박테리오파지 T7의 6번 유전자에 의해 암호화되는 T7 엑소뉴클레아제는 강력한 효소 활성을 나타내는 매우 진행성 있는 5'→3' 엑소뉴클레아제입니다. 이 효소는 이중가닥 DNA(dsDNA) 또는 RNA-DNA 헤테로듀플렉스를 특이적으로 촉매하여 5'-인산화 말단 또는 5'-히드록실 말단에서 가수분해를 개시합니다. 이 효소 반응은 올리고뉴클레오타이드와 모노뉴클레오타이드 생성물의 순차적인 방출을 통해 진행됩니다.
특히, T7 엑소뉴클레아제는 독특한 기질 다양성을 보여주어, 말단 5' 말단뿐만 아니라 이중나선 구조 내부의 틈새나 틈에서도 분해를 개시할 수 있습니다. 중요한 점은, 이 효소가 엄격한 기질 특이성을 나타내어 단일 가닥 또는 이중 가닥 RNA 분자에 대해 검출 가능한 활성을 보이지 않는다는 것입니다. 이러한 특성은 선택적 핵산 처리를 필요로 하는 분자생물학 응용 분야에 특히 유용합니다.
그림 1. T7 엑소뉴클레아제의 효소 활성에 대한 개략적 설명
이러한 독특한 특성 덕분에 T7 엑소뉴클레아제는 원활한 클로닝, 단일 가닥 DNA 템플릿 준비, 무작위 돌연변이 라이브러리 구축, 비고리형 선형 템플릿의 소화를 포함한 분자생물학 연구의 여러 가지 중요한 응용 분야에서 중추적인 역할을 합니다.
고품질 효소에 대한 연구자들의 요구를 충족하기 위해 Yeasen은 새롭게 T7 Exonuclease를 출시했습니다. 이 제품은 강력한 소화 활성을 나타내며, 엄격한 품질 관리를 거쳐 니카아제(nickase) 및 RNase 활성에 오염이 없어 실험 결과의 손상 없이 안정적으로 작동합니다.
Yeasen T7 엑소뉴클레아제(Cat#14272)의 특성 분석
- 우수한 효소 소화 성능
그림 2. Yeasen 및 공급업체 A*의 T7 Exonuclease 제제에서 DNA 소화 및 열 불활성화 특성의 성능 평가
참고: 25°C에서 30분간 반응 조건에서, 10 U의 Supplier A* T7 Exonuclease와 세 배치의 Yeasen T7 Exonuclease의 송아지 흉선 DNA 1 μg에 대한 소화 효율을 비교했습니다. 또한, 75°C에서 20분, 80°C에서 10분간 배양한 후 T7 Exonuclease의 열 불활성화 효율을 평가했습니다. 그 결과, 세 배치의 Yeasen T7 Exonuclease 모두 기질을 효과적으로 소화했으며, 75°C에서 20분, 80°C에서 10분 모두 T7 Exonuclease를 성공적으로 불활성화했습니다.
- 검출 가능한 니카제 또는 RNase 잔류물 없음
그림 3. Yeasen T7 엑소뉴클레아제 제제의 니카아제 및 RNase 잔류 활성 분석
[참고]: T7 엑소뉴클레아제를 각각 핵산 기질과 함께 배양하고, 아가로스 겔 전기영동으로 밴딩 패턴을 분석했습니다. 실험 결과, 세 배치의 Yeasen T7 엑소뉴클레아제 모두에서 잔류 니카아제(100 U) 또는 RNase(10 U) 활성이 검출되지 않았습니다.
주문 정보
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제품명 |
포장 사양 |
카탈로그 번호 |
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T7 엑소뉴클레아제(10 U/μL) |
1000U / 5000U |
14272ES |
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참고문헌
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