2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (met kleurstof) is een kant-en-klare 2× voorgemengde oplossing die Hieff Canace™ bevat AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase, dNTP's en een geoptimaliseerd buffersysteem, dat vooraf toegevoegde elektroforese-indicatoren bevat. De premix bevat vooraf toegevoegde elektroforese-indicator, PCR-producten kunnen direct worden geëlektroforetiseerd, de amplificatieproducten zijn platte uiteinden. 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (met kleurstof) heeft de voordelen van snel en gemakkelijk, hoge gevoeligheid, hoge specificiteit, goede stabiliteit, enz., het reactiesysteem kan worden toegevoegd met alleen de primers en sjablonen. Daarnaast bevat het product ook een specifiek beschermend middel, zodat de premix nog steeds een stabiele activiteit kan behouden na herhaaldelijk invriezen en ontdooien.

Ultrahoge betrouwbaarheid: Lage mismatch-ratio bij mutatiegevoelige gen met hoge GC;
Hoge snelheid: De snelheid is net zo snel als 5 seconden/kb;
Brede toepasbaarheid: Het kan worden gebruikt om genen met een GC-gehalte van 20-80% te versterken en 20% bloed- en muislysaten te tolereren;
Goede stabiliteit: Bewaren bij 37°C gedurende 7 dagen zonder dat de prestaties worden beïnvloed;
Eenvoudig in gebruik: Alleen primers en sjablonen toevoegen voor amplificatie, met blauwe laadkleurstof voor directe elektroforese.

Specificaties

Cijfers

Afbeelding: Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase heeft een hoge betrouwbaarheid vergeleken met producten van andere merken (A). De test werd uitgevoerd door de mutatiefrequentie van PCR-producten van 6 GC-rijke (ongeveer 80%) segmenten te onderzoeken die werden geamplificeerd uit de genomen van verschillende soorten. De PCR-producten die werden geamplificeerd door Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase werden gekloond in vectoren en 100 geselecteerde afzonderlijke klonen voor elke sequentie werden onderworpen aan Sanger-sequencing.

Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase heeft een hoge amplificatiesnelheid (B), hoge GC-amplificatiecompatibiliteit (C) en bloedtolerantie (D). Resultaten van PCR en sequentiebepaling bij klanten laten zien dat Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase goede prestaties levert wat betreft PCR-opbrengsten en specificiteit (EH).

Opslag

Dit product moet gedurende 1 jaar bij -25~-15℃ bewaard worden.

Instructies

1. Aanbevolen PCR-reactiesystemen.

Tabel 1 PCR-reactiesysteem

*In 1× premixen met 2 mM Mg2+ en 200 μM dNTP's.

**Aanbevolen bereik 10-200 ng, cDNA-monsteruploadvolumebereik niet meer dan 1/10 van het reactiesysteem, aanbevolen 1-2,5 μL.

***De uiteindelijke primerconcentratie in het PCR-reactiesysteem varieert van 0,2-1 μM, waarbij 0,4 μM wordt aanbevolen.

1. Reactieprogramma.

Tabel 2 PCR-reactieprogramma

*Aanbevolen temperatuur: 60°C, een temperatuurgradiënt kan worden ingesteld om de optimale temperatuur voor primer-annealing te vinden. De aanbevolen annealingtijd is ingesteld op 5 sec en kan worden aangepast van 5-30 sec. Een te lange annealingtijd kan resulteren in diffuse amplificatieproducten op de gel.

**Verlengingstijd: Aanbevolen 5 sec/kb, kan indien nodig worden verlengd tot 10 sec/kb.

Notities

1. Dit product is uitsluitend bedoeld voor onderzoeksdoeleinden.
2. Voor uw eigen veiligheid, draag alstublieft een labjas en wegwerphandschoenen.

Documenten:

10164ES-versie 20230720.pdf

Citaten en referenties:

[1] Dong W, Zhu Y, Chang H, et al. Een SHR-SCR-module specificeert het lot van peulvruchtcorticale cellen om nodulatie mogelijk te maken. Nature. 2021;589(7843):586-590. doi:10.1038/s41586-020-3016-z(IF:42.779)

[2] Sun L, Yan Y, Lv H, et al. Rapamycine richt zich op STAT3 en beïnvloedt c-Myc om tumorgroei te onderdrukken. Cell Chem Biol. 2022;29(3):373-385.e6. doi:10.1016/j.chembiol.2021.10.006(ALS:8.116)

[3] Ye M, Xiong L, Dong Y, et al. De potentiële rol van het methionine-aminopeptidasegen PxMetAP1 in een kosmopolitische plaag voor Bacillus thuringiensis-toxinetolerantie. Int J Mol Sci. 2022;23(21):13005. Gepubliceerd op 27 okt. 2022. doi:10.3390/ijms232113005(IF:6.208)

[4] He Y, Zhou J, Fu R, et al. De toepassing van DNA-HRP-gefunctionaliseerde AuNP-sondes bij colorimetrische detectie van citrus-geassocieerde Alternaria-genen. Talanta. 2022;237:122917. doi:10.1016/j.talanta.2021.122917(IF:6.057)

[5] Guo L, Yang W, Huang Q, et al. Selenocysteïne-specifieke massaspectrometrie onthult weefsel-onderscheidende selenoproteomen en kandidaat-selenoproteïnen. Cell Chem Biol. 2018;25(11):1380-1388.e4. doi:10.1016/j.chembiol.2018.08.006(IF:5.592)

[6] Dou W, Zhu Q, Zhang M, Jia Z, Guan W. Screening en evaluatie van de sterke endogene promoters in Pichia pastoris. Microbcel feit. 2021;20(1):156. Gepubliceerd op 9 augustus 2021. doi:10.1186/s12934-021-01648-6(ALS:5.328)

[7] Xiong Y, Yi Y, Wang Y, Yang N, Rudd CE, Liu H. Ubc9 interageert met en SUMOyleert de TCR-adapter SLP-76 voor NFAT-transcriptie in T-cellen. J Immunol. 2019;203(11):3023-3036. doi:10.4049/jimmunol.1900556(IF:4.718)

[8] Huang L, Xiang M, Ye P, Zhou W, Chen M. Beta-catenine bevordert macrofaag-gemedieerde acute ontstekingsreactie na myocardinfarct. Immunol Cell Biol. 2018;96(1):100-113. doi:10.1111/imcb.1019(IF:4.557)

[9] Wang X, Du A, Yu G, Deng Z, He X. Guanidine N-methylering door BlsL is afhankelijk van acylering van bèta-amine-arginine in de biosynthese van blasticidin S. Front Microbiol. 2017;8:1565. Gepubliceerd op 22 augustus 2017. doi:10.3389/fmicb.2017.01565(IF:4.076)

[10] Yu P, Zhou L, Yang WT, et al. Vergelijkende mitogenoomanalyses onthullen mitogenoomkenmerken en fylogenetische implicaties van de onderfamilie Cobitinae. BMC Genomics. 2021;22(1):50. Gepubliceerd 14 jan. 2021. doi:10.1186/s12864-020-07360-w(ALS:3.969)

[11] Liu G, Liu Y, Niu B, et al. Genetische mutatie van TRPV2 induceert angst door GABA-B R2-expressie in de hippocampus te verlagen. Biochem Biophys Res Commun. 2022;620:135-142. doi:10.1016/j.bbrc.2022.06.079(IF:3.575)

[12] Tan KS, Zhang Y, Liu L, et al. Moleculair klonen en karakterisering van een atypisch butyrylcholinesterase-achtig eiwit in zebravissen. Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol. 2021;255:110590. doi:10.1016/j.cbpb.2021.110590(IF:2.231)