S-Аденозилметионин (S-Аденозилметионин, SAM) — вспомогательный субстрат, участвующий в реакции переноса метильной группы, который в организме состоит из аденозинтрифосфата и метионина в метионин аденозилтрансферазе под действием синтеза. SAM готовится в растворе 10 мМ HCl, 10% этанола и pH 4 при 25℃. Этот продукт производится в соответствии с требованиями процесса GMP и поставляется в жидкой форме.

Функции

• Проверенные, специфичные для продукта процессы и аналитические методы
• Стабильность конкретного продукта
• Документация соответствует действующим нормам GMP.
• Процесс производства AOF и сырье (TSE и BSE)
• Заявление о нитрозамине
• Имеются нормативные документы поддержки
• Крупномасштабное производство

Приложения

• Процесс ферментативного кэпирования для вакцин и терапевтических средств на основе мРНК
• Ферментативное метилирование биополимеров

Технические характеристики

Номер КАС	485-80-3
Формула	С15ЧАС23Н6О5С+
Молекулярный вес	399,44 г/моль
Чистота (ВЭЖХ)	＞ 90%
Содержание	32 мМ ± 2 мМ
Композиция (1X)	10 мМ HCl, 10% этанола pH 4 при 25℃
Структура

Компоненты

Доставка и хранение

Продукт поставляется с сухим льдом и может храниться при температуре от -15℃ до -25℃ в течение одного года.

Цифры

• Оценка чистоты

Рисунок 1. Чистота (ВЭЖХ) продукта SAM может превышать 98% (рисунок 1A), а оптическая чистота (ee, %) изоформы (S, S)-SAM всегда составляет около 70% (рисунок 1B).

• Определение остаточного содержания фермента

Рисунок 2. Электрофорез в агарозном геле не выявил остатков фермента.

Реакция объемом 20 мкл в буфере, содержащем 500 нг гидролизата Hind III λДНК и 2 мкл S-аденозилметионина (SAM), инкубированная в течение 4 часов при температуре 37ºC, не дает никаких различий по сравнению с контролем (без SAM в реакционной системе) с помощью электрофореза в агарозном геле (рисунок 2A).Реакция объемом 20 мкл в буфере, содержащем 500 нг плазмиды pUC19 и 2 мкл S-аденозилметионина (SAM), инкубированная в течение 4 часов при температуре 37ºC, не дает никаких различий по сравнению с контролем (без SAM в реакционной системе) с помощью электрофореза в агарозном геле (рисунок 2B).

• Функциональный тест и проверка

Рисунок 3 Эффективность посттранскрипционной реакции кэпирования YEASEN может быть близка к 99%.

Реакция объемом 20 мкл в буфере, содержащем 1 мкг λДНК, 1 единицу M. SssI (CpG Methyltransferase) и 160 мкМ S-аденозилметионина (SAM), инкубируется в течение 1 часа при 37 °C. Полученная ДНК устойчива к перевариванию BstUI, что определяется электрофорезом в агарозном геле (рисунок 3A). 10 мкг РНК денатурируют инкубацией при 65 °C в течение 5 минут перед кэпированием. Реакция посттранскрипционного кэпирования объемом 20 мкл ставится на приготовление и инкубируется при 37 °C в течение 2 часов в ПЦР-аппарате. Транскрипты очищаются с помощью магнитных шариков (кат. № 12602). Затем эффективность кэпирования определяется с помощью ЖХ-МС (рисунок 3B).