説明
エキソヌクレアーゼIは、Exo I遺伝子を発現する遺伝子組換え大腸菌株に由来し、一本鎖DNAを3'末端から5'末端まで分解するエキソヌクレアーゼ活性を示します。デオキシリボヌクレオチド5'-モノリン酸を順次放出することで、5'末端ジヌクレオチドの完全性を維持します。この酵素は主にPCR増幅後のプライマーの分解と除去に利用されます。二本鎖DNAおよびリン酸化またはアセチル化によってブロックされた3'-ヒドロキシル末端を持つDNA鎖に対しては不活性です。
特徴
残留エキソヌクレアーゼ（二本鎖）、エンドヌクレアーゼ、RNaseなし
80℃で15分間処理するだけで不活性化
アプリケーション
サンガーDNAシーケンシングまたはSNP分析の前にPCR反応システムから一本鎖プライマーを除去する
ネストPCR反応システムから一本鎖プライマーを除去する
サンプルから直線状の一本鎖DNAを除去し、二本鎖DNAを残す
仕様
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ソース |
大腸菌 |
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分子量 |
55 KD a |
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集中 |
20 U/μL |
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ユニットDの定義 |
1ユニットは、1XエキソヌクレアーゼI反応緩衝液を含む50μL反応系において、0.17mg/mlの濃度の一本鎖[3H]-DNAから10nmolの酸可溶性ヌクレオチドを37°Cで30分以内に放出するのに必要な酵素量として定義されます。 |
コンポーネント
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コンポーネント番号 |
名前 |
14535 ES 8 0 |
14535 ES 90 |
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14535-A |
エキソヌクレアーゼ 私（ 20U /μL） |
2 50μL |
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14535-B |
10 ×エキソヌクレアーゼ I 反応バッファー |
1mL |
1mL |
配送と保管
本製品は-25～-15 ℃で2年間保管してください。
数字
図1. エキソヌクレアーゼIの一本鎖DNAに対する分解能力
注記：20 μL反応系に、終濃度15 pmol/μLの一本鎖DNA基質を添加した。Yeasen社製およびサプライヤーAのエキソヌクレアーゼIを異なる量（0.63、1.25、2.5、5、10、20 U）で調製し、37°Cで15分間インキュベートした後、80°Cで15分間加熱不活化した。ポリアクリルアミドゲル電気泳動法を用いて一本鎖DNAの分解を検出した。その結果、Yeasen社製エキソヌクレアーゼIはサプライヤーAと同様の一本鎖DNA分解能を有することが示された。
文書:
安全データシート
マニュアル
支払いとセキュリティ
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問い合わせ
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よくある質問
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