説明
マウス RNase 阻害剤は、ヒト胎盤に存在するリボヌクレアーゼ (RNase) の特異的阻害剤であり、非共有結合的に結合して RNase を不活性化する複合体を形成することで、RNase を特異的に不活性化します。
このキットは、二重抗体サンドイッチ酵素結合免疫吸着法（サンドイッチELISA）の原理を用いて、サンプル中の残留マウスRNaseインヒビターを検出します。まず、マウスRNaseインヒビター標準液と試験サンプルを抗マウスRNaseインヒビターコーティングマイクロタイターストリップ（品番：36707-A）に加え、次に希釈したビオチン標識抗マウスRNaseインヒビター抗体（品番：36707-C）を加え、最後にストレプトアビジン-HRP （品番：36707-D）を加えて、抗体＋抗原＋抗体-ビオチン＋SA-HRP複合体を形成します。その後、 TMB基質（品番：36707-H）を加えます。 複合体を洗浄した後、TMBを複合体に加え、呈色反応を観察します。TMBはHRP酵素の触媒作用により青色に変化し、最終的に酸の存在下で黄色に変化します。色の濃淡はサンプル中のマウスRNase阻害剤の量と正の相関関係にあります。
このキットの検出範囲は2～128 ng/mL、検出下限は1.5 ng/mLです。
特徴
- 高感度:製造過程および最終的な生物学的サンプル中の、わずか1.5 ng/mL のマウス RNase 阻害剤残留物を検出します。
- 精度を保証:マウスRNase 阻害剤の残留物は、 75 % ～ 125 %の回収率で正確に検出できます。
- 特異性: YEASENマウス RNase 阻害剤と併用することで、残留物を正確に検出できます。
- 安定性:ロット間の差は小さく、37℃以下で7日間使用してもキットの特性に影響はありません。
- 簡単なシグナル収集：ビオチン-ストレプトアビジン システムを使用すると、シグナルを安定して拡大できます。
応用
- 生物学的製剤における残留マウスRNase阻害剤試験
- mRNA ワクチンおよび治療薬製造における残留タンパク質検出
- 核酸合成およびin vitro転写（IVT）における精製検証
仕様
|
感度 |
1.5 ng/mL（範囲2～128 ng/mL） |
|
分析時間 |
4時間未満 |
|
アッセイ原理 |
2部位免疫酵素アッセイ |
|
信号増幅 |
ビオチン-ストレプトアビジン系 |
|
検出波長 |
450 nm～630 nm |
コンポーネント
|
コンポーネント番号 |
名前 |
36707ES48 |
36707ES96 |
|
36707-A |
抗マウスRNase阻害剤コーティングマイクロタイターストリップ |
48トン |
96トン |
|
36707-B * |
標準：マウスRNase阻害剤 |
1バイアル |
2バイアル |
|
36707-C |
検出抗体：ビオチン結合抗体 |
60μL |
120μL |
|
36707-D |
ストレプトアビジン-HRP |
20μL |
40μL |
|
36707-E |
希釈バッファー1 |
25mL |
45mL |
|
36707-F |
洗浄バッファー濃縮液（20×） |
25mL |
50mL |
|
36707-G |
希釈バッファー2 |
15mL |
30mL |
|
36707-H |
TMB基質 |
8mL |
15mL |
|
36707-I |
停止ソリューション |
5mL |
10mL |
|
36707-J |
プレートシーラー |
3個ずつ |
5個ずつ |
*標準品（36707-B）は凍結乾燥粉末です。
ストレージ
本製品は2℃～8℃で保管してください。未開封の場合は1年間有効です。
*キットを受け取ったら、すべてのコンポーネントが揃っているかどうかを確認し、対応する状態ですぐに保管してください。
数字
- 精度
A)再現性
|
スパイクサンプル |
アッセイ内 |
||
|
重複 |
平均濃度（ng/mL） |
CV（％） |
|
|
S-64 ng/mL |
10 |
62.538 |
2.2% |
|
S-32 ng/mL |
10 |
33.477 |
6.2% |
|
S-4 ng/mL |
10 |
3.851 |
8.2% |
B)中精度
|
スパイクサンプル |
インターアッセイ |
||
|
重複 |
平均濃度（ng/mL） |
CV（％） |
|
|
S-64 ng/mL |
30 |
63.800 |
3.9% |
|
S-32 ng/mL |
30 |
33.533 |
6.7% |
|
S-4 ng/mL |
30 |
4.028 |
13.2% |
テーブル 1.マウスRNase阻害剤ELISAの精度は上記のように評価された。 スキーム
標準曲線上の3つの濃度で10回の繰り返し試験を実施したところ、すべてのCV%は10 %未満でした（表 1 A）。3ロットのSalt Active UltraNuclease ELISAキットをテストしたところ、 CV%は1.5%未満でした（表 1B ）。
- 正確さ
マウス RNase 阻害剤標準の 3 つの濃度(高、中、低) を mRNA 精製サンプルに等量ずつ加え、高濃度を添加したサンプルは倍数希釈しました。
添加回収率 = 測定値 / (添加標準値 x 50% + 添加検体値 x 50%)
|
サンプル希釈率 |
測定値（ng/mL） |
希釈直線性 |
サンプルスパイク |
測定値（ng/mL） |
回復率 |
|
S+Std1 |
71.493 |
/ |
S+Std1 |
71.493 |
110.3% |
|
2× |
43.571 |
121.9% |
S+Std3 |
20.569 |
122.2% |
|
4× |
22.174 |
101.8% |
S+Std5 |
5.516 |
114.2% |
|
8× |
13.132 |
118.5% |
S |
1.661 |
/ |
|
16× |
6.058 |
92.3% |
/ |
/ |
/ |
テーブル 2.精度の検証
二重希釈サンプル、異なる添加濃度のサンプル、および無添加サンプルにおけるマウス RNase 阻害剤の線形回収率および添加回収率は、80% ～ 125% の範囲でした (表 2)。
文書:
安全データシート
マニュアル
支払いとセキュリティ
お支払い情報は安全に処理されます。 クレジットカードの詳細を保存したり、クレジットカード情報にアクセスすることはありません
問い合わせ
あなたも好きかもしれません
よくある質問
この製品は研究目的のみに使用され、人間や動物の治療や診断に使用することを意図したものではありません。製品とコンテンツは、
特定のアプリケーションでは、追加のサードパーティの知的財産権が必要になる場合があります。