze kit bevatten guanidiniumzouten. Niet behandelen met oxiderende ontsmettingsmiddelen zoals

zoals natriumhypochloriet, omdat dit giftige gassen kan vrijgeven. Ze moeten worden behandeld als medisch afval.

5．Tijdens de elutie kunnen er magnetische kralen achterblijven. Probeer bij het aspireren van monsters te voorkomen dat u de

magnetische kralen.

Instructies

1. Toepasbare monstertypen: volbloed, serum, plasma, hersenvocht, neus-/keeluitstrijkjes,

bronchoalveolaire lavagevloeistof en andere monsters.

2. Opslag en transport van monsters: Monsters kunnen direct worden gebruikt voor testen of worden opgeslagen bij -70°C of

lager voor toekomstige tests met een houdbaarheid van 6 maanden. Vermijd herhaaldelijk invriezen en ontdooien. Monsters moeten worden vervoerd met behulp van koudeketenlogistiek.

3. Vereisten voor invriezen en ontdooien: Snel invriezen en snel ontdooien om herhaalde cycli te voorkomen.

Bedieningsstappen

Er werd gecontroleerd of er neerslag in de oplossing ontstond en of de magnetische kralen opnieuw konden worden gesuspendeerd vóór de experimenten.

Handmatig Ikextractie

1. Breng 200-300 μL van het monster over in een centrifugebuis van 1,5 ml, voeg 600 μL lysisbindingsvloeistof toe,

20 μL protease K en 20 μL magnetische kralensuspensie, dan vortexmix gedurende 30 seconden op hoge snelheid. Incubeer bij 50 °C met schudden gedurende 5-7 minuten; als de incubator geen schudfunctie heeft, vortex dan drie keer tijdens de incubatie, telkens gedurende 15 seconden.

2. Breng het mengsel over naar een magnetische standaard van 1,5 ml voor magnetische scheiding totdat de oplossing helder en doorzichtig is. Zuig de oplossing vervolgens op en gooi deze weg.

3. Voeg 700 μl wasoplossing A toe, meng gedurende 10 seconden met de vortexmixer om de magnetische kralen te verspreiden en breng het geheel over naar de magneetstandaard voor magnetische scheiding totdat de oplossing helder is. Zuig de oplossing vervolgens op en gooi deze weg.

4. Voeg 700 μl wasoplossing B toe, meng gedurende 10 seconden met de vortexmixer om de magnetische kralen te verspreiden en breng het geheel over naar de magneetstandaard voor magnetische scheiding totdat de oplossing helder is. Zuig de oplossing vervolgens op en gooi deze weg.

5. Herhaal stap 4 met nog eens 700 μL wasoplossing B.

6. Kort centrifugeren om druppels op de buiswand te verzamelen, overbrengen naar de magnetische standaard tot het helder is, aspireren en de resterende vloeistof weggooien. 3-5 minuten aan de lucht laten drogen.

Let op: Ethanolresidu kan daaropvolgende enzymatische reacties remmen, dus zorg ervoor dat ethanol volledig verdampt tijdens het drogen. Droog niet te lang om te voorkomen dat de daaropvolgende elutie wordt beïnvloed.

7. Voeg 50-100 μL elutievloeistof toe, vortex op hoge snelheid gedurende 2-3 minuten om de magnetische kralen te verspreiden. Incubeer op 60°C gedurende 5 minuten, vortex vervolgens op hoge snelheid gedurende 60 seconden.

8. Centrifugeer kort om de druppels op de dop van het buisje in het buisje te verzamelen. Plaats het buisje in de magneetstandaard totdat de magnetische kralen volledig zijn geadsorbeerd. Giet de vloeistof vervolgens voorzichtig over in een nieuw centrifugebuisje om de nucleïnezuuroplossing te verkrijgen.

9. De nucleïnezuuroplossing kan kortdurend bij -20°C en langdurig bij -80°C worden bewaard.

Geautomatiseerd Ikextractie

Yeasen AP-96N automatisch instrument voor extractie en zuivering van nucleïnezuur (voor meer soorten instrumenten kunt u contact opnemen met de technische ondersteuning)

1. Vóór het experiment, verpak de diepe gatplaat met krachtoscillatie meerdere keren om vloeistofresten op het afdichtingsmembraan te voorkomen. De oplossing werd gecontroleerd op neerslag en of de magnetische kralen opnieuw konden worden gesuspendeerd.

2. Plaats elke 96-wells plaat in de juiste volgorde in het nucleïnezuurextractie-instrument en plaats de magnetische staafhuls met 96 diepe gaten.

Positie 1: splijt de bindingsplaat

Positie 2: spoelbord

Positie 3: wassen + magnetische kralenplaat

Positie 4: wasplaat

Positie 6: elueerplaat

3. Voeg 200-300 µL van het monster en 20 µL protease K toe aan de putjes van de lysisbindingsplaat.

4. Voer de volgende procedure uit. Na de procedure, breng het eluaat van de elutieplaat over naar een nieuwe centrifugebuis. De oplossing kan worden geplaatst in -20℃ voor kortetermijnopslag en -80℃ voor langetermijnopslag.

AP-96N-kanaalprogramma voor nucleïnezuurextractie-instrumenten