Negli ultimi anni, con il rapido sviluppo dei biofarmaci e l'emergere di terapie cellulari e geniche, nonché di vaccini mRNA durante la pandemia, garantire la sicurezza e l'affidabilità dei prodotti biologici è diventato un obiettivo chiave e una priorità normativa per governi e organismi di regolamentazione in tutto il mondo. Il micoplasma è un tipo di contaminazione comune ma spesso difficile da eliminare. Per i bioprocessi che coinvolgono la coltura cellulare, le normative richiedono che "non ci debba essere contaminazione da micoplasma".
Punti per i test sul micoplasma richiesti dagli enti normativi
2.1 Reattività crociata:
Sono stati selezionati DNA da 14 ceppi di phyla non flexibatterici e 6 cellule ingegnerizzate comunemente utilizzate in biomedicina, e nessuno dei canali target ha raggiunto il picco e il riferimento interno è stato amplificato normalmente.
| Test Sspecie | |
| Stafilococco epidermide | Pseudoife |
| Clostridium perfringens | Salmonella enterica Enteritidis subsp. enterica |
| Clostridium acetobutylicum | Bacillus subtilis (bacillus subtilis) |
| Acinetobacter baumannii (batteri immobili) | Bacillus cereus |
| Lattobacillo acidofilo | HEK293 |
| Enterobacter aerogenes (classe tassonomica di batteri) | Vero |
| Micrococco garcinia | CHO |
| streptococco mutante | Escherichia coli |
| Pseudomonas aeruginosa | Modello HEK293T |
| Streptococco pneumoniae | Sf9 |
2.2 Alcuni dei dati sono i seguenti:
- Devocazione Limitare
L'estrazione dell'acido nucleico e il rilevamento dei ceppi standard di Mycoplasma da 10 CFU/mL sono stati eseguiti secondo le istruzioni dei ceppi standard e dei kit di estrazione e rilevamento.
I campioni NCS e NTC sono stati testati contemporaneamente in ciascun esperimento e i risultati di 24 pozzetti replicati di campioni da 10 CFU/mL di ciascun ceppo hanno soddisfatto il requisito che ≥23 dei 24 test fossero positivi quando i risultati NCS e NTC erano soddisfacenti.
Tabella 1 Informazioni sui ceppi convalidati
| Numero di serie | Nome del micoplasma | Concentrazione del liquido batterico |
| 1 | Mycoplasma arginino | 10 UFC/mL |
| 2 | Mycoplasma orale | 10 UFC/mL |
| 3 | Micoplasma gallisepticum | 10 UFC/mL |
| 4 | Micoplasma pneumoniae | 10 UFC/mL |
| 5 | Mycoplasma sinoviale | 10 UFC/mL |
| 6 | Mycoplasma fermentano | 10 UFC/mL |
| 7 | Micoplasma hyorhinis | 10 UFC/mL |
| 8 | Acoleplasma Laylawii | 10 UFC/mL |
| 9 | Spiroplasma citri | 10 UFC/mL |
| 10 | Micoplasma salivario | 10 UFC/mL |
Tabella 2 Risultati del limite di rilevamento
| 10 UFC/mL | Esperimento 1 | Esperimento 2 | Esperimento 3 |
| Tasso di rilevamento | 8/8 | 8/8 | 8/8 |
| Totale | 24/24 | ||
Informazioni sul prodotto
| Prodotto | Numero di catalogo | Nome del prodotto | specifiche del prodotto |
| Kit di pretrattamento del campione | 18461ES | Kit di preparazione del campione di DNA residuo magnetico MolPure® | 25T/100T |
| 18467ES | Kit di preparazione del campione MolPure® Mag48 FN | 3×16T/ 6×16T | |
| Nucleico strumento di estrazione dell'acido | 80511ES | Estrattore automatico di acidi nucleici a 48 canali | 48 Canale |
| Kit di rilevamento del micoplasma | 40619ES | Kit di rilevamento qPCR in tempo reale del micoplasma MycAway® (2G) | 25T/100T |