Hieff Clone™ Universal II One Step Cloning Kit は、新しくアップグレードされたクローニング キットです。

慎重に最適化された第2世代2×Hieff Clone™ Universal II Enzyme Premix は、組み換え酵素と組み換え反応に必要なバッファーを独自の組み換えエンハンサーとともに組み合わせ、組み換えクローニングの効率を大幅に向上させます。

このキットは、PCR産物を任意のベクターの任意のサイトにクローニングするように指示することができ、未精製PCR産物、直接回収されたPCR産物、低濃度のゴム回収産物と互換性があり、本製品は結合断片の30％〜70％の相同アームGC含有量を再構成することができます。ベクターは完全に直線化され、直線化ベクター末端の15〜25bpの相同配列が挿入断片の陽性および逆PCRプライマーの5'末端に導入されたため、挿入断片のPCR産物の5'末端と3'末端は、それぞれ直線化ベクターの両端に対応する正確な配列を持ちました。組み換え酵素の作用により、PCR産物と直線化ベクターの組み換え反応は、50℃でわずか5分で完了します。クローニングの陽性率は95％以上に達します。

特徴

シンプル: 1 回の反応で最大 6 個の DNA 断片をクローン化します。

柔軟性: 設計ガイドラインにより、任意のベクトルに組み立てることができます。

効率的: 1 ～ 7 個の断片の連結に効率的です。

アプリケーション

急速な クローニング: 複数の重複した DNA 断片を 1 ステップの 5 ～ 50 分の等温反応でシームレスに連結できます。

誘導クローニング; 部位特異的変異誘発。

仕様

コンポーネント

ストレージ

この製品は-25～-15℃で1年間保管してください。 年。

 数字

形​ 1. 10 ngの低入力単一フラグメントを、6μLの小型システムの非蘇生受容状態で接続しました。 結果、10923ESは競合製品よりも優れた性能を示し、高い接続効率、より多くのコロニー形成、そして100%の陽性率を示した。AB：クローンプレート。キャリア（10 kb）と挿入断片（1 kb）のモル比は1：2であった。C：挿入断片PCRで同定された電気泳動マップ、M：YEASEN 10505ES。

図2. 6つの断片（全長7.6 kb）を11.6 kbプラスミドにクローニングした。10923ESは競合製品よりも優れた性能を示し、コロニー数が多く、陽性率は100%であった。AB：コロニープレート。キャリア断片（11.6 kb）と挿入断片のモル比は1：2であった。C：挿入断片の電気泳動分析。M：YEASEN 10505ES。プラスミドインプット量： 200 ng/20 μL、50℃、50分。

関連引用文献:

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