説明
LZCap™ AG(3'Acm)はCap1類似体であり、「ワンポット」プロセスでmRNAを生成するためのキャッピング剤として使用できます。T7ポリメラーゼの作用下で、LZCap™ AG(3'Acm)、NTP、および鋳型DNAを用いた共転写により、5'末端にCap1構造を持つmRNAが生成されます。キャップされたmRNAは細胞内および生体内で直接翻訳・発現できます。in vitro転写、遺伝子編集、ワクチン開発、腫瘍CAR-T療法、タンパク質補充療法、再生医療などの分野で広く使用されています。
LZCap™ AG(3'Acm)は、AGを開始配列とするT7プロモーターを必要とします。LZCap™ AG(3'Acm)は、97%以上のキャップ化mRNAを生成でき、標準反応あたり1μgのDNAテンプレートから最大100～200μgのキャップ化mRNAを生成できます。
仕様
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カタログ番号 |
10684ES60/10684ES80 |
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サイズ |
100μL/1mL |
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分子式 |
C 35 H 48 N 16 O 24 P 4 （遊離酸） |
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分子量 |
1200.75 （遊離酸） |
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集中 |
100 mM |
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純度 |
HPLC ≥90% |
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塩の種類 |
NH 4 + |
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構造 |
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コンポーネント
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名前 |
10684ES60 |
10684ES80 |
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LZCap™ AG(3'Acm) GMPグレード(100 mM) |
100μL |
1mL |
ストレージ
この製品は-25～-15℃で2年間保管してください。
数字
LZCap AG(3'Acm)キャップは、ルシフェラーゼmRNAのキャッピング効率が約97.59%で、T7 RNAポリメラーゼを用いた標準的なin vitro転写（IVT）反応において、1μgのDNAテンプレートから最大200μgのキャップ化mRNAが得られます。LiCl沈殿のみでmRNAの純度は最大99%です。この高いキャッピング効率と収量により、LZCapはタンパク質生産や遺伝子治療など、様々な用途において魅力的な選択肢となります。
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製品 |
キャップAG（3'-OMe-7mG） |
LZCap AG(3'Acm) |
AG（キャッピングなし） |
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mRNA収量（μg） |
164 |
173 |
200 |
図1. RNase Hベースの方法を用いたLZCappedルシフェラーゼmRNAのキャッピング効率のMS分析。キャッピング効率は約97.59%であった。
Q1. 脱キャップ酵素に対するmRNAの安定性は？
LZCap AG(3'Acm)およびLZCap AG M6(3'Acm)を有するmRNAは、脱キャップ酵素（NEB）に対して高い耐性を示します。CapM6(3'-OMe-6mA-7mG)も脱キャップ酵素に対して耐性を示しますが、通常のCap AG(3'-OMe-7mG)は耐性を示さないことが注目されます。
LZCap の親和性が高いため、当社の Hieff™ T7 RNA ポリメラーゼ (カタログ番号: 10628) と併用すると、cap1 アナログの低入力でも完璧なパフォーマンスを発揮します。
Q2. LZCapとeIF4Eの結合親和性はどの程度ですか？
Q3. LZCap AG(3'Acm)キャップmRNAのタンパク質発現はどうでしょうか？
LZCap AG（3'Acm）キャップドルシフェラーゼmRNAの発現は、様々な細胞株*（3T3-L1、Hela、JAWs、HEK293T、Huh7）において、Cap1類似体（3'-OMe-7mG）キャップドmRNAよりも有意に高くなっています。130回の反復実験では、LZCap AG（3'Acm）キャップドルシフェラーゼmRNAの発現は、（3'-OMe-7mG）キャップドmRNAの平均約1.5倍高いことが示されました。マウスでも同様の結果が得られました。タンパク質の発現レベルは、mRNAの配列によって若干異なる場合があります。
Q4. 動物に関する他のデータはありますか？
LZCap AG(3'Acm)またはLZCap AG(3'FMom)キャップの発現効率
GLuc をコードする mRNA は、カニクイザルおよびブタにおいて CapAG (3'-OMe-7mG) キャップされた mRNA と比較して、より高い生体内発現を示します。
Q5. LZCap AGキャップされたmRNAの自然免疫原性はどうですか？
LZCapAG（3'Acm）キャップ付きmRNAは低い自然免疫原性を示します。TLR8、TLR7、IL-1A、およびBは、キャップなしRNAによって誘導される免疫応答において重要な役割を果たします。LZCapped mRNAの免疫原性解析に関するin vivo研究では、キャップなしRNAがマウスにおいて免疫関連因子の転写レベルに有意な変化を引き起こすことが示されました。LZCapおよび3'-OMe-7mGキャップ付きmRNAは、いずれもマウスにおいて、単回RNA刺激投与後に免疫因子の転写レベルが同様に低下しました。 
Q6. 安全性テストは行いましたか？
はい、細胞毒性試験、ヒトポリメラーゼ阻害研究、およびエイムス試験を実施しました。
- 3'-Acm-7mG（CC50＞10000nM）のヌクレオシドモノマーは、293T、Huh7、MRC5、THP1およびU87MG細胞において細胞毒性がほとんどないか全く観察されませんでした。
- ヒト DNA ポリメラーゼ (α、β、γ、およびクレノウ) およびミトコンドリア RNA ポリメラーゼ (hPOLRMT) の活性阻害研究では、3'-Acm-7mG TP はヒト DNA または RNA ポリメラーゼを阻害しないことが示されています。
- 細菌を用いた復帰突然変異試験（エームス試験）は、関連する遺伝子変異を検出するとともに、ほとんどのげっ歯類およびヒトにおける遺伝毒性発がん物質を検出します。エームス試験では、3'-Acm-7mGに遺伝毒性がないことが示されました。
Q7. この製品は特許を取得していますか？
はい。米国で特許を取得しています。
文書:
安全データシート
マニュアル
10684_マニュアル_Ver.EN20250613.pdf
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よくある質問
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