재조합 DNase I (RNase 없음, 효모) (5 U/μL) _ 14549ES

Yeasen제품번호: 14549ES80

크기: 1000유
가격:
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설명

DNase I 또는 Deoxyribonuclease I은 단일 가닥 또는 이중 가닥 DNA를 소화할 수 있는 엔도뉴클레아제입니다.인산디에스테르 결합을 가수분해하여 5'-인산기와 3'-OH기를 함유하는 모노디옥시뉴클레오타이드와 올리고디옥시뉴클레오타이드를 생성합니다.DNase I의 최적 작동 pH 범위는 7-8입니다.DNase I의 활성은 Ca 2+ 에 따라 달라지며 Co 2+ , Mn 2+ , Zn 2+같은 2가 금속 이온에 의해 활성화될 수 있습니다 .Mg 2+ 가 존재할 경우 DNase I은 이중 가닥 DNA의 모든 부위를 무작위로 절단할 수 있습니다.Mn 2+ 가 존재할 경우 DNase I은 DNA 이중 가닥의 같은 부위를 절단하여 1-2개의 뉴클레오타이드가 돌출된 평활 말단이나 점착 말단을 형성하여 다양한 RNA 샘플 처리에 사용할 수 있습니다.

특징

  • 효모의 재조합 DNAse I
  • RNase-free
  • 효소 분해 효율이 높습니다.
  • RNase에 민감한 응용 분야에 더 적합합니다.

응용 프로그램

RNA 샘플에서 오염된 게놈 DNA 제거

전사 반응에서 DNA 템플릿의 분해

RNA 추출이나 역전사 전에 gDNA를 제거합니다.

시험관 내 전사에서 템플릿 DNA 제거.

명세서

카탈로그 번호

14549ES80 / 14549ES90

크기

1000 U / 5000 

단위 정의:

송아지 흉선 DNA를 기질로 사용하고, 25℃, pH 5.0에서, 반응 용액의 260nm에서 흡광도를 1분 이내에 0.001 증가시키는 데 필요한 효소의 양을 1 활성 단위(Kunitz Unit)로 정의합니다.

원천

소 췌장 DNase I에서 복제된 유전자를 운반하는 Pichia 효모 균주

청정

≥95%

반응 조건

37℃, 15~30분

열 불활성화 조건

2.5 mM EDTA 용액을 첨가하고 잘 섞은 후 65℃에서 10분간 배양합니다.

구성 요소

구성품 번호

이름

14549ES80

14549ES90

14549-A

재조합 DNase I (RNase 없음, 효모) (5 U/μL)

200 μL

1mL

14549-B

DNase I 반응 완충액(10×)

1mL

5×1mL

 

배송 및 보관

본 제품은 -25~-15℃에서 2년간 보관하시기 바랍니다.

수치

1. 강력한 소화 활동

 그림 1. 플라스미드 DNA 소화

1μg의 플라스미드 DNA를 Ye easen 과 공급업체 A의 DNase I을 서로 다른 양으로 사용하여 분해했습니다. 그 결과, 14549ES의 플라스미드 DNA 제거 효율이 공급업체 A보다 더 높은 것으로 나타났습니다.

2. RNase 잔류물 없음

그림 2 RNase 잔류물 검증 

그림 2. RNase 잔류물 검출

10 U의 Yeasen 재조합 DNase I(RNase-free, 효모)을 RNA 기질과 함께 37°C에서 1시간 동안 배양했습니다. 아가로스 겔 전기영동 분석 결과, 효소 제제의 세 배치 모두에서 잔류 RNase 활성이 검출되지 않아 RNA 샘플 분해 위험을 완전히 배제했습니다.

3. RNA 추출 응용 검증

그림 3 RNA 추출 응용 검증

그림 3. RNA 추출 응용 검증

20 U의 효소 제제를 사용하여 다양한 출처에서 채취한 마우스 간 전처리 샘플 12개를 처리했습니다. RNA 추출 및 아가로스 겔 전기영동 분석 결과, 효소 처리군의 RNA 무결성이 양호했으며, 이는 이 DNase I이 RNA의 품질에 영향을 미치지 않으면서 DNA를 효과적으로 분해할 수 있으며, RNA 추출 실험의 기술적 요건을 충족함을 시사합니다.


서류:

안전 데이터 시트

1 4549 _MSDS_HB 250514 _KO.PDF

매뉴얼

14549_매뉴얼_ 버전.E N 20250514.pdf


인용 및 참조:

관련 블로그:

DNase I의 비밀 해제 | 효모에서 DNase I을 발현시켜 기존 기술의 병목 현상을 극복하는 방법

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