टैग एंटीबॉडी परिचय
टैग एंटीबॉडी का उपयोग विभिन्न वाणिज्यिक अभिव्यक्ति वेक्टरों पर टैग अनुक्रमों का पता लगाने और शुद्धिकरण के लिए किया जाता है ताकि लक्ष्य प्रोटीन के अभिव्यक्ति स्तरों और कार्यों का विश्लेषण और निर्धारण किया जा सके। उनके उपयोग के पीछे का सिद्धांत एंटीजन-एंटीबॉडी प्रतिक्रिया है, जहां ये टैग एंटीबॉडी विशेष रूप से संबंधित टैग-फ़्यूज़्ड प्रोटीन से बंध सकते हैं। टैग एंटीबॉडी के साथ उपयोग के लिए उपयुक्त कुछ सामान्य प्रोटीन टैग की एक संक्षिप्त सूची यहां दी गई है:
तालिका 1. विभिन्न प्रोटीन टैग का परिचय
| टैग | अनुक्रम | विशेषताएँ | लागू परिदृश्य |
| झंडा | डीवाईकेडीडीडीके | 1. छोटे आणविक भार, संलयन प्रोटीन के कार्य को नहीं बदलता है, समान टैग की तुलना में अधिक हाइड्रोफिलिक; 2. इसमें एंटरोकाइनेज पहचान स्थल (DDDDK) शामिल है, जो लक्ष्य प्रोटीन के एन-टर्मिनस पर संलयित होने पर टैग हटाने के लिए सुविधाजनक है। | यूकेरियोटिक अभिव्यक्ति प्रणालियों में निम्न-अभिव्यक्ति स्तर संलयन प्रोटीन के शुद्धिकरण और पता लगाने के लिए उपयुक्त। |
| हा | YPYDVPDYA | इन्फ्लूएंजा वायरस के हेमाग्लगुटिनिन सतह प्रतिजन निर्धारक से व्युत्पन्न; एपोप्टोटिक कोशिकाओं से संबंधित प्रयोगों में उपयोग से बचें। | प्रोटीन शुद्धिकरण और पता लगाने के लिए उपयुक्त। |
| माईक | ग्लू-ग्लन-लिस-लेउ-इले-सेर-ग्लू-ग्लू-एस्प-लेउ | मानव प्रोटो-ऑन्कोजीन Myc से व्युत्पन्न; मानव कोशिकाओं से संबंधित प्रयोगों में उपयोग से बचें। | आम तौर पर प्रोटीन शुद्धि के लिए उपयोग नहीं किया जाता है, पता लगाने के लिए उपयुक्त है। |
येसेन टैग एंटीबॉडी एफिनिटी शुद्धिकरण उत्पाद कच्चे माल के रूप में उच्च गुणवत्ता वाले माउस आईजीजी मोनोक्लोनल एंटीबॉडी से बनाए जाते हैं। "सहसंयोजक युग्मन" नामक एक प्रक्रिया के माध्यम से, इन एंटीबॉडी को दिशात्मक रूप से और कुशलता से एगरोज़ मैट्रिसेस या नैनो-चुंबकीय मोतियों की सतहों से जोड़ा जाता है। यह न केवल गैर-विशिष्ट प्रोटीन बंधन को कम करता है बल्कि माध्यम पर उच्च एंटीबॉडी लोड भी प्राप्त करता है। इसके अतिरिक्त, यह विभिन्न शुद्धिकरण आवश्यकताओं के लिए उपयुक्त टैग एंटीबॉडी शुद्धिकरण उत्पाद प्रदान करता है, जिसमें विभिन्न टैग एंटीबॉडी शुद्धिकरण रेजिन और इम्यूनोमैग्नेटिक बीड्स शामिल हैं, जो मैन्युअल या स्वचालित तरीकों का उपयोग करके टैग किए गए प्रोटीन और इम्यूनोप्रीसिपिटेशन प्रयोगों के शुद्धिकरण की सुविधा प्रदान करते हैं।
येसेन टैग एंटीबॉडी शुद्धिकरण उत्पाद चयन गाइड
| उत्पाद श्रृंखला | शुद्धिकरण राल श्रृंखला | इम्यूनोमैग्नेटिक बीड सीरीज | |||||
| उत्पाद संख्या | 20584ईएस | 20586ईएस | 20587ईएस | 20565ईएस | 20566ईएस | 20567ईएस | 20564ईएस |
| प्रोडक्ट का नाम | एंटी-एचए मैगबीड्स | एंटी-माइकमैगबीड्स | |||||
| लाइगैंडों | उच्च गुणवत्ता वाले माउस आईजीजी मोनोक्लोनल एंटीबॉडी | उच्च गुणवत्ता वाले माउस एंटी-जीएफपी/फ्लैग/एचए/माइक मोनोक्लोनल एंटीबॉडी | |||||
| प्रोटीन बंधन क्षमता | ≥1.1 मिलीग्राम फ्लैग-टैग्ड फ्यूजन प्रोटीन/एमएल जेल ≥1.5 मिलीग्राम एचए-टैग्ड फ़्यूज़न प्रोटीन/एमएल जेल ≥0.9 मिलीग्राम माइक-टैग्ड फ्यूज़न प्रोटीन/एमएल जेल | ≥0.8 मिलीग्राम जीएफपी-टैग्ड फ्यूजन प्रोटीन/मिलीग्राम मनका ≥0.6 मिलीग्राम फ्लैग-टैग्ड फ्यूजन प्रोटीन/मिलीग्राम बीड्स ≥0.4 मिलीग्राम एचए-टैग्ड फ्यूजन प्रोटीन/मिलीग्राम बीड्स ≥0.5 मिग्रा माइक-टैग्ड फ्यूजन प्रोटीन/मिग्रा मनका
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| मैट्रिक्स | 4% क्रॉस-लिंक्ड एगरोज़ जेल | सिलिका आधारित चुंबकीय मोती | |||||
| कण आकार | 45-165 µm | 200 एनएम | |||||
| लाभ | कम गैर-विशिष्ट बंधन, उच्च क्षमता | उच्च शुद्धता, उच्च क्षमता, उच्च विशिष्टता, चुंबकीय रैक के साथ सुविधाजनक उपयोग | |||||
| अनुशंसित अनुप्रयोग | किसी भी पैमाने पर टैग किए गए संलयन प्रोटीन की एफिनिटी शुद्धि, इम्यूनोप्रीसिपिटेशन (आईपी) | इम्यूनोप्रीसिपिटेशन (आईपी), को-इम्यूनोप्रीसिपिटेशन (सीओआईपी) | |||||
परीक्षण डेटा
1.येसेन एंटी-फ्लैग एफिनिटी जेल (20584ES) बनाम ब्रांड एस* शुद्धिकरण तुलना परीक्षण।
चित्र 1. येसेन (ए) बनाम ब्रांड एस* (बी) एंटी-फ्लैग जेल तुलना परीक्षण जेल छवि
एम: प्रोटीन मार्कर; 1: फ्लैग-एन, एम, सी प्रोटीन का प्री-कॉलम लाइसेट; 2: फ्लैग-एन, एम, सी प्रोटीन का पोस्ट-कॉलम परमिट; 3: इल्यूशन (पीएच 2.7 इल्यूशन); 4: इल्यूशन (पीएच 12 इल्यूशन)
2. नीचे दिए गए चित्र में तीर लक्ष्य टैग किए गए प्रोटीन को इंगित करते हैं, और चुंबकीय मोतियों को सीधे उबालने के बाद ऊपर से नीचे तक तीन बैंड बीएसए, एंटीबॉडी की भारी श्रृंखला और एंटीबॉडी की हल्की श्रृंखला हैं।
आकृति 2. एंटी-फ्लैग मैगबीड्स फ्लैग-टैग्ड प्रोटीन का शुद्धिकरण
1: फ्लैग-टैग्ड प्रोटीन युक्त ई. कोली लाइसेट 10 μL; 2: चुंबकीय मोतियों के साथ फ्लैग-टैग्ड प्रोटीन युक्त ई. कोली लाइसेट के ऊष्मायन के बाद सुपरनेटेंट 10 μL; 3: एंटी-फ्लैग मैगबीड्स 10 μL के साथ फ्लैग-टैग्ड प्रोटीन का सीधे उबालना; 4: एंटी-फ्लैग मैगबीड्स का सीधे उबालना; 5: मार्कर
3.
आकृति 3. एंटी-जीएफपी मैगबीड्स जीएफपी-टैग्ड प्रोटीन का शुद्धिकरण
1: GFP-टैग प्रोटीन युक्त ई. कोली लाइसेट 10 μL; 2: चुंबकीय मोतियों के साथ GFP-टैग प्रोटीन युक्त ई. कोली लाइसेट के ऊष्मायन के बाद सुपरनेटेंट 10 μL; 3: एंटी-GFP मैगबीड्स 10 μL के साथ GFP-टैग प्रोटीन का प्रत्यक्ष उबाल; 4: एंटी-GFP मैगबीड्स का प्रत्यक्ष उबाल; 5: मार्कर
उत्पाद की जानकारी
| प्रोडक्ट का नाम | उत्पाद संख्या | विनिर्देश |
| 20584ईएस03/08/25 | 1 एमएल/5 एमएल/25 एमएल | |
| 20586ईएस03/08/25 | 1 एमएल/5 एमएल/25 एमएल | |
| 20587ईएस03/08/25 | 1 एमएल/5 एमएल/25 एमएल | |
| 20565ईएस03/08 | 1 एमएल/5 एमएल | |
| एंटी-एचए मैगबीड्स | 20566ईएस03/08 | 1 एमएल/5 एमएल |
| एंटी-माइक मैगबीड्स | 20567ईएस03/08 | 1 एमएल/5 एमएल |
| 20564ईएस03/08 | 1 एमएल/5 एमएल |