Beschreibung
Der B-Zell-aktivierende Faktor (BAFF) gehört zur TNF-Liganden-Superfamilie und wird als TNFSF13B bezeichnet. BAFF wird von Makrophagen, dendritischen Zellen und T-Lymphozyten produziert, fördert das Überleben von B-Zellen und ist für die B-Zell-Reifung essentiell (1-4). BAFF bindet an drei Mitglieder der TNF-Rezeptor-Superfamilie: B-Zell-Reifungsantigen (BCMA/TNFRSF17), Transmembranaktivator und Calciummodulator sowie Cyclophilin-Liganden-Interaktor (TACI/TNFRSF13B) und BAFF-Rezeptor (BAFF R/BR3/TNFRSF13C). Diese Rezeptoren sind Typ-III-Transmembranproteine, denen ein Signalpeptid fehlt. Während TACI und BCMA BAFF und einen weiteren Liganden der TNF-Superfamilie, APRIL (einen proliferationsinduzierenden Liganden), binden, bindet BAFF R selektiv BAFF. Der extrazellulären Domäne von BAFF R fehlt das TNF Rezeptor kanonische Cystein-reiche Domäne (CRD) und enthält nur eine partielle CRD mit vier Cysteinresten. Menschlicher und Maus-BAFF R weisen eine Sequenzidentität von 56 % auf. BAFF R wird stark in Milz, Lymphknoten und ruhendem B exprimiert Zellen. Es wird auch in niedrigeren Konzentrationen in aktivierten B-Zellen, in ruhenden CD4+ T Zellen, im Thymus und in peripheren Blutleukozyten.
Technische Daten
Synonyme | CD268; BAFFR; BR3; TNFRSF13C; BROMIX; CVID4; Prolixin |
Uniprot-Nr. | |
Quelle | Rekombinantes humanes BAFFR/TNFRSF13C-Protein wird exprimiert von HEK293-Zellen mit His-Tag am C-Terminus. Es enthält Ser7-Ala71. |
Molekulargewicht | Das Protein hat ein geschätztes Molekulargewicht von 7,6 kDa. Aufgrund der Glykosylierung migriert das Protein basierend auf dem Tris-Bis-PAGE-Ergebnis in den Bereich von 13–25 kDa. |
Aussehen | Steril gefiltertes, weißes, gefriergetrocknetes Pulver. |
Reinheit | > 95 % bestimmt durch SDS-PAGE |
Aktivität | 1.ELISA-Daten: Immobilisiertes humanes BAFFR, His-Tag bei 0,5 μg/ml (100 μl/Well). Dosis-Wirkungs-Kurve für humanen BAFFR-Antikörper, hFc-Tag mit EC50 von 6,0 ng/ml, bestimmt durch ELISA. 2.ELISA-Daten: Immobilisiertes humanes BAFF (Trimer), hFc-Tag mit 5 μg/ml (100 μl/Well) auf der Platte. Dosis-Wirkungs-Kurve für humanes BAFFR, His-Tag mit EC50 von 2,3 μg/ml, bestimmt durch ELISA. 3.SPR-Daten: Menschliches BAFFR, His-Tag, das über Anti-His-Antikörper auf dem CM5-Chip erfasst wurde, kann menschliches BAFF-Trimer, hFc-Flag-Tag, mit einer Affinitätskonstante von 1,21 nM binden, wie im SPR-Test (Biacore T200) bestimmt. |
Endotoxin | < 1.0 EU pro 1μg Die Protein durch Die LAL-Methode. |
Formulierung | Lyophilisiert von 0,22 μm gefilterte Lösung in PBS (pH 7,4). Normalerweise Vor der Gefriertrocknung werden 5 % Trehalose als Schutzmittel hinzugefügt. |
Rekonstitution | Zentrifugieren Sie die Röhrchen vor dem Öffnen. Rekonstitution auf eine Konzentration von mehr als 100 μg/ml wird empfohlen (normalerweise verwenden wir 1 mg/ml Lösung zur Lyophilisierung). Lösen Sie das lyophilisierte Protein in destilliertem Wasser. |
Lagerung
Transport mit Kühlakkus. Lagerung bei -20 °C bis -80 °C, ein Jahr haltbar.
Nach der Rekonstitution ungeöffnet 3 bis 6 Monate bei -20 bis -80 °C lagern. Nach der Rekonstitution 2 bis 7 Tage bei 2 bis 8 °C lagern.
Es wird empfohlen, in Aliquots aufzubewahren und vor dem ersten Gebrauch einzufrieren, um wiederholtes Einfrieren und Auftauen zu vermeiden.
Notiz
1. Vermeiden Sie wiederholtes Einfrieren und Auftauen.
2. Tragen Sie zu Ihrer Sicherheit und Gesundheit bei der Arbeit einen Laborkittel und Einweghandschuhe.
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