La falloidina è una tossina eptapeptidica ciclica derivata dal fungo del cappuccio della morte (Amanita phalloides). Si lega all'actina filamentosa (F-actina) con elevata affinità (Kd = 20 nM) e non si lega all'actina globulare (G-actina). È comunemente utilizzata per etichettare l'F-actina in sezioni di tessuto, colture cellulari o sistemi acellulari per analisi qualitative e quantitative. I derivati ​​della falloidina si legano anche ai filamenti di actina da fonti sia animali che vegetali, comprese cellule muscolari e non muscolari, con un rapporto stechiometrico di circa una molecola di falloidina per subunità di actina. Il legame non specifico è trascurabile, fornendo una chiara distinzione tra regioni colorate e non colorate. Pertanto, i derivati ​​della falloidina sono particolarmente adatti come sostituti degli anticorpi di actina nella ricerca correlata. Inoltre, i derivati ​​della falloidina sono piccoli, con un diametro di circa 12-15 Å e un peso molecolare inferiore a 2000 Dalton. Molte proprietà fisiologiche dell'actina vengono mantenute, come la capacità di interagire con le proteine ​​leganti l'actina come la miosina, la tropomiosina e la DNasi I. I filamenti marcati con falloidina possono ancora penetrare nelle matrici solide di miosina e le fibre muscolari estratte con glicerolo possono contrarsi dopo la marcatura.

Il legame della falloidina inibisce la depolimerizzazione dell'actina filamentosa (microfilamenti), stabilizzandone la struttura e interrompendo l'equilibrio dinamico di polimerizzazione e depolimerizzazione. Questa proprietà riduce la concentrazione critica (CC) per la polimerizzazione dell'actina a meno di 1 µg/mL, rendendola un potente promotore della polimerizzazione. Inoltre, la falloidina inibisce l'attività di idrolisi dell'ATP dell'F-actina.

Caratteristiche

Si lega selettivamente all'actina filamentosa (F-actina).

La falloidina non è specie-specifica e non presenta praticamente alcuna colorazione aspecifica, fornendo un contrasto estremamente netto tra le aree colorate e quelle non colorate.

È altamente compatibile e non influenza l'attività dell'actina.

Applicazioni

Il legame stretto e selettivo con l'F-actina rivela la distribuzione del citoscheletro microfilamentoso all'interno della cellula.

Specifiche

Componenti

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