2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR マスター ミックス (染料付き) は、Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA ポリメラーゼ、dNTP、および最適化されたバッファー システムを含む、すぐに使用できる 2× プレミックス ソリューションです。このバッファー システムには、あらかじめ添加された電気泳動インジケーターが含まれています。プレミックスにはあらかじめ添加された電気泳動インジケーターが含まれており、PCR 産物は直接電気泳動でき、増幅産物はフラット エンドです。2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR マスター ミックス (染料付き) には、迅速で簡単、高感度、高特異性、優れた安定性などの利点があり、プライマーとテンプレートのみで反応システムを追加できます。さらに、この製品には特定の保護剤も含まれているため、プレミックスは繰り返し凍結融解した後でも安定した活性を維持できます。
超高忠実度：変異を起こしやすい高GC遺伝子におけるミスマッチ率が低い。
高速: スピードは 5秒/kb;
幅広い適用性: GC 含有量が 20～80% の遺伝子を増幅するのに使用でき、20% の血液およびマウス溶解物にも耐えます。
優れた安定性： 37°C で 7 日間保管しても性能に影響はありません。
使い方は簡単: 増幅用のプライマーとテンプレートを追加し、直接電気泳動用の青色ローディング染料を加えるだけです。
仕様
| カタログ番号 | 10164ES01 | 10164ES03 | 10164ES08 |
| サイズ | 250μL | 1mL | 5×1mL |
数字
図: Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA ポリメラーゼは、他のブランドの製品と比較して高い忠実性を備えています (A)。このアッセイは、さまざまな種のゲノムから増幅された 6 つの GC リッチ (約 80%) セグメントの PCR 産物の変異頻度を調べることによって行われました。Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA ポリメラーゼによって増幅された PCR 産物はベクターにクローン化され、各シーケンスに対して選択された 100 個の単一クローンがサンガー シーケンスにかけられました。
Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA ポリメラーゼは、増幅速度が速く (B)、GC 増幅適合性が高く (C)、血液耐性があります (D)。顧客の PCR およびシーケンシングの結果から、Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA ポリメラーゼは PCR 収量と特異性において優れた性能を発揮することが示されています (EH)。
ストレージ
この製品は-25〜-15℃で1年間保存する必要があります。
説明書
- 推奨されるPCR反応システム。
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コンポーネント |
容量（μL） |
最終濃度 |
|
2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR マスターミックス（染料入り）* |
25 |
1× |
|
テンプレート** |
x |
- |
|
フォワードプライマー（10 μmol/L）*** |
2 |
0.4μmol/L |
|
リバースプライマー（10 μmol/L） |
2 |
0.4μmol/L |
|
ddH2O |
最大50 |
- |
表1 PCR反応システム
*2 mM Mg2+および200 μM dNTPを含む1×プレミックス。
**推奨範囲は 10 ～ 200 ng、cDNA サンプルのアップロード容量範囲は反応システムの 1/10 以下、推奨範囲は 1 ～ 2.5 μL です。
***PCR 反応システムにおける最終プライマー濃度は 0.2 ～ 1 μM の範囲で、0.4 μM が推奨されます。
- 反応プログラム。
|
サイクルステップ |
温度。 |
時間 |
サイクル |
|
初期変性 |
98℃ |
30秒 |
1 |
|
変性 |
98℃ |
10秒 |
30-35 |
|
アニーリング* |
60℃ |
5秒 |
|
|
拡大** |
72℃ |
5～10秒/kb |
|
|
最終延長 |
72℃ |
2分 |
1 |
表2 PCR反応プログラム
*推奨温度: 60°C。プライマーのアニーリングに最適な温度を見つけるために温度勾配を設定できます。推奨されるアニーリング時間は 5 秒に設定されており、5 ～ 30 秒の範囲で調整できます。アニーリング時間が長すぎると、ゲル上で増幅産物が拡散する可能性があります。
**延長時間: 5 秒/kb を推奨しますが、必要に応じて 10 秒/kb まで延長することもできます。
注記
- この製品は研究目的にのみご使用いただけます。
- 安全のため、白衣と使い捨て手袋を着用して作業してください。
ドキュメント:
10164ES-Ver. 20230720.pdf
引用と参考文献:
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FAQ
(2) If the RNA sample is small or if you need to obtain a very long target fragment, it is recommended not to perform digestion during reverse transcription. The longer the target fragment, the more RNA needs to be input, and accordingly, more cDNA will be required.
(2) For animal genomes, after product performance testing, the minimum detectable amount is 100pg of animal genome.
(3) For plasmids, since they are relatively pure, after product performance testing, the minimum detectable amount is 1pg of plasmid.
(1)The thawing requirements for 10166ES stipulate that it should be thawed slowly on ice, and it cannot be thawed at room temperature or through heating.
(2) When performing the amplification process, it is recommended to set the temperature at 68℃ and the amplification speed at 10 seconds per kilobase.
(3) The longer the target fragment to be amplified is, the more template should be used.
(4) In the PCR system, the concentration of primers is too low or the number of cycles is insufficient: appropriately increase the amount of primers, or increase the number of amplification cycles;
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この製品は研究目的のみに使用され、人間や動物の治療や診断に使用することを意図したものではありません。製品とコンテンツは、
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