LZCap AU (3'Acm) はキャップ1類似体です。本製品は5'AU3'を転写開始配列として用い、Cap1転写キャッピングにより天然のキャップ1構造を生成します。従来のキャッピング法で生成されるCap0と比較して、CapAU (3'Acm) によって生成されるキャップ1構造は、SaRNAのin vivoにおける活性と翻訳効率を高めます。

米国特許承認済み。

コンポーネント

製品詳細

LZCap ^® DNAテンプレート設計

LZCap ^® AU(3'Acm)はAG開始配列に適しています。下図に示すように、T7プロモーター（下線部）とそれに続くAG配列は、効果的に転写を開始することができます。

プロトコル

実験に必要な部品を氷上で解凍します。

室温での転写システムを構築するには、以下の反応系を参考にしてください。

修飾N1-Me-pUTPは野生型UTPの代わりに使用できます。修飾N1-Me-pUTPはmRNAの免疫原性を低下させます。Henovcomは修飾ヌクレオチドN1-Me-pUTP（カタログ番号：HN1002）も提供しています。

注記:

1) LZCap ^® AU(3'Acm)は、5'AU 3'開始配列を持つT7プロモーター転写ベクターに適しています。これはベクターの構築時に考慮する必要があります。

2) 実験に使用する試薬、消耗品、容器には RNase 汚染がないこと。

3) 転写には直線化された DNA テンプレートを使用することをお勧めします。

4) 野生型ヌクレオチドの代わりに修飾ヌクレオチドを使用した場合、反応の最終濃度は変化しませんでした。

5) PCR産物を転写開始DNAテンプレートとして使用すると、DNAテンプレートの量を半分に減らすことができます。

調製した反応溶液を混合し、軽く遠心分離した後、37℃で2～3時間インキュベートする。転写産物の長さが100nt未満の場合は、反応時間を4～8時間に延長する。

一般的な安全性プロファイル

ストレージ

この製品は-25～-15℃で2年間保存できます。

予防

1. 安全と健康のため、この製品を操作する際には、実験着や使い捨て手袋などの個人用保護具 (PPE) を着用してください。
2. 研究目的にのみご使用ください。
   

よくある質問

1. LZCap はどのように設計するのですか?

酵素は基質を比較的「特異的に」認識します。そのため、新しいキャップ構造を設計する際には、特許取得のために新たな構造改変が必要となる一方で、天然／既知の構造との類似性を可能な限り維持するよう努めます。天然構造はリボースの3'-OH基を有しており、これは修飾（例えばメチル化）可能です。この考慮に基づき、特許上の新規性を確保するために3'-位に炭素を付加し、続いてOH基の水素結合を模倣するためにNH基を付加し、さらにNH基の塩基性を低下させて水素結合能を高めるためにアセチル基を付加しました。LzCapの活性はメチル化された天然キャップよりも優れていますが、これはおそらく水素結合の増加によるものです。メチル基やメトキシ基と比較して、アセチルアミノ基は基質（キャップ​​）と開始因子（酵素）間のファンデルワールス相互作用を増加させる可能性もあります。

2. アセチルアミノ基は安定していますか？

アセチルアミノ基は既に十分に安定しており、キャップの中で最も安定性の低い7位メチル化部位とリン酸ジエステル結合よりもはるかに安定しています。

LZCap ライセンスの詳細についてはお問い合わせください。

文書:

安全データシート

10685_MSDS_HB250708.pdf

マニュアル