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リボヌクレアーゼR（RNase R） 大腸菌はマグネシウム依存性の3′→5′エキソリボヌクレアーゼであり、 すべての線状 RNA を消化できますが、ラリアットまたは環状 RNA 構造は消化できません。tRNA、5S RNA、イントロン ラリアットを除き、ほとんどの細胞 RNA は RNase R によって完全に消化されます。RNase R は、生物学的サンプル内の circRNA の濃縮、イントロン ラリアット配列の識別、エクソン circRNA の識別、選択的スプライシングの研究に使用されます。
特徴
ISO 13485 認証により有効性と品質が保証されています。
一括またはカスタマイズされた構成でご利用いただけます。
ラリアットループと環状 RNA を保存しながら、線状 RNA を効果的に分解します。
線状 RNA を選択的に消化すると、タンパク質生成やイントロン cDNA ライブラリ構築のための環状 RNA の分離が向上します。
GMPグレードのRNAse Rを提供（ 14615 ）
仕様
| ソース | 大腸菌由来のRNAse R遺伝子を組み込んだ組み換え大腸菌株 |
| 最適温度 | 37℃ |
| ストレージ バッファ | 50 mM トリス-HCl、100 mM NaCl、0.1 mM EDTA、0.1% トリトン® X-100、1 mM DTT、50% グリセロール、25℃で pH7.5 |
| ユニットの定義 | 1 ユニットは、20 mM Tris-HCl (pH 8.0)、100 mM KCl、0.1 mM MgCl 2中、37°C で 10 分以内に 1 μg のポリ r(A) を酸可溶性ヌクレオチドに変換します。 |
応用
RNase R は、環状 RNA 合成 (circRNA) の基本成分として機能します。circRNA は、医薬品の安定性と生体安定性を高めることが期待されています。circRNA は、共有結合で閉じた構造のため、RNA エキソヌクレアーゼに耐性があります。[1,2] RNase R は、選択的スプライシング、イントロン cDNA の生成、スプライシング中間体とラリアットの分離など、さまざまな研究で広く応用されています。
コンポーネント
|
コンポーネント番号 |
名前 |
14606ES72 |
14606ES86 |
14606ES92 |
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14606-A |
RNase R (20 U/μL) |
12.5μL |
125μL |
500μL |
|
14606-B |
10×RNase R反応バッファー |
250μL |
3 × 1mL |
10mL |
ストレージ
この製品は-25〜-15℃で2年間保存する必要があります。
説明書
滅菌マイクロ遠心管に以下の反応系を準備する
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成分 |
音量 |
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10×RNase R反応バッファー |
2 μL |
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RNAサンプル |
1 μg |
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RNase R (20 U/μL) |
2-4 ユー |
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RNaseフリーddH 2 O |
最大20 μL |
37℃で10～30分間インキュベートします。
数字
図 1: 線状 RNA 分子は Yeasen RNAse R によって消化できます。
図 2: CircRNA は Yeasen RNAse R では消化できません。
注記
- RNase Rの活性には0.1～1.0 mM Mg 2+が必要です。
- RNA の増加に伴い、反応時間を延長し、酵素量を適切に増加させることができます。
- RNA サンプル中の EDTA 含有量は RNase R の活性に影響を与える可能性があります。
- 70℃で10分間インキュベートすると酵素を不活性化することができます。
参照
- Qu L、Yi Z、Shen Y 他SARS-CoV-2 および新たな変異株に対する環状 RNA ワクチン。細胞。 2022;185(10):1728-1744.e16。 doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
- Chen L、Wang C、Sun H、et al。circRNAの発見と分析のためのバイオインフォマティクスツールボックス。Brief Bioinform。2021;22(2):1706-1728。doi:10.1093/bib/bbaa001
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