Het circulaire RNA -onderzoekstool -rnase r

Het circulaire RNA-onderzoeksinstrument -RNAse R

—— Versnellen van de ontwikkeling van circulaire RNA-medicijnen

De laatste jaren is het mRNA-vaccin/medicijn geleidelijk aan in de belangstelling van het publiek gekomen. Het mRNA-vaccin/medicijn heeft de voordelen van snel ontwerp, lage kosten en eenvoudige productie, maar omdat het mRNA zelf gemakkelijk afbreekbaar is, wordt momenteel vooral de stabiliteit van het mRNA-preparaat verbeterd door een hoed en staart toe te voegen en mRNA-translatie te ondersteunen. De laatste jaren hebben onderzoekers een nieuw type RNA ontdekt: circulair RNA (Circulair RNA, circRNA). Dergelijke RNA's zijn een covalente gesloten ringstructuur, die niet gemakkelijk afbreekbaar is. Vergeleken met mRNA is circRNA stabieler en kan het een niet-hoedafhankelijke translatie bereiken. Daarom biedt de ontdekking van CIRCRNA mogelijkheden voor de ontwikkeling van een nieuwe generatie RNA-vaccins en -medicijnen met een eenvoudigere, betere stabiliteit.

Figuur 1: Het proces van RNA-vaccin 1

Het productieproces van CIRCRNA omvat: template-voorbereiding, in vitro transcriptie, DNA-template-verwijdering, circulair en zuivering. Nadat RNA is gecirculariseerd, is het noodzakelijk om ribonuclease R (Ribonuclease R, RNASE R) te gebruiken om het onbemande RNA te verteren om het doel van het verrijken van CirCRNA te bereiken. Yeasen heeft een moleculair enzymatisch engineering- en rationeel evolutieplatform. Het zorgt tegelijkertijd voor de kwaliteit van het product. Yeasen Het R&D-team heeft met succes een RNASE R-enzym ontwikkeld met een hoge zuiverheid en hoge activiteit.

RNASE R (CAT#14606ES) is een Mg2+dependence 3 '→ 5' ribonucleïnezuurexonuclease die afkomstig is van E. coli. Het kan alle lineaire RNA's verteren en verteert geen CirCRNA, lariat RNA. Het wordt vaak gebruikt om lineaire RNA-moleculen te verwijderen en het doel te realiseren van het verrijken van niet-lineaire RNA zoals CirCRNA en lariat RNA.

Functies

Eiwitzuiverheid (SDS-PAGE) ≥95%

Figuur 2: Detectie van de zuiverheid van eiwitten: verschillende volumes (1 μL, 2 μL, 3 μL) van het product (Cat.nr. 14606ES) tonen een hoge zuiverheid ≥ 95%.

Geen restanten exonuclease

Figuur 3: 20 U RNASE R werd toegevoegd aan 0,5 μg λDNA-Hind III Digest, geïncubeerd bij 37 ℃ gedurende 4 uur. Het resultaat toont aan dat er geen restanten zijn exonuclease werd gedetecteerd in de RNASE R (CAT#14606ES) producten.

Verteringsvermogen van lineaire RNA en CircRNA

Figuur 4: RNASE R (CAT#14606ES) kan lineaire RNA-moleculen verteren
Figuur 5: CircRNA kan de behandeling van RNASE R (CAT#14606ES) verdragen.

Product

Kat

Maat

RNAse R (20 U/μL)

14606ES

250U/2500U/10000U
RNase R (GMP-kwaliteit, 20 U/μL) 14615ES 250U/2500U/10000U

T7 RNA Polymerase GMP-kwaliteit (250U/μL)

10625ES

10KU/100KU/2500KU
CleaScrip™ T7 RNA-polymerase (laag dsRNA, 250 U/μL) 10628ES 10KU/100KU/2500KU

Referentie

  1. Qu L, Yi Z, Shen Y, et al. Circulaire RNA-vaccins tegen SARS-CoV-2 en opkomende varianten. Cel.2022;185(10):1728-1744.e16.doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
  2. Chen L, Wang C, Sun H, et al. De bioinformatica-toolbox voor circRNA-ontdekking en -analyse. Korte bio-informatie. 2021;22(2):1706-1728. doi:10.1093/bib/bbaa001

Inquiry