T7 RNAポリメラーゼGMPグレード（250 U/μL）-10625ES
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T7 RNAポリメラーゼGMPグレード（250 U/μL）-10625ES
本製品は、大腸菌を用いた組換えタンパク質発現から得られたバクテリオファージT7 RNAポリメラーゼです。T7プロモーター配列（5'-TAATACGACTCACTATAG*-3'）を介し、二本鎖DNA上で5'→3'方向のRNA合成を触媒し、NTPを基質として利用します。二本鎖の直鎖平滑末端または5'突出末端を有するDNAはT7 RNAポリメラーゼの鋳型として使用できるため、直鎖化プラスミドおよびPCR産物はin vitroでのRNA合成の鋳型として使用できます。 注: G* は RNA 転写の最初の塩基です。 この製品は GMP 規制に従って製造され、液体の形で提供されます。 特徴 長い転写産物と短い転写産物を合成し、DNAテンプレート1μgでRNAを100～200μg生成できる。 高い収量と簡単な操作 エンドトキシンの低下 エンドヌクレアーゼ、エキソヌクレアーゼ、RNaseが存在しないことを確認済み 応用 放射性標識RNAプローブの調製 RNAの構造、プロセシング、触媒作用の研究のためのRNA生成 アンチセンスRNAによる発現制御 mRNA、sgRNAの合成 仕様 ソース 大腸菌で発現 組み換えT7 RNAポリメラーゼ遺伝子 最適温度 37℃ ストレージバッファ 50 mM トリス-HCl、1 mM EDTA、10 mM DTT、100 mM NaCl、0.1% トリトンX-100、50% (v/v) グリセリン、25℃でpH7.9 ユニット定義 37℃、pH8.0の条件下で1時間以内に1nmolの[3H]GMPを酸不溶性沈殿物に取り込むために必要な酵素量を1単位と定義する。 品質 COAアイテム 標準 活動 250～300U/μL タンパク質 集中 ≥0.5mg/mL 純度 ≥95% エンドトキシン <20 EU/mg 残留プロテアーゼ ネガティブ 残留エキソヌクレアーゼ ネガティブ 残留ニッカーゼ ネガティブ 残留RNase ネガティブ E. 大腸菌宿主タンパク質 50ppm未満 大腸菌宿主 DNA <10 fg/U マイコプラズマDNA ネガティブ コンポーネント コンポーネント番号 名前 10625ES10 (10 KU) 10625ES60 (100 KU) 10625ES86 (2,500 KU) 10625ES99（100 MU） 10625 T7 RNAポリメラーゼGMPグレード（250 U/μL） 40μL 400μL...

Frequently Bought Together

T7 RNAポリメラーゼGMPグレード（250 U/μL）-10625ES

YeasenSKU: 10625ES10
サイズ: 10 区
価格:
$140.00
在庫:
在庫あり

本製品は、大腸菌を用いた組換えタンパク質発現から得られたバクテリオファージT7 RNAポリメラーゼです。T7プロモーター配列（5'-TAATACGACTCACTATAG*-3'）を介し、二本鎖DNA上で5'→3'方向のRNA合成を触媒し、NTPを基質として利用します。二本鎖の直鎖平滑末端または5'突出末端を有するDNAはT7 RNAポリメラーゼの鋳型として使用できるため、直鎖化プラスミドおよびPCR産物はin vitroでのRNA合成の鋳型として使用できます。

注: G* は RNA 転写の最初の塩基です。

この製品は GMP 規制に従って製造され、液体の形で提供されます。

特徴

  • 長い転写産物と短い転写産物を合成し、DNAテンプレート1μgでRNAを100～200μg生成できる。
  • 高い収量と簡単な操作
  • エンドトキシンの低下
  • エンドヌクレアーゼ、エキソヌクレアーゼ、RNaseが存在しないことを確認済み

応用

  • 放射性標識RNAプローブの調製
  • RNAの構造、プロセシング、触媒作用の研究のためのRNA生成
  • アンチセンスRNAによる発現制御
  • mRNA、sgRNAの合成

仕様

ソース 大腸菌で発現 組み換えT7 RNAポリメラーゼ遺伝子
最適温度 37℃
ストレージバッファ 50 mM トリス-HCl、1 mM EDTA、10 mM DTT、100 mM NaCl、0.1% トリトンX-100、50% (v/v) グリセリン、25℃でpH7.9
ユニット定義 37℃、pH8.0の条件下で1時間以内に1nmolの[3H]GMPを酸不溶性沈殿物に取り込むために必要な酵素量を1単位と定義する。


品質

COAアイテム 標準
活動 250～300U/μL
タンパク質 集中 ≥0.5mg/mL
純度 ≥95%
エンドトキシン <20 EU/mg
残留プロテアーゼ ネガティブ
残留エキソヌクレアーゼ ネガティブ
残留ニッカーゼ ネガティブ
残留RNase ネガティブ
E. 大腸菌宿主タンパク質 50ppm未満
大腸菌宿主 DNA <10 fg/U
マイコプラズマDNA ネガティブ

コンポーネント

コンポーネント番号 名前 10625ES10 (10 KU) 10625ES60 (100 KU) 10625ES86 (2,500 KU) 10625ES99（100 MU）
10625 T7 RNAポリメラーゼGMPグレード（250 U/μL） 40μL 400μL 10mL 400mL

配送と保管

T7 RNAポリメラーゼGMPグレード製品はドライアイスとともに出荷され、-15℃～-25℃で1年間保管できます。

数字

図 1. 標準 RNA は、T7 RNA 合成キットを使用して in vitro で合成されました。

反応液はPCR装置内で37℃で2時間インキュベートし、その後磁気ビーズ（Cat#12602）で精製した。収量はNanoDrop分光光度計で分析した（図1参照）。

図2. T7キットによる異なる長さのRNAの転写の実証。それぞれ電気泳動図（図2A）、キャピラリー電気泳動図（図2B）、クロマトグラム（図2C）で示されている。

図 3. キャップされた RNA の in vitro 合成。

反応液はPCR装置内で37℃で2時間インキュベートし、その後磁気ビーズ（Cat#12602）で精製した。収量はNanoDrop分光光度計で測定した（図3A参照）。完全性はキャピラリー電気泳動で測定した（図3B参照）。

文書:

安全データシート
マニュアル

10625_マニュアル_HB221111_EN.pdf

引用と参考文献:

Stamatakos, CP, Nguyen, HT, Shekhani, R., Sidhu, G., Maximuck, WJ, Ellington, AD, & Marcotte, EM (2024). in vitro転写の微調整のためのT7プロモーターバリアントのハイスループット最適化.生化学, 63 (18), 2307–2318. https://doi.org/10.1021/acs.biochem.4c00188

Storage

The products are shipped with dry ice and can be stored at -15℃ ~ -25℃ for 1 year.

FAQ

Internal testing demonstrates that our T7 enzyme achieves a relative fidelity comparable to that of Thermo Fisher, with a mutation rate of approximately 4 parts per million (ppm). Overall, the fidelity of our wild-type T7 enzyme meets standard benchmarks and fully satisfies customer requirements. Currently, there are no plans to develop a higher-fidelity variant in the ongoing project.
Yes, measurements were taken post-LiCl purification, and we have recorded the corresponding data. The A260/280 ratio typically ranges between 2.0 and 2.1, which is also consistently achieved when using our carboxyl magnetic beads for purification. Specific dataset details can be compiled and shared upon request.
This phenomenon is an inherent characteristic of the T7 transcription system and cannot be entirely eliminated. According to relevant literature, the primary strategies to control mRNA 3' self-extension include:
1)ptimizing the sequence immediately upstream of the template's 3' end;
2)Controlling the IVT yield, as excessively high transcription levels tend to increase the frequency of self-extension events.

Citations

Documents

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よくある質問

この製品は研究目的のみに使用され、人間や動物の治療や診断に使用することを意図したものではありません。製品とコンテンツは、Yeasen Biotechnology が所有する特許、商標、著作権によって保護されています。商標記号は原産国を示しますが、必ずしもすべての地域で登録されているわけではありません。

特定のアプリケーションでは、追加のサードパーティの知的財産権が必要になる場合があります。

Yeasen は倫理的な科学に専念しており、私たちの研究は安全性と倫理基準を確保しながら重要な問題に取り組むべきだと考えています。