Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit _ 11402ES
Rol de afbeelding om in te zoomen Klik op de afbeelding om te zoomen
Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit _ 11402ES
Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit _ 11402ES
Firefly luciferase is een proteïne met een moleculair gewicht van ongeveer 61 kDa, dat de oxidatie van luciferine tot oxyluciferine kan katalyseren in aanwezigheid van ATP, magnesiumionen en zuurstof. Het zendt bioluminescentie uit met een golflengte van ongeveer 560 nm. Renilla luciferase is een proteïne met een moleculair gewicht van ongeveer 36 kDa, dat de oxidatie van coelenterazine tot coelenteramide kan katalyseren in aanwezigheid van zuurstof, en zendt een golflengte uit van 480 nm tijdens het oxidatieproces. over bioluminescentie. Beide bioluminescentie kan worden gemeten door chemiluminescentie. Het detectieprincipe wordt weergegeven...

Frequently Bought Together

Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit _ 11402ES

YeasenSKU: 11402ES10
Maat: 10 t
Prijs:
$25.00
Voorraad:
Op voorraad

Firefly luciferase is een proteïne met een moleculair gewicht van ongeveer 61 kDa, dat de oxidatie van luciferine tot oxyluciferine kan katalyseren in aanwezigheid van ATP, magnesiumionen en zuurstof. Het zendt bioluminescentie uit met een golflengte van ongeveer 560 nm. Renilla luciferase is een proteïne met een moleculair gewicht van ongeveer 36 kDa, dat de oxidatie van coelenterazine tot coelenteramide kan katalyseren in aanwezigheid van zuurstof, en zendt een golflengte uit van 480 nm tijdens het oxidatieproces. over bioluminescentie. Beide bioluminescentie kan worden gemeten door chemiluminescentie. Het detectieprincipe wordt weergegeven in figuur 1:

Figuur 1: Schema van de Firefly- en Renilla-luciferase-test

Meestal wordt de 5'UTR of promotor van het doelgen gekloond stroomopwaarts van Firefly Luciferase, of de 3'UTR wordt gekloond stroomafwaarts van Firefly Luciferase, en het transcriptionele regulatie-effect van de promotor of het regulerende element wordt gedetecteerd door de hoeveelheid firefly luciferase te detecteren. Renilla Luciferase werd gebruikt als interne controle om verschillen in celnummer, transfectie-efficiëntie, enz. te elimineren. De Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit gebruikt luciferine als substraat om de activiteit van het firefly luciferase reportergen te detecteren, en gebruikt vervolgens coelenterazine als substraat om Renilla luciferine te detecteren terwijl de fluorescentiereactie wordt geblust. Activiteit van het enzymreportergen. De kit heeft de kenmerken van hoge gevoeligheid.

Functies

Verbeterde lysiscapaciteit: kan de overgrote meerderheid van de celtypen volledig vernietigen.

Sterker signaal: nauwkeurige detectie van zwakke promotorexpressie.

Hogere gevoeligheid: detecteerbaar tot 10-20 picomol luciferasemoleculen.

Breder lineair bereik: Het lineaire detectiebereik overschrijdt 8 ordegroottes van de enzymconcentratie.

Toepassingen

Verificatie van miRNA-interacties met doelgen 3'UTR's

Verificatie van lncRNA-miRNA-interacties

Verificatie van transcriptiefactorregulatie in de promotorregio

Analyse van signaalpaden

SNP-activiteitsanalyse

Specificaties

Formulier

vloeistof

Luciferase

Firefly en Renilla

Signaal Halveringstijd

30 minuten

Aantal productcomponenten

5

Werkstroom

Twee Step

Componenten

Componenten nr.

Naam

11402ES60

11402ES80

11402-A

Cellysaten

20 ml

10×20 ml

11402-B

Vuurvlieg Luciferase Buffer

10 ml

10×10 ml

11402-C

Vuurvlieg luciferase substraat (50 ×)

200 μL

10×200 μL

11402-D

Renilla Luciferase-buffer

10 ml

10×10 ml

11402-E

Renilla Luciferase substraat (50 ×)

200 μL

10×200 μL

Verzending en opslag

De Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit-producten moeten worden bewaard bij -15℃ ~ -25℃ voor 1 jaar.

Cijfers

Figuur 1. Yeasen (Kat#: 11402) heeft een fluorescentie-intensiteit die vergelijkbaar is met die van Brand P.

Figuur2. IkGEMAKKELIJK (Kat#: 11402) detectiereagentia interacteren met luciferase om optimale luminescentie-intensiteit te bereiken. Na de toevoeging van Renilla-luciferasesubstraat wordt de bioluminescentie van vuurvliegluciferase geblust: het kan in wezen volledig worden geblust.

Documenten:

Veiligheidsinformatieblad

11402 MSDS HB220209 NL.PDF

Handleidingen

11402 Handleiding HB241230 NL.pdf

Citaten en referenties:

[1] Wang H, Yang J, Cai Y, Zhao Y. Macrofagen onderdrukken de cardiale herprogrammering van fibroblasten in vivo via een IFN-gemedieerd intercellulair zelfstimulerend circuit [gepubliceerde correctie verschijnt in Protein Cell. 2024 Dec 2;15(12):938. doi: 10.1093/procel/pwae038]. (ALS=21.1)

[2] Zhao L, Zhu Y, Tao H, et al. Ailanthone verlicht longfibrose door JUN-afhankelijke MEOX1-activering te onderdrukken. Acta Pharm Sin B. 2024;14(8):3543-3560. doi:10.1016/j.apsb.2024.04.013(ALS=14,5)

[3] Wu X, Chen S, Zhang Z, et al. Een viraal klein interfererend RNA-gastheerplant mRNA-pad moduleert virus-geïnduceerde droogtetolerantie door autofagie te versterken. Plant Cell. 2024;36(9):3219-3236. doi:10.1093/plcell/koae158(ALS=12,6)

[4] Xuan H, Li Y, Liu Y, et al. Het H1/H5-domein draagt ​​bij aan OsTRBF2-fasescheiding en genrepressie tijdens rijstontwikkeling. Plant Cell. 2024;36(9):3787-3808. doi:10.1093/plcell/koae199(ALS=12)

[5] Han Y, Hu Q, Gong N, et al. Natuurlijke variatie in MORE GRAINS 1 reguleert het aantal korrels en het gewicht van de korrels in rijst. J Integr Plant Biol. 2024;66(7):1440-1458. doi:10.1111/jipb.13674(ALS=11,4)

[6] Pan M, Luo M, Liu L, et al. EGR1 onderdrukt HCC-groei en aerobe glycolyse door transcriptionele downregulatie van PFKL. J Exp Clin Cancer Res. 2024;43(1):35. Gepubliceerd 2024 Jan 29. doi:10.1186/s13046-024-02957-5(ALS=11.3)

[7] Hao X, Wang S, Fu Y, et al. De WRKY46-MYC2-module speelt een cruciale rol in E-2-hexenal-geïnduceerde anti-herbivoorreacties door de accumulatie van flavonoïden te bevorderen. Plant Commun. 2024;5(2):100734. doi:10.1016/j.xplc.2023.100734(ALS=10,5)

[8] Wu J, Li P, Li M, et al. Hittestress belemmert de beëindiging van het bloemmeristeem en de ontwikkeling van fruit door de BR-SlCRCa-cascade in tomaat te beïnvloeden. Plant Commun. 2024;5(4):100790. doi:10.1016/j.xplc.2023.100790(ALS=10,5)

[9] Chen L, Xia S, Wang F, et al. m6A-methylering-geïnduceerde NR1D1-ablatie verstoort de circadiane klok van HSC en bevordert leverfibrose. Pharmacol Res. 2023;189:106704. doi:10.1016/j.phrs.2023.106704(ALS=10,33)

[10] Niu MX, Feng CH, He F, et al. De miR6445-NAC029-module reguleert droogtetolerantie door de expressie van glutathione S-transferase U23 en reactieve zuurstofspecies-scavenging in Populus te reguleren. New Phytol. 2024;242(5):2043-2058. doi:10.1111/nph.19703(ALS=9,4)

[11]Huang T, You Q, Huang D, et al.Een positieve feedback tussen PDIA3P1 en OCT4 bevordert de kankerstamceleigenschappen van plaveiselcelcarcinoom van de slokdarm. Cell Commun Signal. 2024;22(1):60. Gepubliceerd 2024 Jan 22. doi:10.1186/s12964-024-01475-3(ALS=8,4)

[12]Wang S, Liu Y, Hao X, Chen Y, Wang Z, Shen Y. Versterking van plantendefensinen in een woestijnstruik: onderzoek naar een regulerend pad van AnWRKY29. Int J Biol Macromol. 2024;270(Pt 1):132259. doi:10.1016/j.ijbiomac.2024.132259(ALS=8.2)

Storage

The Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit products should be stored at -15℃ ~ -25℃ for 1 year.

FAQ

Yes, they can be stored at -80°C, similar to standard protein storage protocols. Lysed samples can be stored at -80°C for up to 6 months and at -20°C for up to 1 month.
Strict light protection is not required during operation. However, store them protected from light. Low temperature is a more critical storage condition—especially for coelenterazine (the Renilla substrate), which is recommended to be stored at -80°C.
The ratio should be adjusted according to specific experimental conditions. Pilot experiments are recommended—for instance, testing Renilla vector to Firefly vector ratios at 1:10, 1:20, 1:50, and 1:100.
They are assayed in the same well. There is no mutual interference because the Renilla luciferase substrate reagent contains a compound that quenches Firefly luminescence. While separate assays are possible, sequential measurement in a single well is standard.
Different microplate readers vary in sensitivity and parameter settings, which can lead to differences in background signal readings for the same sample.
Opaque white microplates.
Add 0.3 mL of Triton X-100 to 10 mL of PBS to prepare a 3% Triton X-100 solution.
Dilute the cell lysate sample 5-fold prior to testing.
1. Luciferase is expressed intracellularly and is a enzyme non-native to humans (yielding extremely low background). It cannot cross cell membranes. In contrast, luciferase substrates are hydrophobic, cyclic small molecules that penetrate cell membranes easily. Thus, any luciferase expression is exogenous, and adding substrate directly to culture media or injecting it in vivo yields detectable signals.
2. In vitro reporter assays require cell lysis to homogenize samples, overcoming transfection heterogeneity, uneven substrate permeability, and signal variation. In vitro reporter assays are highly quantitative and sensitive, requiring ATP and oxygen. Cell lysis fully releases expressed luciferase to optimize the reaction; since intracellular oxygen is limited, omitting lysis leads to signal reduction (some lysis buffers include optimized additives like ATP to boost signal). Therefore, cell lysis ensures superior signal in in vitro assays. 3. In vivo imaging instruments possess high sensitivity and power capable of penetrating skin and tissue, enabling strong signal detection without cell lysis.
No, the order cannot be adjusted. In this kit, Component B (Firefly Luciferase Buffer) is essential for detecting both Firefly and Renilla luciferases. The optimal reaction environment for Renilla luciferase requires the presence of Component B; otherwise, Renilla luciferase readings will be extremely low.

Citations

Documents

Manual
11402_Manual_HB260114_EN.pdf
MSDS
11402_MSDS_HB220209_EN.pdf

Applications

Misschien vind je het ook leuk

Navraag

FAQ

Het product is alleen bedoeld voor onderzoeksdoeleinden en is niet bedoeld voor therapeutisch of diagnostisch gebruik bij mensen of dieren. Producten en inhoud worden beschermd door patenten, handelsmerken en auteursrechten die eigendom zijn van Yeasen Biotechnologie. Handelsmerksymbolen geven het land van herkomst aan, niet noodzakelijkerwijs registratie in alle regio's.

Voor bepaalde toepassingen zijn mogelijk aanvullende intellectuele eigendomsrechten van derden vereist.

Yeasen is toegewijd aan ethische wetenschap en is van mening dat ons onderzoek kritische vragen moet beantwoorden en tegelijkertijd de veiligheid en ethische normen moet waarborgen.