説明
エンドヌクレアーゼVIIIは、N-グリコシラーゼ活性とAP-リアーゼ活性の両方を有するDNA修復酵素です。N-グリコシラーゼ活性は、二本鎖DNAから損傷したピリミジン塩基を遊離させ、脱塩基部位（AP部位）を形成します。次に、AP-リアーゼ活性はAP部位のリン酸ジエステル結合を切断し、5'リン酸と3'リン酸からなるギャップを形成します。エンドヌクレアーゼVIIIが認識して除去する損傷塩基には、尿素、5,6-ジヒドロキシチミン、チミングリコール、5-ヒドロキシ-5-メトキシヒダントイン、ウラシルグリコール、6-ヒドロキシ-5,6-ジヒドロチミジン、メチルヒドロキシプロパノンなどがあります。
特徴
エキソヌクレアーゼ、エンドヌクレアーゼ、RNaseの残留なし
損傷した塩基の高効率除去
アプリケーション
単一細胞ゲル電気泳動（コメットアッセイ）
アルカリ溶出
アルカリによる巻き戻し
仕様
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ソース |
大腸菌 |
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分子重量 |
29 KD a |
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集中 |
10 U/ μL |
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ユニットDの定義 |
1ユニットは、10 µLの全反応系において、1XエンドヌクレアーゼVIII反応緩衝液中の10 pmolの蛍光標識オリゴヌクレオチド二本鎖を含む、1つのAP部位*を含む34 bpオリゴヌクレオチド二本鎖1 pmolを37°Cで1時間以内に切断するために必要な酵素量として定義されます。 |
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不活性化条件 |
75℃で10分間保温する |
コンポーネント
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コンポーネント番号 |
名前 |
14536ES80 |
14536ES90 |
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14536-A |
エンドヌクレアーゼVIII（10 U/μL） |
500 μL |
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14536-B |
エンドヌクレアーゼVIII反応バッファー10個 |
1.5 mL |
1.5 mL |
配送と保管
製品は-2.5℃～-1.5℃で1年間保管してください。
数字
図1. 塩基除去修復効果の比較
注：20 pmolのオリゴヌクレオチドは、それぞれYeasenおよびSupplierAのエンドヌクレアーゼVIIIによって触媒され、20 µLの反応系で5〜40 UのエンドヌクレアーゼVIIIと同等の酵素活性のUDG（Cat#10303ES）を添加し、 3 7 ℃でインキュベートしました。 1時間。アガロースゲル電気泳動の結果、YeasenのエンドヌクレアーゼVIIIとサプライヤーAのエンドヌクレアーゼVIIIの塩基除去効果は一致していることが示された。
文書:
安全データシート
マニュアル
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問い合わせ
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よくある質問
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