Phalloidin ist ein zyklisches Heptapeptidtoxin aus dem Grünen Knollenblätterpilz (Amanita phalloides). Es bindet mit hoher Affinität (Kd = 20 nM) an filamentöses Aktin (F-Aktin), nicht jedoch an globuläres Aktin (G-Aktin). Es wird häufig zur Markierung von F-Aktin in Gewebeschnitten, Zellkulturen oder zellfreien Systemen für qualitative und quantitative Analysen verwendet. Phalloidinderivate binden zudem an Aktinfilamente tierischen und pflanzlichen Ursprungs, einschließlich Muskel- und Nicht-Muskelzellen, in einem stöchiometrischen Verhältnis von etwa einem Phalloidinmolekül pro Aktinuntereinheit. Die unspezifische Bindung ist vernachlässigbar, sodass gefärbte und ungefärbte Bereiche klar voneinander unterschieden werden können. Daher eignen sich Phalloidinderivate besonders gut als Ersatz für Aktin-Antikörper in verwandten Forschungsgebieten. Darüber hinaus sind Phalloidinderivate klein, mit einem Durchmesser von etwa 12–15 Å und einem Molekulargewicht von weniger als 2000 Dalton. Viele physiologische Eigenschaften von Aktin bleiben erhalten, wie beispielsweise die Fähigkeit zur Interaktion mit Aktin-bindenden Proteinen wie Myosin, Tropomyosin und DNase I. Phalloidinmarkierte Filamente können weiterhin feste Myosinmatrizen durchdringen, und Glycerin-extrahierte Muskelfasern können sich nach der Markierung kontrahieren.

Die Bindung von Phalloidin hemmt die Depolymerisation von filamentösem Aktin (Mikrofilamenten), stabilisiert deren Struktur und stört das dynamische Gleichgewicht von Polymerisation und Depolymerisation. Diese Eigenschaft reduziert die kritische Konzentration (CC) für die Aktinpolymerisation auf unter 1 µg/ml und macht Phalloidin zu einem wirksamen Polymerisationsförderer. Zusätzlich hemmt Phalloidin die ATP-Hydrolyseaktivität von F-Aktin.

Bei diesem Produkt handelt es sich um TRITC (Tetramethylrhodaminisothiocyanat)-markiertes Phalloidin, das eine hohe Spezifität und Kontrastfärbung bietet, die Aktin-Antikörpern überlegen ist. Es eignet sich für den qualitativen und quantitativen Nachweis von F-Aktin. Das von diesem Produkt gebundene F-Aktin behält viele biologische Eigenschaften von Aktin selbst. Darüber hinaus weist dieses Produkt keine Speziesunterschiede auf und ist breit anwendbar.

Wir bieten TRITC-markiertes Phalloidin in zwei Formen an: als gefriergetrocknetes Pulver (Kat.-Nr.: 40734ES80) und als Aufbewahrungslösung (Kat.-Nr.: 40734ES75, 20 µM Konzentration). Anwender können je nach Bedarf wählen. Die empfohlene Arbeitskonzentration beträgt 80–200 nM.

Merkmale

Bindet selektiv an filamentöses Aktin (F-Aktin).

Phalloidin ist nicht speziesspezifisch und weist praktisch keine unspezifische Färbung auf. Dadurch wird ein extrem klarer Kontrast zwischen gefärbten und ungefärbten Bereichen geschaffen.

Es ist hochverträglich und beeinträchtigt die Aktivität von Aktin nicht.

Anwendungen

Die enge und selektive Bindung an F-Aktin zeigt die Verteilung des Mikrofilament-Zytoskeletts innerhalb der Zelle.

Technische Daten

Komponenten

Versand und Lagerung

Das Produkt wird mit einem Kühlakku geliefert. Kann bei -15 °C bis -25 °C in einer dunklen, trockenen Umgebung bis zu einem Jahr gelagert werden.

Unterlagen:

Sicherheitsdatenblatt

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Benutzerhandbücher

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