Etablierung des DSS -Colitismodells von Dextran -Natriumsulfat (DSS) ulcerosa

2. Vorteile des DSS UC-Modells

👍 1. Die Protokolle sind einfach zu implementieren.

👍 2. Das DSS-UC-Modell ähnelt stark den menschlichen UC-Symptomen und weist eine hohe Wiederholbarkeit auf.

👍 3. Durch die Kontrolle der verabreichten DSS-Dosis können verschiedene charakteristische Symptome hervorgerufen werden, was für das DSS-UC-Modell einzigartig war.

👍 4. Das DSS-UC-Modell kann mit einer Vielzahl weit verbreiteter Modelltiere wie Mäusen, Ratten, Zebrafischen, Schweinen, Fruchtfliegen usw. erstellt werden.

👍 5. Das IBD-induzierte Colitis-assoziierte Krebsmodell (CAC) kann durch die kombinierte Verwendung von Azoxymethan (AOM) erstellt werden.

3. Beispiel für die Konstruktion eines DSS UC-Modells

3.1 Mausmodell(Klicken Sie hier für Details)

1) BALB/c-Mäuse, weiblich, 6–8 Wochen, 25 g;

2) Steriles Trinkwasser mit 3 % DSS und Filter mit 0.22 μm Membran;

3) DSS wurde 7 Tage lang verabreicht;

4) Entzündungen, wie z. B. Dickdarm Ödeme und Stauungen wurden nach der HE-Färbung beobachtet.

Abb. 2 HE-Färbungsergebnisse von DSS-Schnitten zur akuten Kolitis ^[1]

3.2 Zebrafisch-Modell(Klicken Sie hier für Details)

1) Zebrafischembryonen wurden aus natürlichem Laichen gewonnen und bis 1 Tag nach der Befruchtung (dpf) in einem Inkubator bei 28,5 °C in Umwälzwasser (60 μg/ml Instant-Meersalz) aufgezogen und bis zum 1. Tag nach der Befruchtung mit Methylenblau ergänzt;

2) Nach 1 dpf E3-Embryo-Kulturmedium ohne Methylenblau verwenden, um bis 3 dpf zu kultivieren;

3) Bereiten Sie eine 10%ige DSS-Aufbewahrungslösung mit E3-Medium vor;

4) DSS mit Kulturmedium auf die maximale nicht-letale Dosis verdünnen (Referenzkonzentration für DSS: 0,5 %).

5) Die Zebrafische wurden vom 3. bis zum 6. Tag nach der Paarung mit 0,5 % DSS behandelt und die Indizes beobachtet.

Abb. 3 DSS induziert eine Entzündungsreaktion in der Zebrafischleber ^[2]

3.3 Schweinemodell(Klicken Sie hier für Details)

1) Yorkshire-Ferkel im Alter von 4-5 Tage;

2) DSS-Dosis: 1,25 g/kg, orale Einnahme über 5 Tage;

3) Es wurde eine erhöhte D-Mannitol-Aufnahmerate beobachtet.

Abb. 4 Die durch DSS induzierte D-Mannitol-Konzentration bei Ferkeln war höher als in der Kontrollgruppe ^[3]

3.4 Drosophila-Modell(Klicken Sie hier für Details)

1) Drosophila, weiblich, 5-10 Tage;

2) Fütterung Medium wurde mit 5%iger Saccharoselösung, enthaltend 3% DSS und 25 μg/mL, hergestellt Bleomycin;

3) Drosophila wurde drei Tage lang bei 29 °C kultiviert, wobei die Kulturflasche täglich gewechselt wurde.

4) DSS induzierte die Proliferation von ISC-Vorläuferzellen und hatte eine tödliche Wirkung auf Drosophila.

Abb. 5 DSS induziert die Proliferation von ISC-Vorläuferzellen in Drosophila ^[4].

3.5 Kolitis-assoziierter Krebs(Klicken Sie hier für Details)

1) BALB/c-Mäuse, männlich, 7 Wochen alt;

2) Am ersten Tag werden die Mäuse gewogen und markiert. Den Mäusen wird intraperitoneal eine 10 mg/kg AOM-Lösung injiziert.

3) Füllen Sie die Tränke der Mäusekäfige mit Wasser. Rechnen Sie mit 7-10 ml Wasser pro Maus und Tag. Fütterung für eine Woche.

4) Ersetzen Sie das Trinkwasser eine Woche lang durch 2,5 % DSS.

5) Zwei Wochen lang mit normalem Trinkwasser füttern;

6) Wiederholen Sie die Schritte 3–4 dreimal.

Abb. 6 Schematische Darstellung des durch AOM/DSS induzierten CAC ^[5] .

4. Kriterien für die Erfolgsbewertung der Modellierung

4.1 Krankheitsaktivitätsindex (DAI-Score)

Das Modell wurde anhand mehrerer Parameter ausgewertet, darunter Körpergewicht, Stuhlviskosität und okkultes Blut, wodurch der Gesamt-DAI generiert wurde.

Tabelle 2 DAI-Bewertungsregeln

4.2 Histologischer Veränderungsscore

Die Bewertungen der oben genannten Indikatoren basieren auf den histologischen Veränderungen (ohne Lymphknotenbildung) im akuten Kolitis-Modell. Das verwendete HE-Färbereagenz trägt die Kat.-Nr. 60524ES60.

Tabelle 3 Histologischer Veränderungsscore

4.3 Doppelpunkt Länge

Die verkürzte Dickdarmlänge war ein offensichtlicher Phänotyp für das Modell der chronischen Kolitis, während am Tag 8 ähnliche Veränderungen für das Modell der akuten Kolitis festgestellt werden können.

4.4 Zusammenfassung

Für die Verwendung des DSS UC-Tiermodells mit entsprechender Kontrolle werden Vorversuche empfohlen. Mindestanforderungen sind 8–10 Tiere pro Gruppe. Der DAI ist das Kriterium zur Bewertung der Ergebnisse einer Vorstudie.

5. Links zu dieser Ressource

[1]Xiaona Gao, et al. Journal of Nutritional Biochemistry 83 (2020) 108438.
[2]Jing Ma, et al. Aquakultur und Fischerei (2021) 548–557.
[3]Connie J. Kim, et al. Journal of Nutritional Biochemistry 21 (2010) 468–475.
[4]Fangfang Ren et al.PNAS.2010.107 (49) 21064-21069.
[5]Jia-Rong Huang, et al.Frontiers in Pharmacology.2020.11:586885.

6. Erfolgreiches Modellieren mit Yeasen DSS

Erfolgreiche Modelle für akute Colitis werden erstellt mit Yeasen DSS (Kat.-Nr. 60316ES, MW: 36000–50000) in 7 Tagen mit ausgeprägtem Phänotyp, wie in der folgenden Tabelle gezeigt.

Tabelle 4 Konstruktion verschiedener Enteritis-Modelle mit DSS

7. FAQs

Unabhängig vom Modell der akuten oder chronischen DSS-Colitis hängen Schwere und Erfolg der Enteritis von der Mausart (unterschiedlicher genetischer Hintergrund), der DSS-Konzentration und dem Dosierungszyklus ab.

Tabelle 5 Häufige Probleme der DSS-Colitis-Modellierung

8. Produktbestellung:

Heißverkauftes Produkt benötigt nur 1/3 des Preises von M* mit der gleichen Effizienz und wir halten einen großen Lagerbestand vor.

Tabelle 6 Produktreihenfolge

Produktname	Kat.-Nr.	Größe
ColitCareTM Dextransulfat-Natriumsalz (DSS), Colitis-Qualität, MW: 36000–50000	60316ES25	25 g
	60316ES60	100 g
	60316ES76	500 g
	60316ES80	1 kg

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