説明
細胞がアポトーシスを起こすと、ヌクレオソーム間のゲノムDNAを切断するエンドヌクレアーゼ酵素が活性化されます。アポトーシス中のDNAを抽出した後、電気泳動によって180～200 bpのDNAラダーを検出できます。
TUNEL（TdT mediated dUTP Nick End Labeling）細胞アポトーシスアッセイキット（FITC）は、アポトーシス後期の組織細胞における核DNA切断を検出するために使用できます。その原理は、末端デオキシヌクレオチド転移酵素（TdT）の作用下でDNA切断時に露出するゲノムDNAの3'-ヒドロキシル（3'-OH）末端に、FITC-12-dUTPが挿入されるというものです。これは蛍光顕微鏡またはフローサイトメトリーで検出できます。
このキットは、3'-OH末端へのヌクレオチドの取り込みに最適な比率でFITC-12-dUTPと非標識dNTPを用いることで標識反応を最適化し、同じ切断DNA断片の末端に長い「標識テール」を形成します。この「標識テール」により、隣接するdNTP上の標識基の立体障害が低減し、各切断DNA断片上の蛍光基の数が増加します。また、隣接する蛍光基によって引き起こされる凝集や消光が抑制されるため、検出感度が向上し、非特異的反応が減少します。
このキットは幅広い用途に使用できます。凍結切片やパラフィン切片、培養接着細胞や浮遊細胞におけるアポトーシスの検出に使用できます。
特徴
- このキットに含まれる試薬は、使いやすいように液体の形で提供されます。
- このキットは、フローサイトメトリー、検出用蛍光顕微鏡など、さまざまな目的に使用できます。
- 蛍光顕微鏡で見ると色の区別がはっきりします。
アプリケーション
- このキットはフローサイトメトリーおよび蛍光顕微鏡検査に使用できます。
- このキットは細胞の初期アポトーシスを検出することができます。
- このキットは、後期アポトーシス細胞と壊死細胞を区別することができます。
仕様
| 応用 | このキットの検証済みの用途は、フローサイトメトリーまたは免疫蛍光細胞診によってアポトーシス細胞を検出することでした。 |
| 梱包形態 | ボトル |
コンポーネント
| 成分 | 名前 | 40306ES20 (20T) | 40306ES50 (50T) | 40306ES60（100T） |
| 40306-A | 5×平衡化バッファー | 750μL | 1.25mL×2 | 1.25mL×3 |
| 40306-B | FITC-12-dUTPラベリングミックス | 100μL | 250μL | 250μL×2 |
| 40306-C | 組み換えTdT酵素 | 20μL | 50μL | 50μL×2 |
| 40306-D | プロテイナーゼK（2mg/mL） | 40μL | 100μL | 100μL×2 |
| 40306-E | DNase I（1 U/μL） | 5μL | 12.5μL | 25μL |
| 40306-F | 10 × DNase Iバッファー | 100μL | 250μL | 500μL |
配送と保管
製品はドライアイスと一緒に発送され、-15℃～-25℃で1年間保管可能です。
文書:
引用と参考文献:
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