説明
DNase I(デオキシリボヌクレアーゼI)は、一本鎖または二本鎖DNAを消化できるエンドヌクレアーゼです。リン酸ジエステル結合を加水分解して、5'-リン酸基と3'-OH基を含むモノデオキシヌクレオチドとオリゴデオキシヌクレオチドを生成します。DNase Iの最適作用pH範囲は7~8です。DNase Iの活性はCa 2+に依存し、Co 2+ 、Mn 2+ 、Zn 2+などの二価金属イオンによって活性化されます。Mg 2+存在下では、DNase Iは二本鎖DNAの任意の部位をランダムに切断できます。Mn 2+存在下では、DNase IはDNA二本鎖を同じ部位で切断し、1~2ヌクレオチドが突出した平滑末端または粘着末端を形成します。これは、さまざまなRNAサンプルの処理に使用できます。
特徴
- 酵母由来の組み換えDNAse I
- RNaseフリー
- 高い酵素切断効率。
- RNase に敏感なアプリケーションに適しています。
アプリケーション
RNAサンプルから汚染ゲノムDNAを除去する
転写反応におけるDNAテンプレートの分解
RNA 抽出または逆転写の前に gDNA を除去します。
インビトロ転写におけるテンプレート DNA の除去。
仕様
カタログ番号。 |
14549ES80 / 14549ES90 |
サイズ |
1000 U / 5000 あなた |
ユニットの定義: |
子牛胸腺DNAを基質として、25℃、pH5.0において、反応溶液の260 nmの吸光度を1分以内に0.001増加させるために必要な酵素量を1活性単位(Kunitz単位)と定義する。 |
ソース |
ウシ膵臓DNase Iからクローン化された遺伝子を有するピキア酵母株 |
純度 |
≥95% |
反応条件 |
37℃、15~30分 |
加熱不活化条件 |
2.5 mM EDTA溶液を加えてよく混ぜ、65℃で10分間インキュベートする。 |
コンポーネント
コンポーネント番号 |
名前 |
14549ES80 |
14549ES90 |
組換えDNase I(RNaseフリー、酵母)(5 U/μL) |
200μL |
1mL |
|
14549-B |
DNase I反応バッファー(10×) |
1mL |
5×1mL |
配送と保管
この製品は-25~-15℃で2年間保管してください。
数字
1.強力な消化活動

図1. プラスミドDNAの消化
1 μg のプラスミド DNA を、Y easenとサプライヤー A の異なる量の DNase I を使用して消化しました。結果から、14549ES のプラスミド DNA 除去効率はサプライヤー A のものより優れていることが示されました。
2. RNase残基なし

図2. RNase残基検出
Yeasen組換えDNase I(RNaseフリー、酵母由来)10単位をRNA基質と37℃で1時間インキュベートした。アガロースゲル電気泳動分析の結果、酵素調製物の3バッチにおいて残留RNase活性は検出されず、RNAサンプルの劣化リスクは完全に排除された。
3. RNA抽出アプリケーションの検証

図3. RNA抽出アプリケーションの検証
20 Uの酵素製剤を使用して、異なる起源のマウス肝臓の前処理サンプル12個を処理しました。RNA抽出およびアガロースゲル電気泳動分析の結果、酵素処理群のRNAの完全性は良好であることが示され、このDNase IはRNAの品質に影響を与えることなくDNAを効果的に消化でき、RNA抽出実験の技術要件を完全に満たしていることがわかりました。
文書:
安全データシート
1 4549 _MSDS_HB 250514 _EN.PDF
マニュアル
14549_マニュアル_Ver.EN 20250514.pdf
引用と参考文献:
関連ブログ:
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よくある質問
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