Detectie, preventie en verwijdering van mycoplasma - alles in één stap!
Mycoplasma
Mycoplasma, ook wel mycoplasma genoemd, is de kleinste en eenvoudigste prokaryoot die tot nu toe is ontdekt, met een diameter van 0,1 tot 0,3 μm. Het kan door filters heen en vertoont een hoog pleomorfisme, dat in verschillende vormen voorkomt, zoals bolvormig, staafvormig, filamenteus en vertakt. In laboratoria en biofarmaceutische productie zijn celculturen gevoelig voor mycoplasma-besmetting. Volgens de literatuur is de incidentie van mycoplasma-besmetting in opgeslagen cellijnen ongeveer 15%-35%, en in de biofarmaceutische industrie varieert het van 0,44%-6,70% [1].
Figuur 1: Morfologie van Mycoplasma
Impact van Mycoplasma-besmetting
Bacteriële en schimmelverontreiniging zijn relatief eenvoudig te detecteren, voorkomen en verwijderen, maar mycoplasmaverontreiniging is moeilijk op te merken. Zelfs bij groeidichtheden zo hoog als 10^7-10^9 CFU/ml zijn er mogelijk geen duidelijke tekenen van verontreiniging (zoals troebelheid of pH-veranderingen). Mycoplasmaverontreiniging kan leiden tot verschillende veranderingen in cellen (zie Afbeelding 2).
Figuur 2: Veranderingen in celtoestanden na besmetting met mycoplasma
Toepassingsscenario's voor mycoplasmadetectie
Typische bronnen van mycoplasma-besmetting
- Kruisbesmetting tussen cellen;
- Verontreiniging van de werkomgeving of experimentele apparatuur;
- Slechte aseptische techniek van de experimentator;
- Verontreiniging van kweekmedia of andere reagentia;
- Besmetting van het oorspronkelijke weefsel of orgaan dat voor de celpreparatie is gebruikt.
Wat te doen wanneer celculturen besmet raken met mycoplasma
Figuur 3: Totale oplossing voor mycoplasma-besmetting
Drie-in-één oplossing voor mycoplasma-besmetting in cellen
1. Mycoplasma-detectie
Eén-staps isotherme mycoplasmadetectie:
Figuur 4: Werkingsproces van eenstaps mycoplasmadetectie
PCR-gebaseerde mycoplasmadetectie:
Figuur 5: Gelelektroforese-afbeelding van PCR-amplificatie van monsters met verschillende mycoplasmaconcentraties
Figuur 6: Gelelektroforese-afbeelding van PCR-amplificatie van monsters met verschillende mycoplasmaconcentraties
Tabel 1: Soorten mycoplasma die detecteerbaar zijn door
Let op: Het blauwe gedeelte geeft de mycoplasmatypen aan die zowel met isotherme detectie in één stap als met PCR-methoden kunnen worden gedetecteerd.
2. MycAway Mycoplasma-eliminatiereagens (1000×)
MycAway Mycoplasma Elimination Reagent (1000×) is een gemengde formulering die mycoplasma effectief elimineert door DNA en essentiële proteïnesynthese te remmen die nodig zijn voor mycoplasmagroei, zonder de cellen te beschadigen. Het redt uw cellen maximaal en vermindert verliezen door mycoplasmaverontreiniging.
Figuur 7: Demonstratie van het cel-eliminatie-effect
Kenmerken van Mycoplasma-eliminatiereagens:
- Lage toxiciteit: Minimale cytotoxiciteit, heeft geen invloed op daaropvolgende celexperimenten zoals celviabiliteitstesten en transfectie;
- Hoge stabiliteit: Kan gedurende langere tijd bij -20°C worden bewaard, terwijl de werkzaamheid behouden blijft;
- Gemakkelijk te gebruiken: Voeg het product eenvoudig toe aan het met mycoplasma besmette kweekmedium en laat het incuberen;
- Snelwerkend: Zichtbare resultaten al na 3 dagen;
- Breed spectrum: Effectief tegen de meeste soorten laboratoriummycoplasma.
Figuur 8: Cytotoxiciteitstestdiagram van Mycoplasma-eliminatiereagens
3. Mycoplasma-preventie
Product Informatie
| categorie | Productnaam | Cat.nr. | Specificaties |
|
Detectie | 40612ES25/60 | 25/100T | |
| MycAway™ Mycoplasma Real-time qPCR Detectie Kit Hot | 40618ES25/60 | 25/100T | |
| 40601ES10/20 | 10/20-testen | ||
|
Verwijdering | MycAway™ Spray (Klaar voor gebruik) | 40605ES02/03 | 1/2×500 ml |
| 40607ES03/08 | 1/5×1 ml | ||
|
Preventie | 40608ES03/08 | 1/5×1 ml | |
| 40609ES60 | 100 ml | ||
| 40610ES60 | 100 ml |