説明
Hieff NGS ™ EvoMax RNAライブラリ調製キット(ストランド特異的)は、アクチノマイシンDフリーでストランド特異的なトータルRNAシーケンシングライブラリ調製キットです。IlluminaおよびMGIプラットフォームの両方に対応しています。チューブとシーリングキットの2つの形式で提供されており、自動リキッドハンドリングシステムと手動操作の両方で便利です。
このキットには、RNA断片化、逆転写、鎖特異的二本鎖cDNA合成、ライブラリ増幅のための試薬が含まれています。mRNA精製キットやrRNA除去キットと組み合わせることで、mRNAまたはlncRNAの研究に使用できます。
このキットは逆転写ステップを最適化することで、アクチノマイシンDを使用せずに高い鎖特異性を実現し、ユーザーの安全性を高めています。すべての試薬は厳格な品質管理と機能検証を受けており、ライブラリ調製における最大限の安定性と再現性を保証します。
特徴
- プレミックス試薬:酵素と緩衝液が事前に混合されているため、試薬成分が削減され、準備が簡素化されます。
- 安全で耐光性があり、鎖特異性が向上しています。最適化された逆転写酵素により、取り扱い中に光から保護する必要なく、高い鎖特異性が保証されます。
- すぐに使えるプリロード済みプレート形式:自動化機器とのシームレスな統合を実現するように設計されたプリロード済みプレートにより、簡単に切り離して使用できる操作が可能になり、便利な自動化ワークフローが実現します。
コンポーネント
コンポーネント番号 |
名前 |
12340ES24 |
12340ES96 |
12340ES97 (自動化) |
12340ES98 (皿 )** |
12340-A |
450μL |
2×900μL |
2×1064μL |
8×266μL |
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12340-B |
1番目の反応モジュール2.0 |
192μL |
768μL |
960μL |
8×120μL |
12340-C |
2番目の反応モジュール(dUTP) |
840μL |
3×1120μL |
3×1280μL |
8×480μL |
12340-D |
ライゲーション反応モジュール |
840μL |
3×1120μL |
3×1280μL |
8×480μL |
12340-E |
2×Super CanaceTM IIハイファイミックス |
600μL |
2×1200μL |
2×1360μL |
8×340μL |
* |
プライマーミックス* |
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[注記] : * 記載されているコンポーネントはキットに含まれていません。アダプター一式を使用する場合はプライマーミックスが必要ですが、アダプター一式を使用しない場合はプライマーミックスは不要です。本キットはIlluminaおよびMGIプラットフォームと互換性がありますが、アダプター一式を使用する場合は、IlluminaまたはMGIプラットフォーム用のプライマーミックス(カタログ番号13334 Primer Mix for MGIおよびカタログ番号13335 Primer Mix for Illumina)が別途必要です。
** プレート試薬グループのレイアウトについては次の図を参照してください。

ストレージ
この製品は-25~-15℃で1年間保管してください。
応用
RNA ライブラリの準備、トランスクリプトームプロファイリングおよび遺伝子発現解析、コーディング RNA 研究のための mRNA シーケンシング、lncRNA (長鎖非コーディング RNA) 研究、小分子 RNA シーケンシング (該当する場合)、差次的遺伝子発現解析、RNA バイオマーカーの検出、RNA 変異体および融合の検出。
数字
1.簡素化された製品フォーマット

図 1. EvoMax RNA ライブラリ準備キットの簡略化されたコンポーネント。
2. 柔軟なRNAライブラリ調製:高入力と低入力に対応

図 2. RNA の品質と入力量が異なる動物および植物サンプルのライブラリ収量。
キット(カタログ番号12629)および12341を用いたライブラリ調製。DNA断片化は94℃、7分間。PEアダプター(カタログ番号12327ES)1μM、5μl。ライゲーション後に0.4倍精製、0.7倍/0.1倍サイズセレクション、増幅後に0.8倍精製。インプット量:100 ng(16サイクル)、200 ng(15サイクル)、400 ng(14サイクル)
3.自動化対応

図 3. 96 チャンネル自動化により作成された均一性の高い mRNA および lncRNA ライブラリ。
4.優れたシーケンスデータパフォーマンス

図5. EvoMax RNAライブラリ調製キットを用いたトランスクリプトームシーケンスの性能
トランスクリプトームシーケンシングデータは、遺伝子本体のカバレッジ、挿入DNAの長さの分布、およびサンプルの相関において良好なパフォーマンスを示している。
5.強力な安定性

図 6. リアルタイム安定性: 18 か月の保管後も、パフォーマンスはリファレンス キットと同等のままです。
さまざまな品質のFFPEサンプル用のRNAライブラリ調製
ひどく劣化した FFPE RNA (DV 200 <50%) および低入力サンプルの場合、ライブラリの損失を減らすために、アダプターライゲーション後に二重精製プロトコルを使用することをお勧めします。
異なる品質のFFPEサンプルのピークパターン
FFPE RNAサンプル |
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RIN=2.2; DV200=74% |
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サンプル2 RIN=2.5; DV200=26% |
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サンプル3 RIN=2.5; DV200=11% |
サンプル1. RNAライブラリ調製結果 |
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入力RNA: 500 ng、 ライブラリ増幅:12サイクル、 ライブラリ収量: 717.2ng |
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入力RNA: 500 ng フラグメンテーション:94℃、7分 ライブラリ増幅:13サイクル ライブラリ収量: 437.8 ng |
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入力RNA: 100 ng フラグメンテーション:94℃、7分 二重精製:0.6×; 0.8× ライブラリ増幅:15サイクル ライブラリ収量: 206.8 ng |
サンプル2. RNAライブラリ調製結果 |
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入力RNA: 500 ng フラグメンテーション:85℃、8分 二重精製:0.6×; 0.8× ライブラリ増幅:12サイクル ライブラリ収量: 207 ng |
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入力RNA: 500 ng フラグメンテーション:85℃、8分 精製と選択:0.6×&0.7×/0.15× ライブラリ増幅:13サイクル ライブラリ収量: 98.56 ng |
サンプル3. RNAライブラリ調製結果 |
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入力RNA: 500 ng フラグメンテーション:65℃、8分 二重精製:0.6×; 0.8× ライブラリ増幅:12サイクル ライブラリ収量: 354.2 ng |
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投入量: 500 ng フラグメンテーション:65℃、8分 ライブラリ増幅:13サイクル ライブラリ収量: 172.48 ng |
文書:
安全データシート
12340 _MSDS_HB 250 620 _EN.PDF
マニュアル
支払いとセキュリティ
お支払い情報は安全に処理されます。 クレジットカードの詳細を保存したり、クレジットカード情報にアクセスすることはありません
問い合わせ
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よくある質問
この製品は研究目的のみに使用され、人間や動物の治療や診断に使用することを意図したものではありません。製品とコンテンツは、
特定のアプリケーションでは、追加のサードパーティの知的財産権が必要になる場合があります。