フィブロネクチン（FN）は細胞外糖タンパク質であり、体液中では可溶性、細胞外マトリックス中では不溶性で存在します。主要な細胞接着分子の一つであるFNは、胚発生、創傷治癒、止血、血栓症など、多くの重要な生理プロセスにおいて重要な役割を果たしています。フィブロネクチンの発現、分解、結合の変化は、癌や線維症を含む多くの病理学的現象と密接に関連しています。

フィブロネクチン（FN）の用途：

1)細胞培養マトリックスとして、細胞の成長を促進し、細胞接着率を高め、細胞代謝レベルを高め、細胞成長時間を短縮し、ハイブリドーマ技術における細胞融合率を高めるなどの機能があります。

2)病気の診断と治療。その機能は、傷の修復と治癒、癌の診断と治療、血管系と心血管および脳血管疾患の治療などです。

本製品は、イネ胚乳細胞由来の組換えヒトフィブロネクチンであり、単量体として存在し、マトリゲル、ラット尾コラーゲン、血液由来フィブロネクチンなどの代替として細胞培養マトリックスとして使用することで、細胞接着率の向上、細胞代謝レベルの向上、細胞増殖周期の短縮を実現します。また、培養培地に直接添加することで、血清の代替または使用量の削減、細胞接着、遊走、移動成長の促進、細胞状態の維持にも役立ちます。

本製品は細胞培養グレードの凍結乾燥粉末であり、バッチ間の差異が小さく、ウイルス感染の潜在的なリスクがないという特徴があります。

製品特性

配送と保管

この製品は-25～-15℃で3年間保管してください。

数字

図 1. フィブロネクチンの HPLC 純度は 95% 以上です。

図2. CHO-K1細胞増殖に対するフィブロネクチンの活性解析

再構成

組換えヒトフィブロネクチン（rFN）を1×PBSに溶解し、濃度1mg/mLの保存溶液を調製します。凍結融解の繰り返しを避けるため、1回分ずつ小分けし、-20℃で保存してください。有効期間は3～6ヶ月です。

使用方法

1. コーティング実験（6ウェルプレートを例にとり、他の培養プレートについては表1を参照）

1.1 適量の組換えヒトフィブロネクチン（rFN）を採取し、滅菌1×PBS（pH 7.2～7.4）で希釈して、最終濃度50～100μg/mLとなるように調製します。混和後、6ウェルプレートに800μL/ウェルずつ添加し、調製液が6ウェルプレートの底面を完全に覆うようにします。

1.2 rFNワーキング溶液が入った6ウェルプレートを4℃で一晩、または37℃で1時間コーティングします。

1.3 6ウェルプレートにワーキング溶液を採取し、4℃で保存します。1週間以内に他の培養ボトル／プレートへのコーティングに使用できます。

1.4 rFN でコーティングした 6 ウェル プレートを取り出し、通常の細胞培養培地を加え、細胞を直接接種します。rFN は細胞の接着と成長を促進します。

1.5 コーティングした6ウェルプレートをしばらく使用しない場合は、密閉容器に入れて4℃で保管してください。1週間以内に使用することをお勧めします。

表1. 各種培養ボトル/プレートにおける推奨rFN添加量

コーティング/プレーティング実験では、以下の表 1 に示すように、培養皿/ボトルのサイズに応じて、組み換えヒトフィブロネクチン (rFN) 作業溶液の添加量を調整する必要があります。

2.細胞培養実験

細胞培養中、rFNを細胞培養培地に直接添加することで、細胞接着、遊走を促進し、細胞の状態を維持することができます。最終濃度の参考範囲は5～50μg/mLです。

注記

1. この製品は研究用途にのみご使用ください。

2.安全のため、白衣と使い捨て手袋を着用して作業してください。