説明
HEK293 宿主細胞残留 DNA サイズ分析キットは、生物学的製剤の中間体、半製品、最終製品に含まれるさまざまな長さの HEK293 残留 DNA 断片の定量分析用に設計されています。
このキットは、qPCR蛍光プローブの原理を利用し、200塩基対前後のHEK293 DNA残基を特異的かつ迅速に検出します。定量限界は10 fg/μLと極めて低濃度です。また、HEK293 DNAコントロール（DNA定量リファレンス）も含まれています。本キットは、当社の磁気ビーズベースの残留DNAサンプル調製キット（カタログ番号18461ES）と併用できます。
特徴
- 規制への準拠: 製品は Chp、USP、ICH などの要件に従って完全に検証されており、その性能は中国および海外の規制と標準に準拠しています。
- 品質保証：キットの原材料はすべて自社開発しており、qPCR ミックスおよびその他の酵素製品は超クリーンな酵素工場で生産されています。
- 高感度：定量限界は10 fg/μL レベルに達します。
- 高精度: バッチ内再現性が高く、バッチ間変動が低い。
- 強力な排他性:他の外因性ゲノム DNA からの干渉なしにHEK293細胞内の残留 DNA を特異的に検出します。
- 強力な抗干渉：UDG酵素を添加し、日常的な製品のエアロゾル汚染を分解し、非特異的増幅を防止します。
応用
生物学的製品中の残留HEK293宿主細胞DNAサイズ試験。
仕様
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感度 |
10 fg/μL（範囲30 fg/μL～300 pg/μL） |
|
分析時間 |
約1.5時間 |
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アッセイ原理 |
蛍光プローブqPCR法 |
|
必要な楽器 |
リアルタイム蛍光定量PCRシステム |
コンポーネント
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コンポーネント番号 |
名前 |
41316 ES 70-EN |
41316 ES 74-EN |
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41316-A |
HEK293 qPCRミックス |
0.75mL × 4 |
1.5mL × 4 |
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41316-B1 |
HEK293プライマー＆プローブミックス-82 |
250μL |
500μL |
|
41316-B2 |
HEK293プライマー＆プローブミックス-133 |
250μL |
500μL |
|
41316-B3 |
HEK293プライマー＆プローブミックス-227 |
250μL |
500μL |
|
41316-B4 |
HEK293プライマー＆プローブミックス-515 |
250μL |
500μL |
|
41316-C |
DNA希釈バッファー |
1.8mL × 2 |
1.8mL × 4 |
|
41316-D |
HEK293 DNAコントロール（ 30 ng/μL ) |
25μL |
50μL |
ストレージ
この製品は-25～-15℃で2年間保管してください。
41316 -A と41316 -B 1&B2&B3&B4はすべて光から保護して保管する必要があります。
数字
- 定量限界
82bp、133bp、227bp、515bpの4つの断片に対応するプライマープローブを用いて、それぞれ30fg/μL、20fg/μL、10fg/μL（0.01pg/μL）の濃度でHEK293 DNAを検出し、各濃度で10回繰り返した。その結果、10fg/μL（0.01pg/μL）以上の濃度では、4つの断片のCVは20%未満であり、逆算した比率はすべて70%から130%の間であった。したがって、HEK293残留DNA断片化分析キットの4つの断片の定量限界はすべて10fg/μL（0.01pg/μL）であった。
|
繰り返し回数 繰り返し次数
テスト項目 |
HEK293 DNA (fg /μL ) |
|||||||
|
82bp |
133bp |
227bp |
515bp |
|||||
|
量 |
返品率 |
量 |
返品率 |
量 |
返品率 |
量 |
返品率 |
|
|
1 |
0.011 |
110% |
0.009 |
90% |
0.010 |
95% |
0.009 |
88% |
|
2 |
0.009 |
91% |
0.009 |
93% |
0.009 |
86% |
0.009 |
93% |
|
3 |
0.011 |
107% |
0.009 |
95% |
0.009 |
87% |
0.009 |
88% |
|
4 |
0.011 |
112% |
0.010 |
97% |
0.009 |
92% |
0.009 |
93% |
|
5 |
0.011 |
108% |
0.010 |
95% |
0.009 |
87% |
0.010 |
99% |
|
6 |
0.009 |
94% |
0.010 |
102% |
0.009 |
90% |
0.010 |
98% |
|
7 |
0.010 |
97% |
0.009 |
93% |
0.009 |
87% |
0.009 |
87% |
|
8 |
0.010 |
100% |
0.011 |
111% |
0.010 |
101% |
0.009 |
91% |
|
9 |
0.010 |
102% |
0.010 |
102% |
0.008 |
83% |
0.009 |
94% |
|
10 |
0.010 |
100% |
0.009 |
90% |
0.008 |
84% |
0.010 |
101% |
|
平均値 |
0.010 |
\ |
0.010 |
\ |
0.090 |
\ |
0.008 |
\ |
|
CV% |
7% |
\ |
7% |
\ |
8% |
\ |
14% |
\ |
表1. 82bp、133bp、227bp、515bpの4つの断片の定量限界（LOQ）検出結果
文書:
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